血清NSE、NGB水平与新生儿缺氧缺血性脑病严重程度的相关性及对预后的预测价值研究

目的:研究血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑红蛋白(NGB)水平与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)严重程度的相关性及对预后的预测价值,为临床提供参考。方法:选取2015年6月—2021年6月开封市妇产医院收治的152例HIE患儿作为研究对象,将其设为疾病组。另选取同期于开封市妇产医院出生的健康新生儿50例,将其设为正常组。比较两组新生儿血清NSE、NGB水平。根据病情严重程度分疾病组为轻度组(48例)、中度组(59例)、重度组(45例)。比较三组患儿血清NSE、NGB水平。采用Spearman相关性分析法分析血清NSE、NGB与HIE严重程度的相关性。随访6个月,根据患儿预后情况将其分为良好组(115例)、不良组(33例),采用logistic回归分析HIE预后不良的危险因素。绘制新生儿工作特征曲线(ROC),分析血清NSE、NGB对HIE预后不良的预测价值。结果:疾病组血清NSE、NGB水平高于正常组,差异有统计学意义(t=31.041、43.497,P<0.05)。中、重度组血清NSE、NGB水平高于轻度组,重度组血清NSE、NGB水平高于中度组,差异有统计学意义(F=191.507、143.945,P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,血清NSE、NGB水平与HIE严重程度呈正相关(r=0.853、0.830,P<0.05)。logistic回归分析结果显示,5 min Apgar评分≤7分、HIE严重程度为重度、发病至治疗时间≥48 h是HIE预后不良的危险因素,差异有统计学意义(OR=3.149、3.677、1.865、2.396、5.726,P<0.05)。ROC显示,血清NSE、NGB预测HIE预后不良的最佳截断点分别为33.05 ng/mL、203.09 pg/mL,单独及联合预测的ROC下面积(AUC)分别为0.784、0.821、0.890,两者联合检测的预测价值高于单独检测。结论:血清NSE、NGB水平与新生儿HIE严重程度呈正相关,且两者联合检测对该病预后具有较高的预测价值。

尤瑞克林联合丁苯酞对急性进展性脑梗死患者脑红蛋白、胱抑素C及神经功能的影响

目的 探讨尤瑞克林、丁苯酞联合治疗对急性进展性脑梗死(APCI)患者脑红蛋白、胱抑素C及神经功能的影响。方法 2020年12月至2021年12月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的APCI患者220例,按照随机数字表法分为观察组、尤瑞克林组、丁苯酞组、对照组各55例。对照组行对症综合治疗,丁苯酞组行对症综合治疗+静脉注射丁苯酞,尤瑞克林组行对症综合治疗+静脉注射尤瑞克林,观察组行对症综合治疗+丁苯酞+尤瑞克林治疗。四组均连续治疗2周,比较四组临床疗效,治疗前后血清脑红蛋白、胱抑素C及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分。结果 治疗后,四组脑红蛋白均高于治疗前,胱抑素C及NIHSS评分均低于治疗前(P<0.05);血清脑红蛋白水平:观察组>尤瑞克林组、丁苯酞组>对照组,胱抑素C及NIHSS评分:观察组<尤瑞克林组、丁苯酞组<对照组(P<0.05);尤瑞克林组与丁苯酞组的脑红蛋白、胱抑素C及NIHSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组总有效率高于尤瑞克林组、丁苯酞组和对照组(P<0.05)。结论 尤瑞克林联合丁苯酞治疗APCI可显著提高患者血清脑红蛋白水平,降低血清胱抑素C水平及NIHSS评分,改善患者神经功能,提高临床疗效,具有一定的临床应用价值。

中国人神经珠蛋白(NGB)基因克隆与序列分析

应用RT_PCR方法从中国人胎脑组织中扩增出神经珠蛋白(NGB)特异性编码基因片段,并将其克隆到pMD18_TVector中,构建了pMD18_T_hNGB克隆质粒,然后进行测序分析并与国外报道的NGB序列相比较.结果表明,本文获得的中国人NGB编码基因序列与国外序列的同源性为98%.

NGB TVOS Java应用框架层API的封装模型分析

NGB TVPS是一款面向智能电视终端的核心基础软件平台,内嵌支撑数字电视业务的功能组件,其应用框架层实现了NGB终端中间件标准定义的API,支持NGB-J和NGB-H应用运行。特别地在Java应用框架层中引入了Android应用适配层,可兼容支持Android应用的运行。对Java应用框架层API的封装模型进行分析,阐述应用框架与底层组件之间的调用关系,并比较分析各种模型的特点。通过对封装模型的分析,可清晰地理解Android应用适配层API的封装原理,有助于进一步理解NGB TVOS兼容Android应用的技术原理。

大鼠脑组织缺血后Ngb mRNA表达与缺血时间推断的研究

目的探讨大鼠脑组织缺血后不同时间脑红蛋白(Ngb) mRNA表达及法医学意义。方法建立Wistar大鼠脑组织缺血模型,应用一步法逆转录-聚合酶链式反应(one step RT-PCR)技术与计算机图像分析技术检测脑组织缺血后不同时间Ngb mRNA表达的差别。结果脑缺血后Ngb mRNA表达迅速升高,缺血1min达高峰,缺血5min表达迅速降低,但仍高于假手术组水平,10min后随缺血时间延长表达再度逐渐增强。结论大鼠脑组织缺血后Ngb mRNA的表达呈现时相性的变化,可在法医实践中用于早期脑缺血时间的推断。

HIF-1及NGB,VEGF在脑挫裂伤后促脑血管生成的作用机制

目的探讨HIF-1调控Ngb、VEGF在脑挫裂伤后促血管生成的作用。方法采用蛋白质组学技术比较脑挫裂伤患者和非颅脑创伤患者额叶组织的差异蛋白质,并应用生物信息学技术分析鉴定差异蛋白。然后运用免疫组化和酶联免疫方法分别检测差异蛋白HIF-1、Ngb及VEGF在脑组织以及血清中的表达。结果建立了脑挫裂伤患者和非颅脑创伤患者组脑组织的2-DE图谱,鉴定了7种差异蛋白,其中有HIF-1、Ngb及VEGF。HIF-1、Ngb及VEGF在脑挫裂伤患者脑组织中的表达水平均高于非颅脑创伤患者。HIF-1、Ngb及VEGF在脑挫裂伤患者血清中的表达水平均显著高于非颅脑创伤患者。结论脑挫裂伤后,HIF-1通过调控Ngb和VEGF两个靶基因的释放,在新的脑血管生成过程中发挥了重要作用。HIF-1,Ngb和VEGF在血清中的含量变化,可为临床评估和监测缺氧缺血脑病的严重程度提供参考;对脑挫裂伤的诊断、治疗以及疾病的转归具有重要意义。

浅谈下一代广播电视网(NGB)

介绍了下一代广播电视网(NGB)的相关技术,简单分析了NGB和NGN(下一代网络)对三网融合的推动作用,介绍了NGB目前的进展状况。

脑缺血和NBP预处理对脑缺血沙鼠NGB和mit-Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

目的探讨丁基苯酞(NBP)对脑缺血沙鼠脑红蛋白(NGB)和线粒体N a+,K+-ATP(m it-N a+,K+-ATP)酶活性的影响。方法将蒙古沙鼠66只随机分为假手术组、脑缺血组、NBP预处理组。采用颈总动脉结扎的方法制作脑缺血模型。分别采用免疫组化染色及化学比色法检测NGB阳性细胞数和m it-N a+,K+-ATP酶活性。结果NBP预处理组NGB表达量在缺血1、10、30 m in时较脑缺血组显著增多(P<0.05);两组在缺血1、5、30、60 m in时m it-N a+,K+-ATP酶活性有统计学差异(P<0.05);NBP预处理组m it-N a+,K+-ATP酶活性与NGB表达量呈负相关(P<0.01)。结论NBP可促进脑缺血时NGB的表达,维持m it-N a+,K+-ATP酶活性。

天祝白牦牛NGB基因的克隆及生物信息学分析

为探讨天祝白牦牛NGB基因的分子结构特征,通过PCR扩增和测序技术,以及生物信息学分析工具,对NGB基因进行克隆、测序及相关生物信息学分析。结果表明:天祝白牦牛NGB基因长3 840bp,含有4个外显子和3个内含子,可编码151个氨基酸。氨基酸编码存在明显的密码子偏倚现象。与黄牛相比较,白牦牛NGB基因第3内含子存在2个碱基的缺失,氨基酸序列的第83和第97位分别发生(S→P)和(R→Q)的改变。天祝白牦牛NGB基因的成功克隆为进一步研究牦牛NGB的遗传特性和生理机制奠定了基础。

大鼠脑红蛋白(NGB)可溶性原核表达和单克隆抗体制备及鉴定

脑红蛋白 (NGB)是新发现的脑特异的携氧蛋白 .为了对其功能进行深入的研究 ,应用已构建大鼠NGB基因编码区原核表达载体pGEX 4T 2 NGB转化的大肠杆菌BL2 1 ,获得可溶性表达产物 .用谷胱甘肽S 转移酶 (GST)亲和层析柱纯化后作为抗原 ,免疫Balb c小鼠 .通过传统的细胞融合方法制备了抗大鼠NGB的单克隆抗体 ,并对全部 4株单抗进行了亚类和亚型、效价和特异性鉴定 .

大鼠脑红蛋白(NGB)的原核表达、抗体制备及其细胞分布

脑红蛋白 (NGB)是新发现的与脑内氧供应密切相关的分子 .为了检测细胞内脑红蛋白的表达、亚细胞分布从而对该分子进行深入的功能研究 ,成功地将大鼠脑红蛋白基因编码区构建于原核表达载体pGEX 4T 2 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得融合表达产物 .对含有融合蛋白的包含体进行溶解和复性 ,用谷胱甘肽S 转移酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,通过免疫家兔获得了兔源性抗NGB多克隆抗体 .采用Western印迹分析技术 ,用该抗体检测NGB基因的真核表达产物 ,证明该抗体有较好的针对NGB蛋白的专一性 ,可用于对NGB的结构和功能研究 .同时 ,用该抗体进行免疫组化分析发现 ,正常成年大鼠神经系统中有较多的NGB免疫反应阳性细胞分布 。

甘肃河西地区西门塔尔杂交类群NGB基因第4外显子的遗传变异研究

为研究甘肃河西的临泽、甘州、凉州、金昌、高台5个地区西门塔尔杂交类群NGB基因第4外显子的遗传多态性及其变异特征,采用PCR-SSCP方法检测了283头西门塔尔杂交类群NGB基因第4外显子和部分内含子的多态性,并对群体内各等位基因进行了测序。结果显示:5个地区西门塔尔杂交类群共检测出5个等位基因(A、B、C、D、E),表现为6种基因型(AA、BB、AB、AC、AD、AE)。5个地区西门塔尔杂交类群均能检测到AA、BB、AB 3种基因型,且甘州、凉州、高台西门塔尔杂交类群还分别检测到AC、AD、AE 3种基因型。A等位基因频率在5个群体中最高,为优势等位基因。对不同SSCP带型的对应片段进行测序分析,共发现5个核苷酸突变位点(31 bp C→T、68 bp G→C和G→A、129 bp A→G、207 bp C→T),5处突变中仅第207 bp处单核苷酸突变落在外显子区域,其余均落在内含子区域,但均未导致氨基酸发生改变。χ2检验结果显示,5个地区西门塔尔杂交类群在第207 bp处单核苷酸突变位点上仅凉州、金昌西门塔尔杂交类群处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。群体遗传学分析结果表明,临泽、甘州、凉州、金昌、高台西门塔尔杂交类群的多态信息含量(PIC)分别为0.358 2,0.383 9,0.427 9,0.368 2,0.394 7,均属于中度多态(0.25<PIC<0.5)。

甘南牦牛NGB基因的克隆及序列分析

【目的】对甘南牦牛NGB基因进行克隆和序列分析,同时探讨NGB的生理功能。【方法】采用TA克隆法克隆甘南牦牛NGB基因,运用多种软件对其基因序列及编码产物的结构、功能进行了生物信息学分析。【结果】甘南牦牛NGB基因全长3 844bp,包括4个外显子和3个内含子,其内含子中存在2个反向重复序列和1个正向重复序列;牦牛NGBCDs区全长456bp,其编码产物是由151个氨基酸残基组成的可溶性蛋白质,分子质量约为16 876.36u,理论等电点为4.86,推测NGB编码产物可能在牦牛物质运输和结合、能量代谢等过程中发挥着重要作用;系统发育树分析表明,甘南牦牛NGB与牛、藏羚羊等物种之间存在较高的同源性。【结论】甘南牦牛NGB基因的成功克隆,为进一步研究牦牛NGB的遗传特性和生理功能奠定了基础。

重组小鼠质粒pEGFP-NGB的构建和在培养神经胶质细胞中表达的实验研究

目的:构建重组小鼠质粒pEGFP-NGB并研究其在培养神经胶质细胞中的表达。方法:采用RT-PCR从小鼠脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-NGB表达载体。采用GeneJamer转染试剂和pEGFP-NGB重组子混合后转染至培养神经胶质细胞中,观察NGB在培养神经胶质细胞中mRNA以及蛋白表达。结果:阳性克隆测序结果显示所测序列与Genbank序列一致。RT-PCR和Western-blot结果表明转染重组质粒pEGFP-NGB培养神经胶质细胞NGBmRNA和蛋白均有较高的表达。荧光显微镜下观察发现,培养神经胶质细胞中有较多绿色荧光蛋白表达。结论:(1)成功构建pEGFP-NGB重组子;(2)构建的pEGFP-NGB重组子可在培养神经胶质细胞中表达。

面向NGB的EoC接入网技术分析

首先论述了EoC的系列标准,然后在面向NGB的EoC技术需求白皮书的基础上对EoC技术的物理结构和物理层参数进行了分析,最后阐述了低频EoC技术和高频EoC技术的各自特点,并且对EoC技术在有线电视接入网中可能会出现的一些问题进行了分析和总结,为各地在进行EoC技术的选择时提供一定的借鉴意义。

水杨酸钠给药对小鼠下丘核NGB mRNA和蛋白表达的影响

目的 :观察水杨酸钠给药对小鼠下丘核NGBmRNA和蛋白表达的影响 .方法 :成年健康昆明小鼠 4 8只分为A ,B ,C ,D四组 ,每组 12只 .A为对照组 ,B ,C ,D分别为水杨酸钠 2 0 0 ,30 0和 4 5 0mg/ (kg·d)给药组 .给药 15d后处死检测 ;采用RT PCR检测实验小鼠下丘核区NGBmRNA的表达 ;Western Blot分析NGB蛋白表达 .结果 :①对照组小鼠下丘核区NGBmRNA表达明显高于三个水杨酸钠给药组 (P <0 .0 1) ;三个水杨酸钠给药组NGBmRNA表达比较以D组表达最低 ,B组表达最高 ,C组与D组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) .②Western Blot检测结果显示实验各组均表达相对分子质量约为 170 0 0的NGB蛋白 .A组NGB蛋白表达明显高于其他各组 ;三个水杨酸钠给药组以B组表达最高D组表达最低 .结论 :水杨酸钠可显著降低下丘核神经元NGBmRNA和蛋白表达 ;水杨酸钠给药对下丘核神经元NGBmRNA和蛋白表达与给药剂量有关 .

Neuroglobin 基因体内转染对水杨酸钠给药后小鼠下丘核神经元听反应的影响(英文)

实验以48只成年健康昆明小鼠为实验对象,研究GeneJamer转染试剂介导的neuroglobin(NGB)基因体内转染对水杨酸钠给药后小鼠下丘核区听反应的影响。实验分4组,每组12只。A1组:对照组1(阴性对照,将GeneJamer转染试剂6μl和pEGFP-C12μg混合后注入下丘核脑区);A2组:对照组2[阳性对照,将GeneJamer转染试剂(6μl)和pEGFP-NGB(质粒载体pEGFP-C1与NGB基因全编码序列构建的重组子2μg)混合后注入下丘核脑区];B组:水杨酸钠给药组(450mg/kg·d-1)+pEGFP-C1;C组:水杨酸钠(450mg/kg.d-1)+pEGFP-NGB组。以直接注射法将GeneJamer转染试剂和重组质粒pEGFP-NGB混合后注入小鼠下丘核区。采用RT-PCR和Westernblot技术检测小鼠下丘核区NGBmRNA和蛋白的表达;采用细胞外记录技术,研究小鼠下丘核区神经元在水杨酸钠给药后转染重组质粒pEGFP-NGB对强度-发放率函数(刺激声强与实验鼠下丘核区神经元在接受声刺激所产生的电发放的关系曲线)、强度-潜伏期函数(刺激声强与实验鼠下丘核区神经元在接受声刺激至产生电发放潜伏期之间的关系曲线)和频率调谐曲线(实验鼠下丘核区神经元在各个频率纯音刺激下起反应的阈值绘制的曲线)的影响。实验观察到:(1)经GeneJamer转染试剂介导NGB基因可有效地转染小鼠下丘核区脑组织并得到表达。(2)水杨酸钠给药后神经元的强度-发放率函数曲线升高。对照组A1、A2各项指标进行比较均无统计学意义。对照组A1、A2和水杨酸钠+pEGFP-NGB组神经元的强度-发放率函数以非单调型(随刺激强度增加时,发放率表现为先降后升呈“V”形或“U”形)为主,分别占74.6%、72.2%和59.3%,水杨酸钠给药组以不规则型强度-发放率函数为主,占47%,与对照组A1、A2和水杨酸钠+pEGFP-NGB组比较,有显著性差异(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。(3)水杨酸钠给药后神经元的强度-潜伏期函数曲线降低。对照组A1、A2各项指标进行比较均无统计学意义。水杨酸钠给药组以非单调型强度-潜伏期率函数为主,与对照组A1、A2和水杨酸钠+pEGFP-NGB组比较,有显著性差异(P<0.01、P<0.05)。(4)A1和A2对照组听反应神经元的调谐曲线,Q-10dB值均大于5.00,其调谐曲线为狭窄型。记录水杨酸钠给药组72个听神经元的调谐曲线,有53个神经元的Q-10dB值小于5.00,Q-10dB值最小为2.12,其调谐曲线为宽阔型;其余19个神经元的Q-10dB值大于5.00,属于狭窄型调谐曲线。水杨酸钠+pEGFP-NGB组67个听神经元的调谐曲线,有12个神经元的Q-10dB值小于5.00,Q-10dB值最小为2.87,其调谐曲线为宽阔型,其它的神经元的值大于5.00。它们的调谐曲线均属狭窄型。以上结果提示外源性NGB基因在水杨酸钠给药后小鼠下丘核区局部高表达,提示GeneJamer转染试剂介导NGB体内转基因治疗水杨酸钠引起的下丘核区的损伤的方法是可行的。实验小鼠转染NGB基因后可逆转因水杨酸钠给药引起的强度-发放率函数曲线升高以及强度-潜伏期函数曲线降低,并可逆转水杨酸钠引起的部分听神经元对声刺激强度的编码类型。

间歇性低压缺氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注海马CA1区Ngb和Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨间歇性低压缺氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注海马CA1区脑红蛋白(Ngb)和Bcl-2蛋白表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为假手术组、低压缺氧预处理对照组、全脑缺血/再灌注组、低压缺氧预处理+全脑缺血/再灌注组4组,将间歇暴露于低压缺氧环境的大鼠作为低压缺氧预处理对照组。采用Pulsinelli四血管闭塞法复制大鼠全脑缺血/再灌注模型,夹闭颈总动脉造成全脑缺血8 min后再灌注。用硫堇染色法和免疫组织化学方法分别观察大鼠海马组织学改变和海马组织Ngb、Bcl-2蛋白表达变化。结果:低压缺氧预处理+全脑缺血/再灌注组大鼠海马CA1区存活细胞数较全脑缺血/再灌注组明显增加,其海马组织Ngb和Bcl-2蛋白表达量较全脑缺血/再灌注组显著升高。结论:间歇性低压缺氧预处理可能通过上调海马组织Ngb和Bcl-2蛋白的表达,减少全脑缺血再灌注后海马神经元的死亡而发挥神经保护作用。

脑卒中患者HIF-1α、Ngb表达水平与神经功能缺损及病灶大小的关系

目的探讨脑卒中患者低氧诱导因子α(hypoxia inducible factorα,HIF-1α)、脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)表达水平与神经功能缺损以及病灶大小的关系。方法选取2014年6月至2016年2月来院就诊脑卒中患者285例为研究对象,其中缺血性脑卒中150例,出血性脑卒中135例,同时随机选取体检健康者100名作为健康人对照组。所有患者进行生化指标及血浆中Ngb及HIF-1α水平的检测,并对其神经功能缺损状况进行评分。结果 3组患者的总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、纤维蛋白原(Fib)、HIF-1α及Ngb水平差异有统计学意义(P<0.05);2组脑卒中组的NIHSS评分、三酰甘油(TG)、LDL-C、Glu、Fib、HIF-1α及Ngb水平差异无统计学意义(P>0.05),但与健康人对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。随着脑梗死体积的增加,缺血性脑卒中组的血浆HIF-1α和Ngb的水平显著递增(P<0.05)。在缺血性脑卒中中,HIF-1α和Ngb的表达水平均与神经功能缺损呈负相关(P均<0.05)。而在失血性脑卒中中,HIF-1α和Ngb的表达水平不影响神经功能缺损。结论脑卒中患者血浆中HIF-1α和Ngb水平可作为评价缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度以及病灶大小的参考指标。

急慢性酗酒后脑组织Ngb、Hif-1α表达和Na^+,K^+-ATPase活性变化与TSAH的关系

目的探讨急慢性酗酒后脑组织脑红蛋白(Ngb)、缺氧诱导因子1α(Hif-1α)表达和Na+,K+-ATPase活性变化及与外伤性蛛网膜下腔出血(TSAH)的关系。方法雄性SD大鼠146只,随机分为急、慢性模型两大组,每组再各分为灌酒打击、灌水打击及单纯灌酒3个组,其中各打击组于最后一次灌胃后2h,用单摆式打击装置制作脑震荡模型;断颈处死大鼠,用免疫组化法观察脑组织Ngb、Hif-1α的表达、用分光光度法检测Na+,K+-ATPase。结果急、慢性灌酒打击组TSAH发生率分别为28.6%和82.4%;各灌酒打击和单纯灌酒组Ngb、Hif-1α-IOD值均显著高于各灌水打击组(P<0.01);急性单纯灌酒组2~4h Na+,K+-ATPas活性明显低于灌水打击组(P<0.01);慢性单纯灌酒组2h Na+,K+-ATPase活性高于急性灌酒组(P<0.01),而低于灌水打击组(P<0.05)。结论急慢性灌酒后,脑组织Ngb、Hif-1α均呈反应性增强,Na+,K+-ATPase活性降低,酒精作用可能参与了TSAH的发生和死亡过程。