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Neural crest derived stem cells from dental pulp and tooth-associated stem cells for peripheral nerve regeneration 被引量:12
1
作者 Alessandra Pisciotta Laura Bertoni +3 位作者 Antonio Vallarola Giulia Bertani Daniela Mecugni Gianluca Carnevale 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第3期373-381,共9页
The peripheral nerve injuries,representing some of the most common types of traumatic lesions affecting the nervous system,are highly invalidating for the patients besides being a huge social burden.Although periphera... The peripheral nerve injuries,representing some of the most common types of traumatic lesions affecting the nervous system,are highly invalidating for the patients besides being a huge social burden.Although peripheral nervous system owns a higher regenerative capacity than does central nervous system,mostly depending on Schwann cells intervention in injury repair,several factors determine the extent of functional outcome after healing.Based on the injury type,different therapeutic approaches have been investigated so far.Nerve grafting and Schwann cell transplantation have represented the gold standard treatment for peripheral nerve injuries,however these approaches own limitations,such as scarce donor nerve availability and donor site morbidity.Cell based therapies might provide a suitable tool for peripheral nerve regeneration,in fact,the ability of different stem cell types to differentiate towards Schwann cells in combination with the use of different scaffolds have been widely investigated in animal models of peripheral nerve injuries in the last decade.Dental pulp is a promising cell source for regenerative medicine,because of the ease of isolation procedures,stem cell proliferation and multipotency abilities,which are due to the embryological origin from neural crest.In this article we review the literature concerning the application of tooth derived stem cell populations combined with different conduits to peripheral nerve injuries animal models,highlighting their regenerative contribution exerted through either glial differentiation and neuroprotective/neurotrophic effects on the host tissue. 展开更多
关键词 GLIAL differentiation human dental PULP stem cells nerve regeneration neural crest NEUROPROTECTION TOOTH
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Follicle and melanocyte stem cells, and their application in neuroscience A Web of Science-based literature analysis 被引量:1
2
作者 Weifu Wu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第34期2734-2741,共8页
OBJECTIVE: To identify global research trends of follicle and melanocyte stem cells, and their application in neuroscience. DATA RETRIEVAL: We performed a bibliometric analysis of studies from 2002 to 2011 on follic... OBJECTIVE: To identify global research trends of follicle and melanocyte stem cells, and their application in neuroscience. DATA RETRIEVAL: We performed a bibliometric analysis of studies from 2002 to 2011 on follicle and melanocyte stem cells, and their application in neuroscience, which were retrieved from the Web of Science, using the key words follicle stem cell or melanocyte stem cell, and neural, neuro or nerve. SELECTION CRITERIA: Inclusion criteria: (a) peer-reviewed published articles on follicle and melanocyte stem cells, and their application in neuroscience, which were indexed in the Web of Science; (b) original research articles, reviews, meeting abstracts, proceedings papers, book chapters, editorial material, and news items. Exclusion criteria: (a) articles that required manual searching or telephone access; (b) documents that were not published in the public domain; and (c) a number of corrected papers from the total number of articles. MAIN OUTCOME MEASURES: (1) Distribution of publications on follicle and melanocyte stem cells by years, journals, countries, institutions, institutions in China, and most cited papers. (2) Distribution of publications on the application of follicle and melanocyte stem cells in neuroscience by years, journals, countries, institutions, and most cited papers. RESULTS: Of the 348 publications from 2002 to 2011 on follicle and melanocyte stem cells, which were retrieved from the Web of Science, more than half were from American authors and institutes. The most prolific institutions in China for publication of papers on follicle and melanocyte stem cells were the Fourth Military Medical University and Third Military Medical University. The most prolific journals for publication of papers on follicle and melanocyte stem cells were the Journal of Investigative Dermatology, Pigment Cell & Melanoma Research. Of the 63 publications from 2002 to 2011 on the application of follicle and melanocyte stem cells in neuroscience, which were retrieved from the Web of Science, more than half were from American authors and institutes, and no papers were from Chinese authors and institutes. The most prolific journals for publication of papers on the application of follicle and melanocyte stem cells in neuroscience were the Journal of Investigative Dermatology, Pigment Cell & Melanoma Research. CONCLUSION: Based on our analysis of the literature and research trends, we found that follicle stem cells might offer further benefits in neural regenerative medicine. 展开更多
关键词 skin stem cell follicle stem cell melanocyte stem cell skin-derived precursor neural crest stem cell neuron glial cell differentiation BIBLIOMETRIC neural regeneration
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不同胚层来源成体干细胞修复周围神经损伤
3
作者 郑家晨 杨恩同 +1 位作者 朱弈舟 刘芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第19期4102-4110,共9页
背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研... 背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研究人员的关注。目的:对来自外胚层和中胚层的多功能成体干细胞在周围神经损伤修复与再生中的作用及机制进行简要综述,探究不同来源成体干细胞的研究进展与应用前景,并结合临床研究,探讨成体干细胞疗法潜在的应用价值以及亟待解决的问题。方法:第一作者于2024年2月应用计算机在PubMed和SinoMed数据库检索2001年12月至2024年2月相关文献,以“ectodermal stem cells,mesenchymal stem cells,peripheral nerve injury,repair,regeneration”为英文检索词,以“外胚层干细胞、间充质干细胞、周围神经损伤、修复、再生”为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析论述。结果与结论:①外胚层来源成体干细胞具有优异的分化和再生潜能,尤其是毛囊神经嵴干细胞、嗅干细胞、牙外胚层干细胞等,具有神经源性,可在体外表达神经特异性标志物,但目前缺少临床试验研究。②中胚层来源成体干细胞种类多、易获得及纯化,其中骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞在周围神经损伤修复的应用疗效及安全性方面有相关临床试验支持,能改善感觉及运动神经传导,且在随访中未出现并发症和明显不良反应。骨髓间充质干细胞的获取需行侵入性外科手术且要求患者与捐赠者骨髓配型吻合,应用受到一定限制;而脐带间充质干细胞虽无需侵入性获取,但分离较困难且表型不稳定。③内胚层来源成体干细胞常难以在体外生长,应用受限,目前应用于临床的可能性低。④综合来看,骨髓间充质干细胞仍为周围神经损伤干细胞治疗的首选细胞,适用于无外科手术禁忌且符合配型要求的情况,其次为脐带间充质干细胞,辅以分离方法的改进和表型稳定性的提高策略。⑤牙外胚层干细胞以及脂肪间充质干细胞具有较高应用潜能,有待进一步临床试验,其他外胚层、中胚层来源成体干细胞各以其优异特性在动物及细胞实验研究中具有显著优势。 展开更多
关键词 成体干细胞 周围神经损伤 毛囊神经嵴干细胞 嗅干细胞 牙外胚层干细胞 骨髓间充质干细胞 脐带间充质干细胞 羊水间充质干细胞 皮肤干细胞 肌肉间充质干细胞
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毛囊表皮神经嵴干细胞调节面神经损伤后局部炎症因子的表达水平 被引量:1
4
作者 唐笠 潘瑶 朱国臣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第33期5249-5255,共7页
背景:既往研究报道了毛囊表皮神经嵴干细胞在周围神经修复中的巨大潜力,但其炎症调节作用在面神经修复研究中鲜有报道。目的:探究毛囊表皮神经嵴干细胞能否调节面神经损伤后早期局部肿瘤坏死因子α和白细胞介素4表达水平,以促进面神经... 背景:既往研究报道了毛囊表皮神经嵴干细胞在周围神经修复中的巨大潜力,但其炎症调节作用在面神经修复研究中鲜有报道。目的:探究毛囊表皮神经嵴干细胞能否调节面神经损伤后早期局部肿瘤坏死因子α和白细胞介素4表达水平,以促进面神经功能和形态恢复。方法:提取4 d龄SD大鼠毛囊表皮神经嵴干细胞进行培养、鉴定。取54只成年雄性SD大鼠制备面神经干缺损自体静脉导管桥接模型,随机等分为生理盐水组、DMEM组和毛囊表皮神经嵴干细胞组。通过免疫蛋白印迹、免疫组化、免疫荧光观察术后4-14 d肿瘤坏死因子α和白细胞介素4表达水平。对术后12周大鼠进行面神经功能评分,并行苏木精-伊红染色观察面神经形态。结果与结论:(1)毛囊表皮神经嵴干细胞中Nestin和p75NTR双阳性表达,细胞纯度>90%;(2)与其他两组相比,毛囊表皮神经嵴干细胞组的肿瘤坏死因子α表达在术后7 d减弱(P<0.05),而白细胞介素4表达在术后3,7,14 d均增强(P<0.05);(3)与其他两组相比,毛囊表皮神经嵴干细胞组的面神经功能改善(P<0.05);(4)面神经移植段均可见新生血管和再生轴突,与其他两组相比,毛囊表皮神经嵴干细胞组移植段和移植远段的神经纤维排列更有序、包绕的髓鞘更厚;(5)结果表明:毛囊表皮神经嵴干细胞对面神经损伤后修复早期局部肿瘤坏死因子α和白细胞介素4表达具有调节作用,可抑制局部炎症反应,并促进面神经功能和形态恢复。 展开更多
关键词 面神经 神经再生 毛囊 表皮神经嵴干细胞 炎症因子 肿瘤坏死因子α 白细胞介素4
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颅神经嵴干细胞的体外培养及其多向分化潜能研究 被引量:7
5
作者 田卫东 江宏兵 +2 位作者 刘磊 汤炜 李晓东 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期229-231,共3页
目的 分离培养颅神经嵴干细胞 ,探讨其体外生物学特征 ,为进一步研究其牙、颌向分化提供细胞来源。方法 取小鼠胚胎颅段神经管 ,组织块法无血清条件培养获颅神经嵴干细胞 ,形态学、BurdU掺入及免疫细胞化学法鉴定其生物学性状。结果... 目的 分离培养颅神经嵴干细胞 ,探讨其体外生物学特征 ,为进一步研究其牙、颌向分化提供细胞来源。方法 取小鼠胚胎颅段神经管 ,组织块法无血清条件培养获颅神经嵴干细胞 ,形态学、BurdU掺入及免疫细胞化学法鉴定其生物学性状。结果 原代培养的颅神经嵴干细胞为梭形成纤维样细胞 ,表现为克隆样生长、自我更新能力和多向分化能力等干细胞性状 ,且特异性标记物HNK_1呈阳性表达。结论 本研究成功地获取保持有多潜能干细胞性状的颅神经嵴细胞 ,为深入研究其牙、颌向分化奠定基础。 展开更多
关键词 颅神经嵴 干细胞 生物学特征 分化
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小鼠胚胎肠神经嵴干细胞的分离培养及鉴定 被引量:8
6
作者 肖莉 刘勇 高亚 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期595-597,共3页
目的建立分离培养及鉴定小鼠肠神经嵴干细胞(gut neural crest stem cells,GNCSCs)的方法,为临床应用奠定基础。方法分离胚鼠肠管,消化后接种于添加N2、B27和碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12培养基,贴壁培养;连续传代后用血清促进GNC... 目的建立分离培养及鉴定小鼠肠神经嵴干细胞(gut neural crest stem cells,GNCSCs)的方法,为临床应用奠定基础。方法分离胚鼠肠管,消化后接种于添加N2、B27和碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12培养基,贴壁培养;连续传代后用血清促进GNCSCs分化;最后用免疫细胞化学方法染色鉴定。结果分离培养的细胞聚集生长,形成的克隆球可以传代;克隆球p75染色阳性;分化后的细胞分别表达肠神经元、神经胶质细胞和平滑肌细胞特异性抗原。结论分离培养的克隆球具有自我更新和多向分化的能力,表达肠神经嵴干细胞的特异性抗原p75,是肠神经嵴干细胞。 展开更多
关键词 肠神经嵴干细胞 胚胎小鼠 细胞培养 细胞分化 先天性巨结肠症
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颌突外胚间充质干细胞参与颅骨缺损修复的作用 被引量:2
7
作者 周泽渊 于淑湘 +4 位作者 金岩 史俊南 张建平 张铭 尤苏霞 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2007年第6期309-312,共4页
目的:探讨颌突外胚间充质干细胞参与颅骨缺损修复的作用。方法:将外胚间充质干细胞复合煅烧骨后移植入大鼠颅骨缺损处,以大鼠成纤维细胞、空白胶原作为对照,1、3、6个月后取材,经HE染色,Mallory改良三色法鉴定。结果:HE染色结果显示实... 目的:探讨颌突外胚间充质干细胞参与颅骨缺损修复的作用。方法:将外胚间充质干细胞复合煅烧骨后移植入大鼠颅骨缺损处,以大鼠成纤维细胞、空白胶原作为对照,1、3、6个月后取材,经HE染色,Mallory改良三色法鉴定。结果:HE染色结果显示实验组成骨的效果明显好于对照组;图像分析见实验组的骨基质面积明显多于对照组,统计学分析P<0.01,有明显差异。结论:提示移植的外胚间充质干细胞在局部颅骨组织内存活并具有一定的功能。 展开更多
关键词 外胚间充质干细胞 神经嵴干细胞 可塑性 微环境
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GFP标记成年大鼠表皮神经嵴干细胞的分离培养与形态学特征 被引量:2
8
作者 张洁元 陈立朝 +1 位作者 段朝霞 李兵仓 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第33期3471-3472,3475,F0003,F0002,共5页
目的建立绿色荧光蛋白(GFP)标记大鼠表皮神经嵴干细胞(EPI-NCSC)的分离培养方法,为EPI-NCSC在体移植研究脊髓损伤修复奠定基础。方法分离成年GFP大鼠胡须毛囊,取毛囊隆突部贴附于胶原包被的培养板上。在培养第4天有大量细胞游出,取出贴... 目的建立绿色荧光蛋白(GFP)标记大鼠表皮神经嵴干细胞(EPI-NCSC)的分离培养方法,为EPI-NCSC在体移植研究脊髓损伤修复奠定基础。方法分离成年GFP大鼠胡须毛囊,取毛囊隆突部贴附于胶原包被的培养板上。在培养第4天有大量细胞游出,取出贴附的毛囊隆突部,细胞传代培养。细胞采用SOX10和Nestin免疫细胞化学染色鉴定,并计算细胞纯度。结果 EPI-NCSC在胶原基质上从隆突部游出,细胞为圆形或梭形,呈强绿色荧光。免疫细胞化学染色SOX10和Nestin双阳性,纯度在99%以上。结论本实验方法简便易行,能分离出高纯度的GFP-EPI-NCSC,可作为一种有效的工具细胞用于损伤脊髓修复研究。 展开更多
关键词 GFP大鼠 表皮神经嵴干细胞 细胞培养技术 免疫细胞化学
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模拟人角膜内皮细胞微环境诱导人胚胎干细胞分化为角膜内皮细胞的研究进展 被引量:5
9
作者 孙琳 吴欣怡 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期844-847,共4页
角膜内皮供体不足成为开展角膜内皮移植等手术的主要问题,生物工程角膜为角膜内皮移植的开展提供了解决途径.人胚胎干细胞(ESCs)诱导分化出功能性角膜内皮细胞后可以在一定程度上缓解角膜供体不足,尤其是角膜内皮供应不足的现状.目前... 角膜内皮供体不足成为开展角膜内皮移植等手术的主要问题,生物工程角膜为角膜内皮移植的开展提供了解决途径.人胚胎干细胞(ESCs)诱导分化出功能性角膜内皮细胞后可以在一定程度上缓解角膜供体不足,尤其是角膜内皮供应不足的现状.目前理想可行的方法是体外模拟角膜内皮细胞的发育过程,将人ESCs诱导分化为神经嵴干细胞(NCSCs),再利用生长因子和细胞外基质构建细胞生长的微环境,制备适当的条件培养基以诱导NCSCs分化为角膜内皮细胞.目前NCSCs相关的诱导机制尚不十分清楚,有待进一步研究.本文就微环境对角膜内皮细胞发育过程的影响,以及诱导人ESCs分化为角膜内皮细胞等方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 神经嵴干细胞 角膜内皮细胞 分化
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颌突外胚间充质干细胞(EMSCs)的体外分离及鉴定 被引量:1
10
作者 张建平 段晓燕 +2 位作者 周泽渊 赵文明 金岩 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期26-31,共6页
外胚间充质(ectomesenchyme)是一种胚胎发育早期颅面部出现的多能性结构(multipotentstructure) ,大多数颅面部结构和组织均由其衍生而来,这提示外胚间充质中存在一种干细胞,即外胚间充质干细胞(ectomesenchymalstemcells,EMSCs)。为了... 外胚间充质(ectomesenchyme)是一种胚胎发育早期颅面部出现的多能性结构(multipotentstructure) ,大多数颅面部结构和组织均由其衍生而来,这提示外胚间充质中存在一种干细胞,即外胚间充质干细胞(ectomesenchymalstemcells,EMSCs)。为了分离和鉴定EMSCs,对E1 2 5的SD大鼠颌突组织细胞进行了流式细胞学分析,发现其中的外胚间充质细胞表达多种神经谱系和中胚层谱系的标志,包括p75、CD5 7和nestin等。根据此特点,采用磁细胞分离技术对p75 +的颌突外胚间充质细胞进行了分离和克隆培养。克隆分析表明,单个p75 +细胞经过1 0~1 4d培养,可以形成由两种或两种以上细胞组成的多潜能性克隆(multipotentclone) ,提示该群外胚间充质细胞具有多潜能性。同时,亚克隆分析表明,多潜能性子克隆中的单个p75 +细胞具有再次形成多潜能性克隆的能力,说明这些细胞在体外具有自我更新的能力。这些结果提示,p75 +细胞同时具有多潜能性和自我更新能力,因此是外胚间充质干细胞。该干细胞的分离对于口腔颅面部的起源和发育研究无疑具有重要意义。此外,该干细胞的高度可塑性也预示它可以作为一种新的种子细胞,为组织工程皮肤、肌肉、软骨的研究提供新思路。 展开更多
关键词 颌突 外胚间充质 干细胞 EMSCs 体外分离 鉴定 神经嵴细胞
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毛囊bulge区神经嵴细胞体外分离培养及生物学特点 被引量:2
11
作者 杨蓉 严飞 +1 位作者 袁华 江宏兵 《口腔医学》 CAS 2009年第5期239-241,共3页
目的探讨毛囊bulge区神经嵴细胞的体外生物学特点。方法采用体视显微解剖分离毛囊bulge区组织块,贴壁培养获取神经嵴细胞,通过形态学,结合Sox10,p75,nestin免疫细胞化学,观察神经嵴细胞的生物学特点。结果分离培养的小鼠毛囊神经嵴细胞... 目的探讨毛囊bulge区神经嵴细胞的体外生物学特点。方法采用体视显微解剖分离毛囊bulge区组织块,贴壁培养获取神经嵴细胞,通过形态学,结合Sox10,p75,nestin免疫细胞化学,观察神经嵴细胞的生物学特点。结果分离培养的小鼠毛囊神经嵴细胞,其形态类似成纤维细胞,免疫细胞化学检测细胞表型nestin,p75,Sox10均呈阳性表达。结论本研究成功从小鼠触须毛囊分离培养出神经嵴细胞,为进一步利用神经嵴细胞开展组织再生研究奠定了基础。 展开更多
关键词 毛囊 神经嵴细胞 体外培养 组织再生
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诱导颌突外胚间充质干细胞向骨骼肌细胞分化 被引量:1
12
作者 周泽渊 于淑湘 +2 位作者 史俊南 张建平 金岩 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期123-126,共4页
目的:探讨外胚间充质干细胞(Ectomesenchymal stem cells,EMSC)向骨骼肌细胞分化的能力。方法:利用二甲基亚砜(Dimethyl sulphoxide,DMSO)液诱导外胚间充质干细胞分化,通过免疫组化和逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polyme... 目的:探讨外胚间充质干细胞(Ectomesenchymal stem cells,EMSC)向骨骼肌细胞分化的能力。方法:利用二甲基亚砜(Dimethyl sulphoxide,DMSO)液诱导外胚间充质干细胞分化,通过免疫组化和逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)鉴定,以大鼠成纤维细胞作为对照。结果:RT-PCR结果说明诱导的外胚间充质干细胞表达骨骼肌细胞特异标志(Desmin)。而对照组细胞形态未出现变化,也无骨骼肌细胞标志表达。结论:外胚间充质干细胞经DMSO液诱导后可成为骨骼肌细胞。 展开更多
关键词 外胚间充质干细胞 神经嵴干细胞 可塑性 组织工程
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诱导颌突外胚间充质干细胞向成骨细胞分化 被引量:1
13
作者 周泽渊 于淑湘 +3 位作者 史俊南 张建平 金岩 尤苏霞 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2007年第3期125-128,共4页
目的:探讨外胚间充质干细胞向成骨细胞分化的能力;方法:利用矿化液诱导外胚间充质干细胞分化,通过免疫组化和RT-PCR鉴定,以大鼠成纤维细胞作为对照。结果:显示外胚间充质干细胞经矿化液诱导后,细胞形态发生变化,细胞形态为立方状,紧密排... 目的:探讨外胚间充质干细胞向成骨细胞分化的能力;方法:利用矿化液诱导外胚间充质干细胞分化,通过免疫组化和RT-PCR鉴定,以大鼠成纤维细胞作为对照。结果:显示外胚间充质干细胞经矿化液诱导后,细胞形态发生变化,细胞形态为立方状,紧密排列,类似成骨细胞,随着培养时间增长,可形成矿化结节;免疫组化显示诱导的外胚间充质干细胞表达I型胶原;RT-PCR结果说明诱导的外胚间充质干细胞表达成骨细胞特异标志-骨桥素mRNA。而对照组细胞形态未出现变化,也无成骨细胞标志表达。结论:外胚间充质干细胞经矿化液诱导后成为成骨细胞。 展开更多
关键词 外胚间充质干细胞 神经嵴干细胞 可塑性 微环境 组织工程
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成体小鼠肠神经嵴干细胞体外分离、培养及鉴定 被引量:1
14
作者 肖莉 高亚 刘勇 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第10期889-891,共3页
目的利用简化无血清培养基和连续传代法,从成体小鼠肠管分离培养肠神经嵴干细胞(GNCSCs),观察细胞体外培养过程中增殖、分化的特点.用p75,GFAP,Peripherin,α-Actin作为特异性标志来鉴定GNCSCs及其分化的细胞系.方法将新生1,5d的小鼠肠... 目的利用简化无血清培养基和连续传代法,从成体小鼠肠管分离培养肠神经嵴干细胞(GNCSCs),观察细胞体外培养过程中增殖、分化的特点.用p75,GFAP,Peripherin,α-Actin作为特异性标志来鉴定GNCSCs及其分化的细胞系.方法将新生1,5d的小鼠肠管制成单细胞悬液,接种于无血清DMEM/F12完全培养基中贴壁培养,连续传代培养并观察克隆球的形成过程.将克隆球接种于含血清的DMEM/F12完全培养基中,观察其分化现象.用免疫细胞化学和免疫荧光法检测克隆球及其分化细胞系特异性标志物的表达.结果成体小鼠肠管中有少数细胞在无血清培养基中存活且增殖形成克隆球.免疫染色表明克隆球是GNCSCs并且在血清诱导下可分化为神经元、神经胶质细胞、平滑肌细胞.结论成体肠管中存在具有自我更新和多向分化能力的GNCSCs,在体外GNCSCs可分化为肠神经系统所必须的细胞类型. 展开更多
关键词 肠神经嵴干细胞 小鼠 细胞培养技术 细胞分化 Hirschspmng病
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表皮神经嵴干细胞移植对大鼠损伤脊髓组织中脑源性神经营养因子表达的影响
15
作者 刘争 张洁元 +4 位作者 陈魁君 李兵仓 段朝霞 张路 余华荣 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期433-437,共5页
目的:观察表皮神经嵴干细胞(epidermal neural crest stem cells,EPI-NCSCs)移植治疗大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的作用以及SCI组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophical factor,BDNF)表达的变化,从神经营养因... 目的:观察表皮神经嵴干细胞(epidermal neural crest stem cells,EPI-NCSCs)移植治疗大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的作用以及SCI组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophical factor,BDNF)表达的变化,从神经营养因子的角度探讨EPI-NCSCs移植修复SCI的机制。方法:分离培养绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因大鼠的EPINCSCs,备移植用。60只SD大鼠均暴露T10脊髓并在NYU-Ⅱ撞击机(10 g 25 mm致伤力)挫伤脊髓制作SCI模型,随机分为空白损伤组(A组)、培养基移植组(B组)、EPI-NCSCs移植组(C组)。SCI模型大鼠损伤1周后将EPI-NCSCs细胞悬液移植入C组大鼠SCI处,B组用单纯DMEM/F12培养基代替,空白损伤组不做处理。伤后每周进行一次运动功能评分,移植后1、3、6周取材行酶联免疫分析、免疫组织化学染色、免疫荧光染色以及Western blot检测BDNF蛋白的表达。结果:移植术后第2周起C组运动功能评分高于同期A组(2、3、4、5、6周,P值分别为0.003、0.000、0.000、0.000、0.000)和B组(2、3、4、5、6周,P值分别为0.044、0.000、0.006、0.000、0.008)。酶联免疫分析显示C组BDNF蛋白在移植后3周表达高于A组(P=0.009)和B组(P=0.013),移植后6周表达量显著高于A组(P=0.003)和B组(P=0.003)。免疫组化和免疫荧光结果显示移植后3周和6周,C组BDNF表达高于同期A组和B组。Western blot结果显示移植后6周,C组BDNF表达高于同期A组(P=0.000)和B组(P=0.000)。结论:EPI-NCSCs移植能促进SCI内BDNF的表达,改善局部微环境,从而有助于大鼠损伤脊髓的修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 表皮神经嵴干细胞 细胞移植 脑源性神经营养因子
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培养Schwann细胞用于构建毛囊神经嵴干细胞定向分化饲养层
16
作者 周红利 张艳 +1 位作者 任应博 林森 《成都医学院学报》 CAS 2011年第4期309-315,共7页
目的培养原代Schwann细胞,用于构建毛囊神经嵴干细胞饲养层构建。探索Schwann细胞(Schwann cells)对胎牛血清浓度的依耐性;检测Schwann细胞在不同血清浓度下的活性及分泌状态,并应用此饲养层定向诱导毛囊神经嵴干细胞分化。方法原代培... 目的培养原代Schwann细胞,用于构建毛囊神经嵴干细胞饲养层构建。探索Schwann细胞(Schwann cells)对胎牛血清浓度的依耐性;检测Schwann细胞在不同血清浓度下的活性及分泌状态,并应用此饲养层定向诱导毛囊神经嵴干细胞分化。方法原代培养及纯化Schwann细胞;用不同血清浓度的胎牛血清(FBS)培养基培养Schwann细胞,测定并用四氮唑盐(MTT)比色法检测Schwann细胞生长及增殖情况;使用S100特异性标识抗体间接免疫荧光法与荧光染料Hoechst 33342对Schwann细胞进行鉴定。用ELISA方法检测Schwann细胞的分泌因子。利用丝裂霉素C处理Schwann细胞建立饲养层,培养Schwann细胞和毛囊神经嵴干细胞。结果体外成功培养Schwann细胞,用S100间接免疫荧光法与核染料Hoechst33342鉴定Schwann细胞呈阳性表达,纯度约95%,成功培养毛囊神经嵴干细胞。无血清的培养基可使Schwann细胞生长状态良好。饲养层细胞能够稳定分泌神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF),可诱导毛囊神经嵴干细胞定向分化。结论无血清的培养基更利于毛囊神经嵴干细胞饲养层的构建。饲养层Schwann细胞可持续分泌NGF和BDNF等神经营养因子,可成为使毛囊神经嵴干细胞定向分化的稳定饲养层细胞。 展开更多
关键词 SCHWANN细胞 饲养层 毛囊神经嵴干细胞 定向分化
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脑神经嵴干细胞体外培养方法的研究进展
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作者 杨蓉 江宏兵 《国际口腔医学杂志》 CAS 2009年第1期88-90,共3页
脊椎动物的脑神经嵴干细胞(CNCSC)具有多向分化潜能,参与形成颅颌面部多种组织器官。下文就近年来CNCSC体外分离培养技术作一综述,为研究CNCSC与口腔颌面部组织器官发育、再生修复以及相关疾病发生机制提供方法学参考。
关键词 脑神经嵴 干细胞 体外培养
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毛囊神经嵴干细胞的培养、鉴定及其向雪旺细胞诱导分化的实验研究
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作者 杨洁 吴琪 +3 位作者 张鸿雁 卢静 霍兴华 李振华 《齐齐哈尔医学院学报》 2011年第8期1198-1200,共3页
目的培养并鉴定Wistar小鼠毛囊神经嵴干细胞,并使其诱导分化成为雪旺细胞(Schwann cell,SCs)。方法采用Wistar小鼠毛囊隆突贴块培养法培养小鼠毛囊神经嵴干细胞,并对培养的细胞进行并行免疫荧光细胞化学双重染色鉴定,诱导染色阳性的细... 目的培养并鉴定Wistar小鼠毛囊神经嵴干细胞,并使其诱导分化成为雪旺细胞(Schwann cell,SCs)。方法采用Wistar小鼠毛囊隆突贴块培养法培养小鼠毛囊神经嵴干细胞,并对培养的细胞进行并行免疫荧光细胞化学双重染色鉴定,诱导染色阳性的细胞初步分化后进行S-100染色,鉴定其分化产物为雪旺细胞。结果采用Wistar小鼠毛囊隆突贴块培养法培养的毛囊神经嵴干细胞,免疫细胞化学染色呈现nestin及P75双阳性;对培养贴壁出的细胞胰酶消化后传代培养,诱导分化后进行S-100免疫细胞化学染色显示S-100阳性细胞突起的末端呈扁平状膨大。结论 利用Wistar小鼠毛囊可以体外培养出毛囊神经嵴干细胞,对其进行初步的诱导分化可以得到S-100阳性的细胞。 展开更多
关键词 毛囊神经嵴干细胞 体外培养 分化 雪旺细胞
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躯干神经嵴干细胞壳聚糖纤维复合硅胶管治疗坐骨神经损伤的实验研究
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作者 杨洁 《菏泽医学专科学校学报》 2012年第1期1-4,16,共5页
目的探讨体外培养的躯干神经嵴干细胞在壳聚糖纤维上立体培养后复合硅胶管治疗坐骨神经损伤的实验研究。方法采用孕10.5d Wistar大鼠的胚胎神经管分离培养躯干神经嵴干细胞,将体外培养48 h的躯干神经嵴干细胞接种在壳聚糖纤维材料上,观... 目的探讨体外培养的躯干神经嵴干细胞在壳聚糖纤维上立体培养后复合硅胶管治疗坐骨神经损伤的实验研究。方法采用孕10.5d Wistar大鼠的胚胎神经管分离培养躯干神经嵴干细胞,将体外培养48 h的躯干神经嵴干细胞接种在壳聚糖纤维材料上,观察两者的组织相容性。应用黏附有躯干神经嵴干细胞壳聚糖纤维复合硅胶管桥接了缺损的大鼠坐骨神经,术后进行电生理、组织学检测,观察了周围神经再生及神经通路重建的状况。结果从神经管取材的躯干神经嵴干细胞在无血清培养基内可以大量扩增;将躯干神经嵴干细胞接种在壳聚糖纤维支架材料上行扫描电镜观察,可见躯干神经嵴干细胞贴附在壳聚糖纤维表面,存活良好,表明躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维支架材料有良好的相容性;桥接手术后,电生理检测结果显示,含躯干神经嵴干细胞的壳聚糖-硅胶管桥接组坐骨神经传导潜速率及波幅值显著好于单纯硅胶管桥接组(均P<0.01);甲苯胺蓝染色光镜观察及图像分析结果均显示含躯干神经嵴干细胞的壳聚糖-硅胶管桥接组再生轴突的髓鞘化更明显,再生纤维密度及直径等各检测指标均优于单纯硅胶管桥接组(均P<0.01)。结论壳聚糖纤维支架材料与躯干神经嵴干细胞构建的桥接管具有良好的生物相容性,其中躯干神经嵴干细胞可分化为施万细胞,以此桥接缺损的周围神经,可促进其再生和修复。 展开更多
关键词 躯干神经嵴干细胞 组织工程 壳聚糖纤维 神经再生
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人诱导多能干细胞向外周神经元分化的实验研究 被引量:1
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作者 林婉颐 黄利华 +3 位作者 周立文 石翾 赖兴强 李伟强 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期431-437,共7页
【目的】探讨人诱导多能干细胞(hiPS细胞)在体外向外周神经元分化的能力。【方法】人诱导多能干细胞在无饲养层培养条件下维持培养,然后在神经培养基中悬浮培养分化为神经球,通过把神经球贴壁在多聚赖氨酸和层粘连蛋白包被的培养板上,... 【目的】探讨人诱导多能干细胞(hiPS细胞)在体外向外周神经元分化的能力。【方法】人诱导多能干细胞在无饲养层培养条件下维持培养,然后在神经培养基中悬浮培养分化为神经球,通过把神经球贴壁在多聚赖氨酸和层粘连蛋白包被的培养板上,利用流式分选细胞方法获得神经嵴干细胞(NCSC),通过把神经嵴干细胞在外周神经诱导培养基中诱导分化,获得外周神经元,利用免疫荧光染色的方法检测神经嵴干细胞和外周神经元的标记物。【结果】贴壁的神经球出现特征性的神经花环(Neural rosettes)结构,神经嵴干细胞从神经花环发生迁移;神经嵴干细胞向外周神经元诱导后出现神经丝结构,并表达外周神经元特异性标记物。【结论】人诱导多能干细胞在体外能高效向外周神经元分化。 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 外周神经元 神经嵴干细胞
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