NRP1调控M2型巨噬细胞极化介导电离辐射肺纤维化的作用研究

目的:研究神经菌毛蛋白1(NRP1)对电离辐射肺损伤导致纤维化进程的影响,并探讨其与M2型巨噬细胞间的关系。方法:电离辐射肺纤维化(RIPF)组小鼠以6 Gy X射线全胸辐射建立电离辐射肺纤维模型;对照组即正常小鼠;EG00229给药组(EG00229为NRP1拮抗剂)小鼠辐射前7 d小鼠EG00229给药处理。HE、天狼星红、马松染色观察三组小鼠肺组织损伤和纤维化胶原沉积;ELISA检测三组小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-4、TGF-β1炎症因子水平;IHC和RT-PCR检测三组小鼠肺组织中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和NRP1蛋白表达水平;免疫荧光检测三组小鼠肺组织中CD14和M2型巨噬细胞极化标志物精氨酸酶1(Arg1)、抵抗素样分子α(FIZZ1)、几丁质酶3样蛋白1(Ym1)蛋白表达水平。结果:HE染色显示RIPF组小鼠肺部呈现放射性肺纤维化病理形态表现,EG00229给药组小鼠肺组织纤维化损伤有明显改善;与对照组相比,RIPF组小鼠肺组织中Col-Ⅰ、α-SMA和NRP1及TNF-α、IL-4、TGF-β1和CD14表达水平显著升高,EG00229可显著抑制小鼠肺组织中Col-Ⅰ、α-SMA和NRP1以及TNF-α、IL-4、TGF-β1和CD14表达(P<0.05);与对照组相比,RIPF组小鼠肺组织中Arg1、FIZZ1和Ym1表达水平显著升高,EG00229可明显抑制小鼠肺组织中Arg1、FIZZ1和Ym1表达。结论:NRP1可能通过调控M2型巨噬细胞极化促进电离辐射肺纤维化的发生发展。

和厚朴酚在乳腺癌细胞上皮间质转化中的作用研究

目的探讨和厚朴酚对乳腺癌上皮间质转化(EMT)的作用及其机制。方法将MDA-MB-231细胞随机分为对照组(正常培养)、低剂量组(40μmol·L^(-1)和厚朴酚)、中剂量组(50μmol·L^(-1)和厚朴酚)、高剂量组(60μmol·L^(-1)和厚朴酚)、si-NC组(转染si-NC)、si-NF2组(转染si-NF2)、DMSO组(等剂量二甲基亚砜处理)、抑制药组(12μmol·L^(-1)Hippo通路抑制药Verteporfin)。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测细胞存活情况;用Transwell实验检测细胞迁移情况;用蛋白质印迹法检测EMT相关蛋白的表达水平。将BALB/c雌性小鼠随机分为模型组(构建移植瘤模型)、低剂量实验组(建模后灌胃给予100 mg·kg^(-1)和厚朴酚)、高剂量实验组(建模后灌胃给予200 mg·kg^(-1)和厚朴酚),每组10只。治疗结束后检测肿瘤体积和质量,并用蛋白质印迹法检测EMT相关蛋白的表达水平。结果对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的细胞存活率分别为(100.00±4.02)%、(80.14±6.51)%、(64.05±6.21)%和(53.70±5.19)%,细胞迁移数量分别为(276.30±14.77)、(219.40±12.50)、(162.20±9.53)和(100.10±6.50)个,神经纤维蛋白2(NF2)相对表达水平分别为0.52±0.04、0.60±0.06、0.65±0.07和0.78±0.10,细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)蛋白相对表达水平分别为0.70±0.06、0.47±0.04、0.41±0.05和0.36±0.03。低、中、高剂量组的上述指标与对照组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组、低剂量实验组、高剂量实验组小鼠的肿瘤体积分别为(922.02±109.61)、(743.04±64.04)和(605.00±72.63)mm^(3),肿瘤质量分别为(0.87±0.10)、(0.66±0.10)和(0.53±0.11)g,PD-L1蛋白相对表达水平分别为0.74±0.08、0.51±0.05和0.42±0.05,N-钙黏着蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平分别为0.75±0.07、0.60±0.10和0.51±0.04。低、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论和厚朴酚可能通过调节NF2-Hippo信号通路作用于PD-L1抑制乳腺癌细胞EMT。