神经母细胞瘤组织及裸鼠荷瘤细胞RECK和MMP-14的表达及临床意义

目的检测RECK及膜型基质金属蛋白酶-14（MMP-14）在神经母细胞瘤患者蜡块标本中的表达，进一步检测将患者新鲜肿瘤标本原代培养建立的细胞系接种于裸鼠后自建的裸鼠原位荷瘤及转移瘤细胞系中二者的表达，比较裸鼠两种细胞中二者的表达差异及临床意义。方法首先采用PV-6000免疫组化方法检测临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例及节细胞神经瘤蜡块标本10例中RECK及MMP-14蛋向的表达。其次应用RT-PCR法检测自建裸鼠原位荷瘤及转移瘤细胞中RECK及MMP-14mRNA的表达。结果RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达（16．7％），并随肿瘤浸润深度的加深及远处转移的发生而降低（P=0．015）。MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中高表达（58．3％），并随肿瘤浸润深度的加深及远处转移的发生而增高（P=0．002）。裸鼠原位荷瘤细胞系中RECKmRNA的表达较裸鼠转移瘤细胞系中明碾增高（t=3．012，P〈0．05），MMP-14mRNA表达则明显降低（t=2．802，P〈0．05）。结论本研究提示，RECK及MMP-14蛋白和基因可能与神经母细胞瘤的浸润、转移有关，RECK及MMP-14可能在小儿神经母细胞瘤的发生、发展中起重要作用。

神经母细胞瘤细胞在鸡胚尿膜囊模型上生物学性状的研究

目的 探讨神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）鸡胚尿膜囊（chicken chorioallantoic membrane,CAM）血管模型的建立,以及缺氧诱导因子1α（hypoxia inducing factor-1α,HIF-1α）对神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y肿瘤生长和血管生成的影响.方法 含有目的 基因HIF1 α和对照组增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）的非增值性重组5型腺病毒分别转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y,检测目的 基因和目的 蛋白表达.SH-SY5Y细胞株经不同处理后分为两组：A组为空白对照组;SH-SY5Y细胞组;B组为HIF1 α-SH-SY5Y组;EGFP-SH-SY5Y组.不同组别细胞悬液分别种植于CAM,1周后A组提取组织RNA,检测人源性促血管相关基因的表达.B组于1周后测量肿瘤体积,分别测定肿瘤周嗣固定范围内放射状血管所占面积以及血管分支数.结果 RT-PCR和细胞免疫组化检测HIF1α转基因组较对照EGFP组目的 基因和蛋白表达水平显著增高,差异有显著统计学意义（P〈0.05）.A组SH-SY5Y细胞悬液种植于CAM膜后,肿瘤形成、周围放射状血管网络形成、肿瘤组织中检测到人源性促血管生长因子的表达.B组HIF1α转基因组血管计数、血管面积较对照EGFP组显著增多,差异有统计学意义（P〈0.05）,而肿瘤大小无显著统计学差异（P〉0.05）.结论 CAM模型作为NB血管模型有可行性.HIF-1 α与肿瘤血管生成具有显著相关性,可作为神经母细胞瘤患者预后评估的指标.