AN IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY OF NEUROENDOCRINE CELLS IN COLONIC CARCINOMA

Seventy-four cases of colonic cancer were studied by immunohistochemistry using anti-Chromogranin A,gastrin, somatostatin, serotonin, glucogon and human chorionic gonadotropin (HCG) to observe the neuroendocrine cell in colonic cancer. It was found that 27of 74 colonic carcinoma showed variable extent of CgA staining (36.5%). Glucagon and HCG was differently the most frequent in hormone antigens in colonic cancer and in metastatic lymph nodes. The endocrine positive colonic carcinomas are more frequent in poorly-differentiated than in well-differentiated (P<0.05). It suggests that there were different NE cells Producing different hormones in colonic cancer. Different hormones may act on different types of colonic cancer.

3D腹腔镜结肠癌根治手术疗效分析及预后评价

目的探讨3D腹腔镜结肠癌根治手术疗效及安全性,分析Bmi-1和CDX-2表达与结肠癌临床病理特征及预后的关系。方法对比分析腹腔镜手术与开腹手术2组切口总长度、手术时间、术中失血量、清扫淋巴结数目、术后12 h疼痛评分、肠功能恢复时间及术后平均住院日7项指标;采用免疫组化EliVision TM plus两步法检测结肠癌组织Bmi-1和CDX-2的表达,分析其与患者年龄、瘤体大小、分化等级、淋巴结转移及5年内复发转移5项临床病理特征的相关性。结果腹腔镜组与开腹组比较,手术时间、清除淋巴结数目无显著差异,但切口总长度小,手术失血量少,术后12 h疼痛评分低,肠功能恢复快,术后平均住院日短。结肠癌组织Bmi-1和CDX-2阳性率分别为79.1%和64.2%。Bmi-1表达与年龄、瘤体大小、分化等级无关,在有淋巴结转移、5年内复发转移患者中其阳性率显著高于无淋巴结转移、5年内无复发转移者;CDX-2表达与年龄、瘤体大小无关,在低分化等级、有淋巴结转移、5年内复发转移患者中其阳性率显著低于(高+中)分化、无淋巴结转移、5年内无复发转移者。Bmi-1和CDX-2表达呈负相关性。结论3D腹腔镜结肠癌手术具有满意的根治效果和安全性,癌组织Bmi-1高表达、CDX-2低表达预示术后易发生复发转移,患者预后不良。

非小细胞肺癌神经内分泌分化的免疫组化诊断

目的： 探讨非小细胞肺癌神经内分泌分化的免疫组化诊断。方法： 选择三种神经内分泌共同标记ＣＧＡ、ＳＹＮ、ＮＣＮＭ， 应用免疫组化ＬＳＡＢ 法， 观察它们在ＮＳＣＬＣ 中的表达。结果： 在１６３ 例ＮＳＣＬＣ 中， １８ 例（１１－０４ ％ ） 表达ＣＧＡ，６３ 例（３８－６５ ％ ） 表达ＳＹＮ，４０ 例（２４－５４ ％ ） 表达ＮＣＡＭ 。７７ 例（４７－２４ ％ ） ＮＳＣＬＣ 至少有１ 种ＮＥ 标记表达，其中４０ 例只表达１ 种标记，３０ 例表达２ 种标记，仅７ 例３ 种标记均表达。３ 种标记表达彼此相关（ Ｐ＜０－００５） ，但存在差异（ Ｐ＜ ０－００５） 。与腺癌相比，腺鳞癌、鳞癌、大细胞癌染色阳性率较低。结论：选择３ 种ＮＥ 标记可以检测出ＮＳＣＬＣ 的ＮＥ 分化， 但不能以某一种标记的表达与否作为ＮＳＣＬＣ 的ＮＥ 分化诊断， 应联合检测以至少２ 种标记表达定义为ＮＥ 分化，在不同类型的ＮＳＣＬＣ 中腺癌更易出现ＮＥ 分化。

肺鳞状细胞癌伴神经内分泌分化与生物学特性及预后关系探讨

目的:初步探讨肺鳞状细胞癌的神经内分泌分化(neuroendoerine-like differentiation,ND)情况与生物学行为和预后的关系。方法:收集手术后经病理证实为肺原发鳞癌患者120例瘤组织石蜡标本,术前均未接受放化疗。采用免疫组化二步法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE),突触素(SYN)和嗜铬素A(CGA)的表达,采用x2检验分析ND与肺鳞癌生物学行为之间的关系,分别采用kaplan-meier生存曲线和COX风险比例模型进行单因素和多因素生存分析。结果:120例肺鳞癌中,CGA阳性率46.7%,NSE阳性率60.8%,SYN阳性率36.7%。鳞癌伴ND阳性率为40.8%。相关性分析结果示3种标志物之间无明显相关性。肺鳞状细胞癌伴ND与肿瘤细胞分化程度及瘤体分期(T分期)有关,肿瘤细胞分化越差,瘤体分期越高,ND阳性率越高。SYN的阳性表达与患者的年龄、性别及肿瘤细胞的分化程度有关,年龄越高,女性,肿瘤细胞分化越差,SYN阳性表达率越高。单因素生存分析结果经Log-Rank检验示SYN(x^2=3.961,P=0.047)及术后化疗(x^2=4.447,P=0.035)与患者的术后生存率有关,而ND与患者术后生存率无明显相关性(x^2=0.524,P=0.469)。Cox多因素生存分析结果示患者的年龄(OR=0.459,P=0.029),SYN阳性表达(OR=2.114,P=0.036),CGA阳性表达(OR=0.558,P=0.066)和术后化疗(OR=1.866,P=0.091)与患者预后相关,可作为可切除肺鳞癌患者的独立预后因素。结论:肺鳞癌伴神经内分泌分化与肿瘤细胞分化程度及瘤体分期有关,SYN和术后化疗是评价可手术患者预后的两个重要指标。

采用组织芯片技术检测大肠癌组织中p16和cyclinD1的表达

目的 :研究大肠癌组织中多肿瘤抑制蛋白 (P16 )和细胞周期蛋白 (cyclinD1)的表达及其意义。 方法 :采用组织芯片技术制作 80例大肠癌组织芯片 ,同时用S P免疫组织化学方法检测大肠癌组织芯片中P16和cyclinD1的表达。 结果 :80例大肠癌中P16和cyclinD1的阳性率分别为 4 0 0 %、5 7 5 %。P16低表达、cyclinD1高表达与大肠癌的浸润程度密切相关 ,大肠癌中P16低表达与cyclinD1的高表达密切相关。 结论 :P16和cyclinD1的表达水平可以作为评估大肠癌预后的参考指标 ,P16低表达影响cyclinD1的高表达。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的 ,具有快速、方便、经济、准确的特点。

10例胃小细胞型神经内分泌癌的临床病理分析

目的观察胃小细胞型神经内分泌癌(SCNEC-G)的临床病理特点,探讨其诊断及鉴别诊断要点,提高其病理诊断准确性,为其综合治疗提供依据。方法对2010年至2015年10例SCNEC-G根治手术标本的组织切片行光镜观察,经免疫组织化学标记,分析突触素(Syn)、嗜铬蛋白A(CgA)、神经细胞黏附分子(CD56)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)蛋白和Ki-67的表达情况。结果 SCNEC-G呈浸润性生长,癌细胞呈弥漫、大小不等巢团状、条梭状排列,部分病例局灶可呈假腺样结构,肿瘤表面及肿瘤内部均可见核碎屑和凝固性坏死,癌细胞小,呈圆形、卵圆形、短梭形,核深染,核仁不明显,可见较多核分裂。10例癌组织浸润深度为胃壁深肌层至全层,部分病例浸润至胃壁周围脂肪组织,所有样本均有神经侵犯和脉管内癌栓。10例SCNEC-G患者中,Syn、CgA、CD56、TTF-1、Ki-67阳性至强阳性表达率分别为80.0%、70.0%、80.0%、40.0%和100.0%。结论 SCNEC-G对神经源性抗原敏感性较高,同时部分病例TTF-1阳性表达,在原发灶不明的TTF-1阳性转移性小细胞癌中,仍需考虑SCNEC-G的可能。

四株人结肠腺癌细胞CEA表达水平的检测及其意义

目的:检测四株结肠癌细胞株中癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的表达,并探讨其意义．方法:四株人结肠腺癌细胞(LS174T,LoVo, SW480及HCT-8)分别应用ELISA法测定细胞培养上清中CEA含量;免疫组化检测细胞CEA蛋白表达;半定量RT-PCR检测细胞CEA mRNA表达丰度．结果:LS174T和SW480细胞在蛋白和mRNA水平均可检测到CEA的表达且前者表达量高于后者(细胞培养上清中CEA含量:1050±25．0 ng／107 cells vs 66±5．6 ng／107 cells,P<0．0001;半定量检测CEA mRNA表达丰度:1．137±0．155 vs 0．399±0．135,P=0．003);而LoVo细胞在蛋白和和mRNA水平均未检测到CEA的表达:HCT-8细胞免疫组化有弱阳性染色．结论:四株结肠癌细胞株的实际CEA表达情况与既往文献报道不尽相同．这种细胞株CEA表达特性的改变有可能影响其体外生物学行为从而导致实验结果的不确定性．

硒对氧化偶氮甲烷所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部促肾上腺皮质激素阳性细胞的影响

目的观察硒对致癌剂氧化偶氮甲烷(AOM)所致大鼠结肠癌形成过程中,垂体远侧部ACTH阳性细胞的影响。方法随机将20只3周龄SPF级断乳雄性SD大鼠分为正常对照组、实验对照组、致癌剂前补硒组、致癌剂后补硒组。用AOM(15mg/kg)每周腹腔注射,连续2周,诱导大鼠结肠癌形成。亚硒酸钠(Na2SeO3)水溶液(4mg/L)分别在AOM前、后干预,并持续至实验结束。各组均于34周后取大鼠垂体,用免疫组织化学SP法,观察垂体远侧部ACTH阳性细胞的形态结构及免疫组织化学反应强度,并进行图像分析。结果亚甲基蓝染色光镜下观察,可见AOM腹腔注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝(AC)和异常隐窝灶(ACF)。免疫组织化学法显示,实验对照组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞与正常对照组比较,阳性反应显著性增强(P<0.01);硒干预的各组与实验对照组相比,ACTH阳性细胞的阳性反应进一步增强(P<0.01)。结论硒可增强AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细胞的功能。

Doublecortin样激酶1在结肠肿瘤中的表达及意义

目的研究Doublecortin样激酶1（DCLK1）在结肠肿瘤组织中的表达及与结肠癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学方法检测20例结肠癌旁正常黏膜组织、20例结肠腺瘤、60例结肠癌及20例结肠癌转移灶组织中DCLK1的表达，分析结肠癌组织中DCLK1的表达与临床病理因素的关系。结果DCLK1在结肠癌旁正常黏膜组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织及结肠癌转移灶组织中的阳性表达率分别为20．0％、70．0％、65．0％和60．0％。结肠癌组织中DCLK1蛋白表达与临床分期和淋巴结转移密切相关，而与患者的性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤的组织学分级无相关性。结论DCLK1的过表达可能在结肠肿瘤的发展及转移中起重要的作用。

大肠癌中的内分泌型癌细胞及其临床生物学意义

应用嗜银染色及免疫组织化学方法对４２例大肠癌中的内分泌型癌细胞进行了检测和激素产物分析，并对内分泌型癌细胞的临床生物学意义进行了探讨。结果显示：１）在大肠癌中内分泌型癌细胞的阳性率为２８．５７％（１２／４２），激素产物分析中以血清素是多见；２）内分泌型癌细胞的出现与分化程度，肿瘤分期和淋巴结转移无关。结果提示：大肠癌中存在内分泌型癌细胞的分化，但不影响肿瘤的临床生物学行为。

USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的:研究USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学法检测USP22和Nanog在80例结肠癌组织,35例结肠腺瘤组织及40例癌旁正常结肠组织中的表达.结果:USP22在结肠癌中的阳性表达率明显高于结肠腺瘤和正常结直肠黏膜组织(P<0.05),但结肠腺瘤和癌旁正常组织的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),Nanog在癌旁正常组织,结肠腺瘤和结肠腺癌中的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05).USP22和Nanog的表达与Dukes分期,组织学分级,淋巴结转移以及浸润深度均有关(P<0.05);USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.509,P<0.01).结论:USP22和Nanog的表达与结肠癌的发生发展有关,二者在结肠癌的细胞增殖、浸润和转移中有协同作用.他们有望成为结肠癌的早期诊断指标和治疗靶点.

结肠癌组织Wnt/PCP信号通路相关因子表达及其意义

目的探讨Wnt/PCP信号途径中Wnt7a、JNK和Rho A在结肠肿瘤组织中的表达和意义。方法选取徐州医学院第二附属医院2012年3月至2015年3月经病理学确诊并行根治性手术的结肠癌石蜡标本共62例,同时分别选取癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5cm)和良性结肠腺瘤62例作为对照组。采用免疫组化方法检测Wnt/PCP信号途径中Wnt7a、JNK和Rho A在结肠癌组织、结肠腺瘤和正常结肠组织中的表达情况,分析其与结肠癌临床病理参数的关系。结果 Wnt7a、JNK和Rho A在结肠癌组织中均高表达,明显高于癌旁正常组织和腺瘤组(P<0.05),三者在结肠癌临床分期Ⅲ+Ⅳ期中的表达明显高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05),有淋巴结转移组的表达明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论Wnt/PCP信号途径中Wnt7a、JNK和Rho A蛋白在结肠癌组织中高表达,可能与结肠癌的发生发展有关系,并有可能成为肿瘤靶向治疗的潜在靶点。

肺大细胞神经内分泌癌的临床特点

目的分析肺大细胞神经内分泌癌(LCNEC)患者的临床资料,探讨影响其预后的相关因素。方法回顾性分析2012年6月至2015年6月于郑州大学第一附属医院经病理确诊为LCNEC的37例患者的临床特征、诊治情况及预后影响因素。结果LCNEC好发于有大量吸烟史的老年男性患者,临床主要表现为咳嗽、痰中带血、胸闷、胸痛,计算机断层扫描(CT)显示病灶以周围型肿块为主,可见分叶、毛刺,增强后可伴不均匀强化或坏死。免疫组化神经内分泌标记物:Syn、CgA、CD56的阳性表达率分别为75.7%、54.1%、67.6%。单因素分析显示,TNM分期、淋巴结转移、治疗方法是预后的影响因素(均P<0.05)。多因素分析显示,TNM分期早、淋巴结无转移和手术是预后的独立影响因素(均P<0.05)。结论LCNEC无特异性的临床及影像学表现,其诊断依赖组织病理,TNM分期早、淋巴结无转移和手术是预后的独立影响因素。

Lgr5在结肠癌组织中的表达及促进转移的临床研究

目的：检测G蛋白耦联受体5（Lgr5）在结肠癌组织中表达,探讨其与临床病理特征的关系,及促进肿瘤侵袭转移的作用。方法：收集2013年4月~2015年10月在山东省宁津县人民医院普外科行手术切除的结肠癌患者标本102例,结肠腺瘤标本35例,同时收集相应标本的正常结肠组织137例,采用免疫组织方法检测Lgr5表达。结果：腺癌组织Lgr5阳性率为62.75%,显著高于腺瘤组织的阳性率（28.57%）,显著高于正常组织的阳性率（16.06%）。结肠癌组织的Lgr5阳性表达与患者的腺癌分化程度、Dukes分期、淋巴结转移以及远处转移有关（P〈0.01）,同时经logistic回归发现,腺癌组织的分化程度、淋巴结转移和远处转移是Lgr5阳性表达的独立预测因子。结论：Lgr5基因表达增加可能参与结肠癌的形成、分化、浸润及转移,有望成为针对结直肠癌干细胞的新治疗靶点。

L1细胞黏附分子在结肠癌中表达的临床意义和生物学作用

目的探讨L1细胞黏附分子(L1 cell adhesion molecules,L1CAM)在结肠癌(colon cancer,CC)中表达的临床意义及生物学作用。方法采用免疫组化法检测166例CC癌和癌旁组织中L1CAM蛋白表达情况,分析L1CAM表达与CC患者临床病理特征的关系和独立预后风险因素,绘制L1CAM高低表达组患者的总体生存曲线;选取CC细胞系HCT116和LS174T,以及正常结肠上皮细胞系FHC和NCM460。利用小分子RNA沉默L1CAM表达,探讨L1CAM在CC细胞中的生物学作用。结果CC组织中LICAM阳性率为75.30%,显著高于癌旁组织的阳性率24.70%(P<0.05);L1CAM表达与CC患者肿瘤直径、分化程度、淋巴转移和临床分期情况显著相关(P<0.05);其中,相比于淋巴结未转移的患者,淋巴结转移组的患者的组织中L1CAM蛋白的阳性率更高(P<0.05)。在CC细胞系HCT116和LS174T中L1CAM高表达(P<0.05);在敲除HCT116和LS174T细胞L1CAM蛋白后,细胞的迁移能力显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),细胞增殖率显著下降(P<0.05)。结论L1CAM蛋白在人CC组织中高表达,提示患者预后不良,L1CAM蛋白可作为临床CC诊断和预后的一个分子指标。

肿瘤干细胞标志物CD133在大肠癌组织中的表达及意义

目的:研究探讨大肠癌组织中肿瘤干细胞表面标记物CD133的表达及临床意义。方法:采用术后大肠癌组织标本60例,应用免疫组织化学法分别检测癌组织和癌旁组织中的CD133的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。结果:CD133在大肠癌组织中的表达较癌旁组织增强(P=0.000)。CD133在癌组织中的表达在肿瘤的组织学分化程度、肿瘤浸润深度及是否有淋巴结转移间具有统计学意义(P=0.008,0.014)。结论:CD133在大肠癌组织中过表达,与部分临床病理特征有关,可以作为大肠癌的免疫学诊断候选标记物。

小细胞肺癌的神经内分泌免疫组化标记

应用光镜和免疫组化的方法,研究27例小细胞肺癌(SCLC)的光镜分型和3类共11种蛋白性标记物的表达。发现SCLC的NSE、Chromogranin、Synaptophysin、S-100的表达率分别为81.48％、11.11％、44.44％和18.52％;Cytokeratin、Vimentin、NF的表达率为92.59％、14.81％和22.22％;Desmin、GFAP未见表达。说明SCLC具有神经-上皮性分化。SCLC的Serotonin和Somatostatin的表达率14.81％和44.44％,表明其具有激素分泌的特性。综合应用上述抗体组合,SCLC的准确诊断率可达96％,具较高的准确性和应用价值。尤可用于治疗与复发的监视和转移灶的辨认。

肥大细胞亚型与结直肠癌患者预后关系的研究

目的：探讨肥大细胞（MC）亚型与结直肠癌患者预后的关系。方法：收集40例有完整临床、病理资料的结直肠癌患者的标本和40例正常结直肠黏膜标本,进行特殊染色和免疫组化染色。结果：MC在正常结肠黏膜组织数量4-22,平均6.7/HP。MC在肿瘤组织中数量为26-138,平均73/HP,差异有统计学意义。T型MC计数结果为0-48,平均2.2/HP。C型MC计数结果为16-83,平均51/HP。TC型MC计数结果为0-16,平均1.8/HP。C型与TC型MC与结直肠癌患者的肿瘤分化程度、临床分期和预后均无关。T型MC与结直肠癌患者的肿瘤分化程度、临床分期和预后有关,差异有统计学意义。结论：MC总数与临床预后呈负相关,T型MC与肿瘤分化程度、临床分期和预后呈负相关。

胃泌素和生长抑素在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨胃癌组织中胃泌素(GAS)、生长激素释放抑制素(SS)的表达及临床意义。方法:采用即用型免疫组化微波加热法对56例胃癌组织中的GAS、SS进行检测。结果:①胃内不同部位的胃癌组织中存在GAS、SS神经内分泌细胞。阳性表达率分别为42.8%(24/56)和23.21%(13/56);②随着胃癌的进展和临床Ⅲ、Ⅳ期,GAS阳性表达率上升,SS阳性表达率下降,在分化差的胃癌中GAS以中-强度阳性表达多见,占54.17%(13/24),SS以弱阳性表达多见,占76.92%(10/13)。结论:胃内不同部位的胃癌组织中存在GAS、SS神经内分泌细胞,随着胃癌的进展及临床Ⅲ、Ⅳ期中GAS阳性表达率上升、SS阳性表达率下降。在化疗前对胃癌组织进行GAS、SS检测,有助于临床联合用药的合理选择及预后判断。

回肠富于T细胞的大B细胞淋巴瘤合并结肠癌一例

患者男,48岁,因上腹隐痛4个月入院。门诊查肠镜示:升结肠恶性肿瘤;病理示:高级别上皮内瘤变,高度可疑为腺癌。入院查体:腹部无阳性体征。实验室检查示:血红蛋白65 g/L,大便隐血阳性(3+),癌胚抗原、甲胎蛋白、C A-199及CA-125均正常。腹部C T示升结肠管壁增厚、管腔狭窄,周围多发肿大淋巴结影;考虑为升结肠肿瘤性病变,伴周围淋巴结转移(图1A)。初步诊断:升结肠肿瘤。