理化法快速鉴别周围神经束性质

目的探索一种快速鉴别感觉与运动神经束的方法。方法纯种Wistar大鼠30只,处死后取整条脊柱。取脊神经节及背根纤维、腹根纤维及坐骨神经,采用免疫印迹实验观察Annexin V和Agrin特异性。其中15只大鼠作为实验组,取脊神经前根、后根、坐骨神经及其肌支、皮支行免疫组织化学染色;余15只用PBS代替一抗作为对照组。12月龄健康新西兰大白兔16只,采用喇曼光谱法对不同性质的神经束进行研究。结果Annexin V和Agrin分别是感觉神经与运动神经中的特异物质。运动神经与感觉神经的喇曼光谱在1088、1276、1439、1579及1659cm-1等附近的喇曼振动峰相对强度存在明显差异,1276cm-1处的峰值与1439cm-1处的峰值比I1276/I1439分别为0.95±0.06和1.17±0.08,提示运动神经与感觉神经间的微观结构差异(P<0.05)。结论显微激光喇曼光谱法是一种鉴别神经束性质的有效的物理学方法,优于免疫组织化学法,具有临床应用的可行性。

显微拉曼光谱技术联合Karnovsky-Roots染色法快速鉴别周围神经纤维的功能性质

目的研究周围神经内部运动神经纤维和感觉神经纤维经Karnovsky-Roots染色后的显微拉曼光谱特征及该法对两种不同功能性质的神经纤维进行快速识别。方法取新西兰大白兔20只，分别取其双侧骶1脊神经前根和后根各20例标本作30μm冰冻切片，切片在Karnovsky-Roots染色30rain前后分别在显微拉曼光谱仪下用波长633nm的激光束聚焦于神经纤维断面进行拉曼光谱采集。取其中各1例脊神经前根和后根标本染色8h后作同样处理。对2100cm。和1440cm。拉曼强度的比值进行统计分析，获得可以区分运动神经纤维和感觉神经纤维的分类算法；将其余各20例脊神经前根和后根标本经染色30min后的拉曼光谱与解剖学“金标准”比较，行诊断性试验。结果（1）染色30min后，运动神经纤维的拉曼光谱在2100～2160cm。出现明显的拉曼强度，在感觉神经纤维的拉曼光谱中则没有；（2）染色30rain后运动神经纤维I2100／I1440比值与感觉神经纤维相比差异具有统计学意义；I2100／I1440〉0．2的神经纤维可以认为是染色结果阳性，即为运动神经纤维。结论经纤维经Karnovsky-Roots染色30min后，运动神经纤维与感觉神的拉曼光谱可根据I2100／I1440比值加以区分。显微拉曼光谱可以显著加快Karnovsky-Roots染色鉴别运动神经纤维和感觉神经纤维功能性质的速度。