Neurexin1β诱导ErbB4-Akt信号通路活化研究

PV(Parvalbumin)中间神经元可调控兴奋性神经元的正常功能,并维持神经网络的平衡。ErbB4主要分布在PV中间神经元的突触部位,促进PV中间神经元的迁移、分化、轴突生长、突触形成等。目前,ErbB4信号通路在中枢神经系统中的作用受到广泛关注,但其作用机制尚未完全阐明。前期研究已证实,大鼠的前额皮层中NRXN1β与ErbB4存在相互作用,促进二者的相互作用可诱导PV中间神经元上兴奋性突触的形成,使PV阳性中间神经元活性增强。基于此,通过表达ErbB4和NRXN1β不同结构域的质粒,探讨NRXN1β与ErbB4结合的结构基础。研究发现,NRXN1β的胞外段能与ErbB4结合,而NRXN1β的胞内段并不能与ErbB4结合。进一步使用NRXN1β51-363(NRXN1β的胞外肽段)孵育原代皮层神经元,免疫印迹和免疫荧光结果发现,NRXN1β51-363使神经元中ErbB4及Akt的磷酸化水平升高。以上结果表明,NRXN1β与ErbB4的相互作用发生在细胞外侧。神经元中NRXN1β-ErbB4信号通路的激活可以使下游Akt信号活化,这一作用可能是ErbB4使PV中间神经元活性增强的机制之一。

NRXN1基因和MECP2基因SNP检测及其与儿童自闭症临床表现的关联研究

目的探讨神经轴突蛋白1(NRXN1)基因和甲基CpG结合蛋白-2(MECP2)基因单核苷酸多态性(SNP)与儿童自闭症临床表现及易感性的关系。方法选取2019年9月至2021年6月于该院就诊或进行康复治疗的128例自闭症患儿为自闭症组,同期选取该院145例体检健康儿童作为对照组。采用Sequenom MassArray platform分型技术检测NRXN1(rs1421589位点)和MECP2(rs2239464位点)基因型,采用孤独症儿童行为检查量表(ABC)评分对患儿临床行为进行测评,采用儿童孤独症评定量表(CARS)评分测评患儿病情严重程度;采用Logistic回归分析NRXN1和MECP2基因型对自闭症发生的影响。结果对照组和自闭症组NRXN1基因检出CC型、CT型、TT型3种基因型,MECP2基因检出AA型、AG型、GG型3种基因型。对照组中CC型基因型(49.66%)、AA型基因型(50.34%)比例较高;自闭症组中TT型基因型(57.81%)、GG型基因型(49.21%)比例较高。经吻合度检验,对照组和自闭症组NRXN1基因、MECP2基因SNP分布均符合Hardy-Weinberg平衡法则(NRXN1:χ^(2)=1.386、5.069;MECP2:χ^(2)=4.297、5.508,P>0.05)。NRXN1和MECP2不同基因型自闭症患儿感觉、交往等各因子得分、ABC总分及疾病严重程度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TT型基因型(rs1421589位点)、GG型基因型(rs2239464位点)是影响自闭症发生的独立危险因素(P<0.05)。结论NRXN1基因和MECP2基因SNP与儿童自闭症有关,携带基因型TT、GG的患儿有更严重的自闭症临床行为。

视黄酸受体α通过调控视皮质轴突蛋白1参与维生素A缺乏大鼠孤独症样行为的机制研究

目的探讨视黄酸受体α(retinoic acid receptorα,RARα)信号变化通过调控视皮质轴突蛋白1(neurexin 1,NRXN1)参与维生素A缺乏(vitamin A deficiency,VAD)大鼠孤独症样行为的机制。方法构建孕期开始的维生素A正常(vitamin A normal,VAN)和VAD母鼠模型,并在生后早期对部分VAD母鼠和仔鼠给予维生素A补充(vitamin A supplement,VAS)。各组仔鼠(n=20)于6周龄进行行为学检测,利用三箱和旷场实验检测各组仔鼠社交行为和重复刻板行为;采用高效液相色谱法检测各组仔鼠血清视黄醇水平;采用电生理实验检测各组仔鼠视皮质的长时程增强(long-term potentiation,LTP)水平;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测RARα、NRXN1和N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 1,NMDAR1)的表达水平;采用染色质免疫共沉淀技术检测RARα转录因子在NRXN1基因启动子区的富集量。结果VAD组仔鼠出现社会交往障碍、重复刻板等孤独症样行为表现,生后开始的VAS可改善仔鼠大部分行为缺陷。VAD组仔鼠血清视黄醇水平明显低于VAN组和VAS组(P<0.05)。VAD组仔鼠视皮质NMDAR1、RARα和NRXN1的mRNA和蛋白表达水平及LTP水平均较VAN组和VAS组显著降低(P<0.05)。VAD组仔鼠视皮质中RARα转录因子在NRXN1基因启动子区的富集量较VAN组和VAS组显著下降(P<0.05)。结论RARα通过调控NRXN1影响VAD大鼠视皮质突触可塑性,从而参与VAD大鼠孤独症样行为的形成。[中国当代儿科杂志,2022,24(8):928-935]