重组nesfatin-1蛋白对ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7泡沫化的抑制作用和机制研究

目的探究nesfatin-1对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞泡沫化的作用和分子机制。方法将小鼠RAW264.7巨噬细胞分成3组:对照组(不进行任何处理)、模型组(加入80 mg/L ox-LDL诱导泡沫细胞形成)、nesfatin-1组(加入80 mg/L ox-LDL前2 h加入1×10-8mol/L重组小鼠nesfatin-1蛋白)。油红O染色观察泡沫细胞的形成;试剂盒检测细胞内胆固醇水平[总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)和胆固醇酯化率(CER)];Western blot检测nesfatin-1蛋白、脂质摄取相关蛋白(CD36和LOX-1)与胆固醇排出调节蛋白(ABCA1和ABCG1)和AMPK通路蛋白[AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)]表达。结果与对照组相比,模型组中nesfatin-1蛋白表达显著降低,细胞质中出现大量被染成红色的脂质颗粒,TC、FC、CE和CER水平升高,CD36和LOX-1表达上调,ABCA1、ABCG1和p-AMPK/AMPK水平下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,nesfatin-1组中红色的脂质颗粒减少,TC、CE和CER水平降低,LOX-1表达下调,ABCG1和p-AMPK/AMPK水平上调,差异均有统计学意义(P<0.05);而CD36和ABCA1表达变化不大,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在ox-LDL诱导的泡沫细胞中nesfatin-1表达下调,nesfatin-1重组蛋白可抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化,这极可能是通过激活AMPK通路,进而下调LOX-1表达,上调ABCG1表达发挥作用的。

α-肌动蛋白1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及与临床-病理特征、预后的相关性

目的 探讨α-肌动蛋白1(ACTN1)在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)中的表达及与临床-病理特征、预后的相关性。方法 纳入150例CSCC患者(CSCC组)和100例正常体检者(对照组)作为研究对象。血清中ACTN1表达水平采用ELISA法检测。对CSCC患者术后进行随访并分为预后不良组(n=69)和预后良好组(n=81),预后不良组中69例CSCC患者根据ACTN1中位表达水平分为ACTN1低表达组(n=35)和ACTN1高表达组(n=34)。logistic回归分析CSCC患者发生预后不良的危险因素,血清中ACTN1表达水平预测CSCC患者发生预后不良的临床效能采用ROC曲线分析,K-M曲线分析血清中ACTN1表达水平与CSCC患者发生预后不良中位时间的关系。纳入40例CSCC患者作为独立验证样本,采用免疫组化法比较ACTN1在CSCC组织及癌旁组织中的表达差异。结果 对照组和CSCC组血清中ACTN1表达水平分别为(4.56±1.02)和(12.12±2.26)ng/mL,与对照组相比,CSCC组血清中ACTN1表达水平显著升高,差异有统计学意义(t=31.37,P <0.001)。预后不良组肿瘤直径≥5 cm、肿瘤细胞分化程度为低分化、肿瘤浸润深度为脂肪下层、有淋巴结转移占比及血清ACTN1表达水平显著高于预后良好组,差异均有统计学意义(P <0.05)。logistic回归分析显示,淋巴结转移(OR=3.253)、ACTN1(OR=2.894)是CSCC患者术后出现预后不良的独立危险因素。血清中ACTN1表达水平预测CSCC患者术后发生预后不良的曲线下面积为0.911,当截断值为13.19 ng/mL,诊断敏感度和特异度分别为89.78%和92.12%。ACTN1低表达组和高表达组发生预后不良的中位时间分别为25个月和18.5个月,相对于ACTN1低表达组,ACTN1高表达组发生预后不良的中位时间显著缩短(HR=6.627,P <0.001)。40例CSCC组织中ACTN1高表达32例,ACTN1低表达8例;CSCC癌旁组织中ACTN1高表达11例,ACTN1低表达29例,与癌旁组织相比,ACTN1高表达率在CSCC组织中显著升高(χ~2=22.175,P <0.001)。结论 CSCC患者血清中ACTN1表达水平显著升高,可作为CSCC患者术后评估预后的一项生物学标志物。

七氟醚可逆性下调糖尿病模型大鼠心肌生物钟蛋白BMAL1的表达

目的观察七氟醚(SEV)对糖尿病大鼠心肌生物钟基因芳香烃受体核转运样蛋白1(BMALl1)表达的影响,并探讨其变化规律。方法雄性SD大鼠60只,体质量200~250 g,将正常大鼠分为吸氧组(NC)、吸七氟醚组(SEV);常规建立糖尿病模型,建立成功后分为吸氧组(DM)、吸七氟醚组(DM+SEV),吸入时间5 h(n=15)。4组试验动物分别在停止麻醉后0、12和24 h处死,分离心肌组织。用Western blot测定生物钟基因BMAL1与其活化酶泛素特异性肽酶9X(USP9X)的表达;HE染色观察心肌组织病理特征以及免疫荧光共定位观察USP9X与BMAL1之间的相互关系。结果停止麻醉后0、12 h,与DM组比较,DM+SEV组BMAL1、USP9X表达均明显下调(P<0.05);停止麻醉后24 h,与DM组比较,DM+SEV组BMAL1、USP9X表达水平的变化差异无统计学意义。HE染色光镜下显示:DM+SEV组在停止麻醉后0、12 h时心肌组织纤维结构排列发生改变,且在停止麻醉后0 h时这种改变最为显著,但在24 h时心肌组织结构排列整齐。免疫荧光共定位结果显示:USP9X与BMAL1蛋白主要分布于心肌细胞质中,两者存在重叠部分。且受七氟醚影响,在停止麻醉后0、12 h两者重叠部分较少,而在24 h时两者重叠部分较多,接近于DM组。结论七氟醚可逆性改变糖尿病大鼠心肌生物钟基因BMAL1表达,该作用在停止麻醉后12 h仍然存在,而在停止麻醉后24 h该作用明显减弱。

颈动脉超声血流参数联合血清分拣蛋白及对氧磷脂酶1对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的诊断价值

目的:探讨颈动脉超声血流参数联合血清分拣蛋白(Sortilin)、对氧磷脂酶1(PON-1)对颈动脉粥样硬化斑块(CAP)稳定性的诊断价值。方法:选取2021年1月至2023年12月如皋市中医院收治的100例CAP患者,依据CAP稳定性将其分为稳定组(54例)和不稳定组(46例)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组患者的血清Sortilin、PON-1表达水平;采用多因素logistic回归分析CAP稳定性的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析颈动脉超声血流参数联合Sortilin、PON-1对CAP稳定性的诊断效能。结果:与稳定组相比,不稳定组舒张末期血流速度(EDV)、颈动脉内膜中层厚度(IMT)升高,收缩期峰值血流速度(PSV)降低,两组比较差异有统计学意义(t=7.536、4.680、5.487,P<0.05)。与稳定组相比,不稳定组血清Sortilin水平显著增加,PON-1水平显著降低,两组比较差异有统计学意义(t=8.362、5.581,P<0.05)。多因素logistic分析发现,Sortilin是影响CAP稳定性的危险因素(OR=3.165,P<0.05),而PON-1是影响CAP稳定性的保护因素(OR=0.765,P<0.05)。ROC曲线分析显示,Sortilin、PON-1、EDV、IMT、PSV及5项联合诊断CAP稳定性的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.788(95%CI:0.695~0.864)、0.814(95%CI:0.724~0.885)、0.847(95%CI:0.761~0.911)、0.767(95%CI:0.672~0.846)、0.707(95%CI:0.607~0.793)和0.963(95%CI:0.839~0.907)。Sortilin、PON-1、EDV、IMT及PSV 5项联合诊断CAP稳定性的AUC最高,优于单独诊断,其灵敏度为95.65%,特异度为83.33%。结论:超声血流参数EDV、IMT和PSV能够提供CAP的形态学及血流动力学信息,血清Sortilin、PON-1水平能够反映CAP斑块形成与发展的生物学过程,5项指标联合检测可以更好的诊断CAP稳定性。

血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3和可溶性血管内皮生长因子受体-1水平与突发性耳聋患者病情及预后的关系分析

目的探讨血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFIt-1)水平与突发性耳聋患者病情及预后的关系。方法选取2022年1月至2024年1月陕西省人民医院收治的78例突发性耳聋患者作为研究组。男46例,女32例;年龄32~76(47.92±4.65)岁;体重指数20.37~27.94(24.57±3.24)kg/m^(2)。另外,选取同期38例体检健康志愿者作为参照组,男21例,女17例,年龄34~63(48.23±4.81)岁;体重指数19.86~22.51(20.87±2.39)kg/m^(2)。采用纯音测听检查评估突发性耳聋患者病情,并根据严重程度进行分组,重度组16例[纯音平均听阈(PTA)>60 dBHL]、中度组39例(PTA>40~60 dBHL)、轻度组23例(PTA 20~40 dBHL)。所有患者均给予激素、营养神经等治疗,10 d为1个疗程,10 d后评估患者预后。根据预后情况将治疗后突发性耳聋患者分为预后良好组(57例)和预后不良组(21例)。采用酶联免疫吸附法检测受试者血清Caspase-3、sFIt-1水平。收集受试者一般资料,包括性别、年龄、体重指数、病程、临床症状、耳聋部位、听力损失程度、基础疾病等。采用独立样本t检验、重复测量方差分析和χ2检验进行统计学分析。采用Spearman秩相关系数进行相关性分析。采用多因素logistic回归分析突发性耳聋患者预后的影响因素。采用受试者操作特征曲线(ROC)分析血清Caspase-3、sFIt-1水平对突发性耳聋患者预后的预测效能。结果研究组血清Caspase-3、sFIt-1水平均高于参照组[(17.27±3.14)ng/L比(6.63±1.67)ng/L、(157.82±13.47)ng/L比(81.67±10.63)ng/L](均P<0.05)。重度、中度组Caspase-3、sFIt-1水平均高于轻度组,重度组上述指标均高于中度组(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,突发性耳聋患者血清Caspase-3、sFIt-1水平与病情严重程度呈正相关(r=0.881、0.841,均P<0.05)。预后不良组和预后良好组年龄、听力损伤程度、血清Caspase-3、sFIt-1水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,听力损失程度(OR:0.009,95%CI:0.000~0.209)、年龄(OR:1.165,95%CI:1.049~1.293)、血清Caspase-3(OR:1.546,95%CI:1.183~2.022)、sFIt-1(OR:1.058,95%CI:1.015~1.104)水平均是突发性耳聋患者预后的影响因素(均P<0.05)。ROC分析结果显示,血清Caspase-3、sFIt-1水平联合预测的曲线下面积(AUC)大于血清Caspase-3、sFIt-1水平单独预测。其中联合预测灵敏度66.67%,特异度87.72%,AUC为0.819(0.712~0.925);Caspase-3灵敏度52.38%,特异度82.46%,AUC为0.721(0.593~0.849);sFIt-1灵敏度52.38%,特异度84.21%,AUC为0.703(0.573~0.832)。结论血清Caspase-3、sFlt-1水平升高可反映突发性耳聋患者病情严重程度,二者联合检测可更准确评估患者预后情况。

脂质转移蛋白SiLTP1基因参与谷子耐盐响应初探

土壤盐渍化严重制约农业生产发展,通过提高植物耐盐性进行盐碱地综合利用,对于保障粮食安全,提升农业生产效率具有重要意义。脂质转移蛋白是一类在高等植物中广泛存在的小分子蛋白质,能够参与植株生长、信号转导以及多种生物和非生物胁迫过程。前期本课题组克隆到一个谷子中编码脂质转移蛋白的基因SiLTP1,本研究通过构建其原核表达载体和植物双元过表达载体,获得了该基因的原核表达蛋白及同源转化过表达阳性植株,经进一步筛选获得4个纯合株系。体外耐盐性试验显示, SiLTP1的原核表达蛋白具有一定耐盐性;转基因植株苗期耐盐生理指标测定显示,SiLTP1过表达植株在遭受盐胁迫时,植株体内MDA积累减少,抗氧化酶含量升高,可积累更少的过氧化氢,从而降低胁迫对植株的氧化损伤,显示基因过表达植株具有更好的耐盐性。本研究结果初步揭示, SiLTP1可正向调控谷子的耐盐性,其在谷子耐盐抗逆方面具有潜在功能,为耐盐谷子品种改良及新品种培育提供了理论基础和候选基因资源。

miR-221对奶牛乳腺上皮细胞乳脂、乳蛋白合成的影响及作用机制

文章利用体外分离培养奶牛乳腺上皮细胞研究miR-221对乳脂和乳蛋白合成的影响。将miR-221转染至奶牛乳腺上皮细胞中,应用QRT-PCR检测miR-221表达量,应用Western blot技术和组织细胞甘油三酯(TG)含量酶法分别检测β-酪蛋白和甘油三酯含量。利用双荧光素酶试验分析miR-221和IGF-1的靶向关系,检测转染miR-221后IGF-1和相关泌乳信号通路蛋白表达的变化。结果表明,在奶牛乳腺上皮细胞中转染miR-221后,miR-221表达显著上升,β-酪蛋白和甘油三酯含量显著降低;泌乳调节相关基因IGF-1与miR-221具有靶向关系,过表达miR-221后,IGF-1、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的表达也显著降低,表明miR-221可能通过靶向抑制IGF-1进而影响AKT/mTOR信号通路来影响乳脂和乳蛋白合成。

磷酸蛋白酶1基因在恶性肿瘤中的作用及其研究进展

磷酸蛋白酶1(SPP1)是糖蛋白家族成员之一,广泛表达于肺腺癌、胃癌、食管鳞状细胞癌等肿瘤组织,在多种肿瘤中具有生物标志物的特性。SPP1通过与配体相互作用,影响下游信号通路,使肿瘤免疫微环境处于抑制状态,从而介导多种恶性肿瘤生长、浸润和转移;SPP1亦可通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路介导卵巢癌、肝细胞癌出现耐药,而研究表明SPP1抑制剂可以逆转肿瘤耐药,减慢肿瘤发展过程。SPP1有希望成为恶性肿瘤潜在的诊断治疗靶点之一,该研究就SPP1基因在恶性肿瘤研究中进展作一综述。

含LIM调宁蛋白同源域蛋白1可能作为辅助口腔鳞状细胞癌预后判断的生物学标志物

目的:探究含LIM调宁蛋白同源域蛋白1(LIM and calponin homology domains 1,LIMCH1)在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用及潜在应用价值。方法:利用口腔鳞状细胞癌患者组织样本全转录组测序结合GO(Gene Ontology)、基因共表达网络等生物信息学分析方法筛选可能在口腔鳞状细胞癌发生发展中起关键作用的基因,使用12组口腔鳞状细胞癌患者组织样本采用实时定量PCR及Western blotting验证其表达趋势,采用CCK-8、流式细胞术、划痕实验等探究关键基因对口腔鳞状细胞癌细胞系Cal27及口腔潜在恶性病变细胞系DOK生物学行为的影响,并采用TCGA(The Cancer Genome Atlas)中214例口腔鳞状细胞癌患者生存数据分析关键基因与患者临床疾病信息的关联,同时结合基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)的方法分析结果辅以实时定量PCR及Western blot探究关键基因可能的作用机制。结果:测序数据结合生物信息学分析发现LIMCH1在口腔鳞状细胞癌组织中mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.01)表达显著低于正常对照组织。Cal27中LIMCH1低表达组24 h内划痕愈合面积大于高表达组(P<0.01),72 h内增殖能力高于高表达组(P<0.01),24 h凋亡率高于其高表达组(P<0.05),而DOK中LIMCH1低表达组与其高表达组差异无统计学意义。同时发现LIMCH1低表达与患者较差的远期预后(P=0.013)及较高的淋巴结转移率(P<0.05)相关。对于LIMCH1潜在作用机制的探究中明确其并非通过上皮-间质转化途径影响口腔鳞状细胞癌的发生和发展。结论:LIMCH1可能作为辅助口腔鳞状细胞癌预后判断的潜在生物学标志物,但其具体作用机制仍有待深入探究。

基于PI3K/AKT信号通路探讨DJ-1蛋白对抑郁症大鼠海马中神经递质的影响

目的探讨DJ-1蛋白对抑郁症大鼠神经递质的影响。方法TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling)试剂盒检测细胞凋亡率。酶联免疫吸附法测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,海马区中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、多巴胺(dopamine,DA)的水平;蛋白质印迹检测海马区DJ-1、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、p-PI3K、p-AKT、Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达。结果过表达DJ-1后能明显降低中细胞凋亡率和血清中TNF-α和IL-6的含量,上调海马区5-HT、5-HIAA、DA的水平,上调p-PI3K、p-AKT和Bcl-2的表达,抑制Bax的表达,但PI3K抑制剂LY294002可部分解除过表达DJ-1对神经元细胞的保护作用。结论过表达DJ-1后能明显抑制抑郁症大鼠炎症性应激,降低细胞的凋亡率,上调中5-HT、5-HIAA和DA的含量,这可能与激活PI3K/AKT信号有关。

腹膜透析滤出液外泌体细胞因子信号抑制物1、斑点蛋白140、钙周期蛋白结合蛋白表达对腹膜纤维化的诊断价值

目的研究腹膜透析滤出液外泌体细胞因子信号抑制物1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)、斑点蛋白140(speckled protein 140,SP140)、钙周期蛋白结合蛋白(calcyclin binding protein,CacyBP)表达对腹膜纤维化(peritoneal fibrosis,PF)的诊断价值。方法选择2021年11月1日至2023年9月30日期间河北北方学院附属第一医院行腹膜透析的90例终末期肾病患者作为研究对象,根据腹膜组织活检分为符合PF的PF组(n=38)和排除PF的对照组(n=52)。采用荧光定量聚合酶链式反应检测腹膜透析滤出液外泌体SOCS1、SP140、CacyBP的mRNA表达水平,采用腹膜平衡试验检测4 h超滤量、4 h时透析液肌酐与血肌酐比值(4 h dialysate/plasma creatinine,4 h D/PCr)、4 h和0 h时透析液葡萄糖含量比值(dialysate/dialysate at 0 h,D/D0)。分析SOCS1、SP140、CacyBP表达对PF的诊断价值。结果PF组患者腹膜透析滤出液外泌体SOCS1[(0.84±0.11)比(1.00±0.15)]、SP140[(0.82±0.12)比(1.00±0.13)]、CacyBP[(0.85±0.09)比(1.00±0.13)]的mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。两组内、PF组内、对照组内腹膜透析滤出液外泌体SOCS1、SP140、CacyBP的mRNA表达水平与4 h超滤量、4 h D/PCr呈正相关,与D/D0呈负相关(P<0.05)。SOCS1、SP140、CacyBP表达水平对PF具有诊断价值,三者联合诊断PF的曲线下面积最大,为0.967(95%CI:0.936~0.997),灵敏度和特异度分别为90.38%和92.11%。结论腹膜透析滤出液外泌体SOCS1、SP140、CacyBP表达降低与PF相关,三项指标联合对PF具有较好的诊断价值。

γ-氨基丁酸A型受体相关蛋白1介导自噬在胃癌中作用的研究进展

胃癌是消化道中常见的恶性肿瘤之一,是全球癌症相关的主要死因之一。化疗是晚期胃癌的常规治疗方法,而化疗耐药性是胃癌预后不良的重要原因。自噬是一种高度保守的代谢过程,自噬调控胃癌的发展与化疗耐药性。γ-氨基丁酸A型受体相关蛋白1(GABARAPL1)是一种泛素样蛋白,在自噬过程中起重要作用,微小RNA/长链非编码RNA/环状RNA-GABARAPL1轴可能是胃癌发展、化疗耐药的关键机制。本文就GABARAPL1调控自噬的机制及其对胃癌发展、化疗耐药性的研究进展作一综述,以期为胃癌治疗提供新的思路。

老年脑梗死患者血清可溶性细胞间黏附分子、视锥蛋白样蛋白1水平与血管性痴呆的关系研究

目的 分析老年脑梗死患者血清可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)、视锥蛋白样蛋白1(VILIP-1)水平与血管性痴呆(VD)的关系。方法 选取2021年3月至2023年3月河南省洛阳正骨医院收治的180例老年脑梗死患者,根据患者随访6个月内是否发生VD分为VD组和非VD组。比较两组一般资料,血清sICAM-1、VILIP-1水平及简易精神状态量表(MMSE)评分;分析血清sICAM-1、VILIP-1水平与MMSE相关性,评估血清sICAM-1、VILIP-1水平对VD预测价值。结果 VD组血清sICAM-1、VILIP-1水平高于非VD组,MMSE评分低于非VD组(P<0.05);血清sICAM-1、VILIP-1水平与MMSE均呈负相关(P<0.05);血清sICAM-1、VILIP-1水平对VD预测及联合预测的AUC值依次为0.721、0.892、0.919。结论 血清sICAM-1、VILIP-1水平与脑梗死患者发生VD密切相关,监测这些指标有助于指导临床预防VD的发生和早期干预。

过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞促进小鼠皮肤创面愈合

背景:神经调节蛋白1具有促进细胞增殖、分化以及血管生长等特性。人羊膜间充质干细胞是组织工程领域重要的种子细胞,已被证实参与组织修复及再生过程。目的:构建过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞,探究其增殖、迁移能力以及对创面愈合的影响。方法:(1)体外分离培养人羊膜间充质干细胞并对其进行鉴定;(2)构建神经调节蛋白1过表达慢病毒,将人羊膜间充质干细胞分为空载组、神经调节蛋白1组、对照组,分别转染空载慢病毒、过表达神经调节蛋白1慢病毒,对照组不进行转染;(3)EdU实验检测各组细胞增殖能力,Transwell实验检测各组细胞迁移能力;(4)构建C57BL/6小鼠创面损伤模型,随机分成对照组、空载组和神经调节蛋白1组,每组8只,分别在创面局部多点均匀注射1 mL转染空载慢病毒或转染过表达神经调节蛋白1慢病毒的人羊膜间充质干细胞,对照组注射等量的生理盐水;(5)造模后1,7,14 d观察创面愈合情况,苏木精-伊红染色观察创面愈合组织学变化,免疫组化观察创面CD31的表达。结果与结论:(1)成功构建过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞,细胞内神经调节蛋白1的mRNA、蛋白表达较空载组明显上调(P<0.05);(2)过表达神经调节蛋白1促进了人羊膜间充质干细胞的迁移(P<0.01)和增殖(P<0.05);(3)过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞促进了小鼠创面愈合(P<0.05)和创面的血管生成(P<0.05)。结果表明,过表达神经调节蛋白1提高了人羊膜间充质干细胞的增殖和迁移能力,以及增强了促进创面愈合和创面血管生成的能力。

血管介入栓塞术治疗动脉瘤性蛛网膜下腔出血疗效及对患者血清高迁移率族蛋白B1、血清可溶性细胞间黏附因子-1、可溶性血管细胞黏附因子-1的影响

目的:探讨血管介入栓塞术治疗动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)的疗效及对血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、血清可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附因子-1(sVCAM-1)的影响。方法:选择92例aSAH患者为研究目标,根据手术方法不同分为对照组(颅内动脉瘤夹闭术治疗)46例,观察组(血管介入栓塞术治疗)46例,比较两组手术前后免疫功能及sICAM-1、sVCAM-1、HMGB1水平变化,记录手术时间、并发症发生率、住院时间,并评估预后情况。结果:观察组手术时间、住院时间分别为(92.03±14.97)min、(18.73±4.41)d均短于对照组的手术时间(147.92±34.21)min,术后住院时间(23.35±4.15)d(均P<0.05);术后观察组免疫功能高于对照组(P<0.05);观察组术后HMGB1、sICAM-1、sVCAM-1水平低于对照组(均P<0.05);对照组不良反应总发生率高于观察组(P<0.05);对照组知期预后良好率低于观察组(P<0.05)。结论:血管介入栓塞术治疗aSAH手术耗时短、脑血管痉挛发生率低、免疫状态影响小,并可明降低血清HMGB1、sICAM-1、sVCAM-1水平。

利用酵母双杂交系统筛选甜菜BvFVE1互作蛋白

【目的】为了探究甜菜WD-40重复蛋白MSI4(BvFVE1)在调控甜菜生长发育中的潜在功能。【方法】以甜菜品种‘KWS9147’幼苗为材料提取RNA,构建的酵母cDNA文库作为猎物蛋白。利用酵母双杂交系统鉴定酵母cDNA文库中与BvFVE1相互作用的蛋白。【结果】通过含有X-α-Gal四缺培养基筛选后,共鉴定出40种可能与BvFVE1相互作用的蛋白。对这些蛋白功能进行注释发现BvFVE1互作蛋白主要参与mRNA降解代谢、蛋白质翻译、细胞骨架的形成等过程。【结论】这些结果说明BvFVE1可能参与染色质重塑相关的基因表达,为今后探索BvFVE1的生物学功能提供了分子基础。

血清多配体蛋白聚糖1和肽基精氨酸脱氨基酶2水平与感染性休克患者病情及预后的关系研究

目的探讨血清多配体蛋白聚糖1(SDC-1)、肽基精氨酸脱氨基酶2(PAD2)水平与感染性休克(SS)患者病情及预后的关系。方法选取2021年1月至2024年1月新疆医科大学第五附属医院重症监护病房收治的SS患者124例(SS组)和同期53名体检健康者(对照组),SS患者根据急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分分为轻度SS组(33例)、中度SS组(42例)、重度SS组(49例),根据28 d预后分为死亡组和存活组。采用酶联免疫吸附试验法检测血清SDC-1、PAD2水平;Spearman相关系数分析SS患者血清SDC-1、PAD2水平与APACHEⅡ评分的相关性;以SS患者预后为因变量,多因素非条件Logistic回归方法确定其影响因素,绘制受试者工作特征曲线评价血清SDC-1、PAD2水平对SS患者死亡的预测价值。结果SS组血清SDC-1、PAD2水平均高于对照组[(17.2±3.4)μg/L比(9.5±2.1)μg/L、(43±6)μg/L比(29±5)μg/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。重度SS组血清SDC-1、PAD2水平高于中度SS组、轻度SS组,且中度SS组均高于轻度SS组(均P<0.001)。SS患者血清SDC-1、PAD2水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r s=0.840、0.846,均P<0.001)。124例SS患者28 d死亡51例(死亡组),存活73例(存活组)。Logistic回归分析结果显示,机械通气时间≥3 d、APACHEⅡ评分增加、SDC-1升高、PAD2升高为SS患者死亡的独立危险因素,氧合指数增加为独立保护因素(均P<0.05)。血清SDC-1、PAD2水平联合预测SS患者死亡的曲线下面积为0.869,大于血清SDC-1、PAD2水平单独预测的0.779、0.784(均P<0.05)。结论血清SDC-1、PAD2水平升高与SS患者病情加重和预后不良有关,血清SDC-1、PAD2水平联合预测SS患者死亡的价值较高。

猪流行性腹泻病毒S1蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

以猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S1蛋白为研究对象,构建PEDV S1的杆状病毒系统并稳定表达高纯度的S1蛋白,制备高特异性的S1蛋白多克隆抗体。基于多种基因型PEDV S1基因序列信息,使用生物信息学技术分析其理化特性、跨膜结构域、抗原表位和二级结构等性质。进一步对S1基因序列进行适用于昆虫细胞表达的密码子优化,通过基因合成、载体构建、杆粒转化、细胞培养等步骤,构建适用于表达PEDV S1重组蛋白的Bac-to-Bac杆状病毒表达系统。通过镍柱亲和层析和超滤技术纯化S1重组蛋白,将其与弗氏佐剂混合乳化后免疫BALB/c小鼠,制备鼠多克隆抗血清(多抗血清)。通过间接免疫荧光(IFA)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western Blot)等方法,成功证明了本研究所建立的杆状病毒表达系统能够有效地表达S1重组蛋白。ELISA和IFA验证了所得抗体在特异识别PEDV感染Vero细胞方面的有效性。本文成功构建了PEDV S1的杆状病毒表达系统,稳定表达了高纯度的S1蛋白,并制备了具有高特异性的S1蛋白多克隆抗体,为未来猪流行性腹泻单克隆抗体的制备及检测试剂的研发奠定了基础。

Nesfatin-1对肥胖大鼠糖脂代谢的影响研究

为了探究Nesfatin-1对肥胖大鼠糖脂代谢的影响,试验首先将40只8周龄健康SPF级SD大鼠随机分为对照组(n=8)和模型组(n=32),对照组饲喂维持日粮,模型组饲喂高脂日粮,连续饲喂10周,当模型组体重(空腹条件下)较对照组增加20%以上视为造模成功;将造模成功的32只大鼠随机分为模型对照组(n=8)和模型试验组[Nesfatin-1低剂量组(n=8)、Nesfatin-1中剂量组(n=8)和Nesfatin-1高剂量组(n=8)],Nesfatin-1低、中、高剂量组按体重分别尾静脉注射1,10,100μg/kg的Nesfatin-1,每天1次,连续给药5周;对照组和模型对照组按体重10 mL/kg注射生理盐水,每天1次,连续注射5周。试验结束后,采用ELISA方法检测各组血清游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)浓度,采集各组大鼠肝脏组织进行称重,采用实时荧光定量PCR方法检测各组肝脏中与糖脂代谢相关的miR-122、miR-802的表达水平及肩胛骨脂肪组织中解偶联蛋白-1(uncoupling protein-1,UCP-1)基因mRNA的表达,并采用BCA法测定对照组、模型对照组及与模型对照组肩胛骨脂肪组织中UCP-1基因mRNA表达水平有显著差异的模型试验组UCP-1蛋白浓度。结果表明:与对照组相比,模型对照组血清FFA、TC、TG、TNF-α浓度,肝脏重量及肝脏组织miR-122、miR-802的相对表达量显著升高(P<0.05),血清IL-10浓度、肩胛骨脂肪组织UCP-1基因mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),脂肪组织UCP-1蛋白表达水平差异不显著(P>0.05);与模型对照组相比,Nesfatin-1低剂量组血清FFA浓度显著降低(P<0.05),Nesfatin-1中、高剂量组差异不显著(P>0.05);Nesfatin-1低、中、高剂量组血清TC浓度均显著降低(P<0.05);Nesfatin-1中、高剂量组血清TG浓度显著降低(P<0.05),Nesfatin-1低剂量组差异不显著(P>0.05);Nesfatin-1低、中、高剂量组血清TNF-α浓度均显著降低(P<0.05),IL-10浓度均显著升高(P<0.05);Nesfatin-1中、高剂量组肝脏重量显著降低(P<0.05),Nesfatin-1低剂量组差异不显著(P>0.05);Nesfatin-1低、高剂量组肝脏组织miR-122的相对表达量显著降低(P<0.05),Nesfatin-1中剂量组差异不显著(P<0.05);Nesfatin-1低、中、高剂量组肝脏组织miR-802的相对表达量均显著降低(P<0.05);Nesfatin-1高剂量组脂肪组织UCP-1基因mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),Nesfatin-1低、中剂量组差异不显著(P>0.05);Nesfatin-1高剂量组脂肪组织UCP-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。说明Nesfatin-1对机体糖脂代谢具有促进作用。

CT定位下微创引流术对高血压脑出血患者血清网膜素1及人星形胶质源性蛋白水平的影响

目的:探讨CT定位下微创引流术对高血压脑出血患者血清网膜素1(Omentin-1)及人星形胶质源性蛋白(S100B)水平的影响。方法:选取2021年1月至2024年3月在哈尔滨医科大学附属第一医院诊断的120例高血压脑出血患者,按照随机数表法将其分为研究组和对照组,每组60例,研究组采用CT定位下微创引流术治疗,对照组采用常规开颅手术治疗。比较两组患者的治疗效果,神经功能、脑水肿、血清Omentin-1及S100B水平之间的差异。结果:研究组60例患者中显效45例(占75.00%),有效11例(占18.33%),无效4例(占6.67%),治疗总有效率为93.33%;对照组60例患者中显效6例(占10.00%),有效42例(占70.00%),无效12例(占20.00%),治疗总有效率为80.00%,研究组治疗总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.621,P<0.05)。研究组术后6个月格拉斯哥预后量表(GOS)评分1级0例(占0.00%),2级6例(占10.00%),3级10例(占16.67%),4级2例(占3.33%),5级42例(占70.00%);对照组GOS评分1级2例(占3.33%),2级15例(占25.00%),3级5例(占8.33%),4级6例(占10.00%),5级32例(占53.33%);两组比较差异有统计学意义(U=2.112,P<0.05)。术后两组患者的脑水肿情况均得到显著的改善,且研究组术后2周和1个月的脑水肿体积显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(t=41.675、29.750,P<0.05)。两组患者血清Omentin-1、S100B均得到显著降低,且研究组术后Omentin-1、S100B显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(t=22.675、10.157,P<0.05)。结论:CT定位下微创引流术对高血压脑出血患者通过精确的CT定位引导,微创引流术能够有效减少脑出血区域的压力,促进血肿清除,同时通过调控血清Omentin-1和S100B水平,减少脑水肿,缓解脑组织损伤,术后神经功能恢复显著,整体治疗效果较好。