黄芩苷对Neuro2A细胞氧糖剥夺的保护作用

目的观察黄芩苷对体外培养小鼠神经母细胞瘤Neuro2A细胞株氧糖剥夺所致损伤的保护作用。方法利用体外培养的Neuro2A细胞,通过去除培养液中的糖和氧气来模拟脑缺血缺氧,用不同浓度的黄芩苷作用于Neuro2A细胞,应用Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,应用四唑盐(MTT)法检测细胞的活性。结果黄芩苷在6.25,12.5,25μmol.L-1的浓度范围之内,可对缺血缺氧Neuro2A细胞起到保护作用,主要是减少细胞早期凋亡。结论在一定浓度范围之内黄芩苷可保护缺血缺氧Neuro2A细胞,提示对缺血性脑损伤有保护作用,值得进一步研究。

miR-16促进Neuro2a细胞的凋亡

目的检测过表达miR-16对小鼠Neuro2a细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-16在肿瘤发病过程中的可能机制。方法 构建能够在细胞中过表达miR-16的真核表达载体pcDNA3.1-miR-16,利用Real-time PCR验证了表达载体的过表达效应。应用pcDNA3.1-miR-16载体转染Neuro2a细胞,利用流式细胞术和TUNEL法检测Neuro2a细胞周期及凋亡改变情况。结果 转染过表达pcDNA3.1-miR-16载体后,成熟的miR-16表达与对照组相比明显升高(P<0.05)。在Neuro2a细胞中过表达miR-16后,用流式细胞术检测发现,Neuro2a细胞周期未见明显改变,与对照组相比,凋亡细胞数量有显著增加;进一步通过TUNEL法验证,发现miR-16的过表达能够促进Neuro2a的细胞凋亡。结论 过表达miR-16能够显著促进Neuro2a细胞凋亡而对细胞周期并无影响,提示miR-16可能对肿瘤治疗起作用。

酒精对小鼠脑神经瘤细胞Neuro2a增殖的影响

目的探讨酒精通过控制中心体增长影响小鼠脑神经瘤细胞Neuro2a增殖的机制。方法免疫荧光细胞计数检测酒精对细胞周期进程的改变;免疫荧光法检测酒精对纺锤体表型以及对外源性和内源性中心体蛋白P4.1相关蛋白(CPAP)中心体定位浓度的影响。结果 100 mmol/L酒精处理Neuro2a细胞96 h后,阻碍了细胞周期的进程,减少了进入有丝分裂期的细胞量;有丝分裂期纺锤体的表型出现多种异常;酒精通过降低中心体上内源性和外源性CPAP的定位浓度,抑制了中心体的增长。结论酒精抑制CPAP在中心体增长中的功能,导致有丝分裂期纺锤体排列异常,从而阻止细胞进入有丝分裂期,引起Neuro2a细胞数量减少。

吡咯喹啉醌对神经细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及其机制

目的研究吡咯喹啉醌(PQQ)的神经保护作用及其可能机制。方法利用不同浓度PQQ预处理Neuro2A细胞后建立氧糖剥夺模型。复氧后6h,观察Neuro2A细胞的细胞形态、存活率、凋亡率以及活性氧(ROS)和还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度。结果 Neuro2A细胞形态出现严重损伤;经0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.8、25.6μmol/L的PQQ预处理,细胞损伤减轻;细胞存活率随PQQ浓度升高呈逐渐增高趋势;经6.4μmol/L和12.8μmol/L的PQQ预处理,细胞凋亡减少,细胞内ROS生成减少,GSH水平增高(P<0.05)。结论 PQQ对氧糖剥夺神经细胞损伤有一定的保护作用,这一作用可能是通过减轻氧化应激反应,降低细胞凋亡率实现的。