Neuropilin-1 mRNA在不同动情周期及周龄阶段小鼠卵巢中的表达

目的:探讨Neuropilin-1(NRP-1)mRNA在繁殖适龄期小鼠动情周期间以及不同周龄阶段小鼠卵巢中的表达。方法:选用繁殖适龄期不同动情周期小鼠以及不同周龄阶段小鼠,通过实时定量聚合酶链反应检测其卵巢中NRP-1 mRNA的表达。结果:NRP-1在小鼠不同动情周期卵巢中的表达在mRNA水平差异无显著性(P>0.05)。比较其mRNA在不同周龄阶段小鼠卵巢的中表达显示,近绝育期32周组表达水平显著高于其他组:为3周组的2.94倍(P<0.01),6周组的4.92倍(P<0.01),11周组的2.29倍(P<0.01)。而其他各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NRP-1 mRNA在小鼠卵巢中的表达不随动情周期而改变,且随着卵巢生理功能的下降而显著升高,提示NRP-1与卵巢衰老进程有关。

Neuropilin-1^＋ T细胞与CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的比较

目的:分析Neuropilin-1+T细胞(Nrp-1+T细胞)与经典CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的关系并比较二者的免疫调节作用。方法:流式细胞术分析BALB/c小鼠脾脏T细胞上Nrp-1与CD4、CD25的表达关系并分选Nrp-1+T细胞及CD4+CD25+Treg,通过B16-F10-luc-G5黑色素肿瘤细胞体外培养实验并利用萤光成像系统,观察比较两种细胞对NK细胞杀伤B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的影响。结果:CD4+CD25+Treg中表达Nrp-1的比例为(27.28±1.17)%,明显高于CD4+CD25-T细胞的(1.63±0.08)%(P<0.01);在体外实验中,Nrp-1+T细胞与CD4+CD25+Treg均能抑制NK细胞杀伤B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞,Nrp-1+T细胞组的肿瘤细胞数目在6、24、48、72h分别为984±15、1015±14、1261±21、1323±38,高于CD4+CD25+Treg组的931±4、983±8、1201±18、1256±18,两组肿瘤细胞数目在各时间点均有统计学意义(P<0.01)。结论:经典CD4+CD25+Treg中表达Nrp-1的细胞比例较高,Nrp-1+T细胞有负性免疫调节作用,抑制功能比CD4+CD25+Treg更强,可以作为一类新的Treg亚群。

Neuropilin-1及其配体SemaphorinIII在AML和正常人骨髓中的表达初探

目的 :了解neuropilin_1基因及其配体semaphorinIII在急性髓性白血病 (AML)骨髓中的表达情况。方法 :利用逆转录_聚合酶链反应扩增20例急性髓性白血病病人骨髓单个核细胞中的neuropilin_1基因及其配体semaphorinIII基因 ,了解其表达情况。14例非血液病患者的骨髓标本作为对照。结果 :急性髓性白血病骨髓单个核细胞中的neuropilin_1基因表达率为15 0% ,semaphorinIII基因表达率为60 0% ,分别与相应正常对照(7 1 % ,57 1% )相比较无显著性差异。结论 :参与调控骨髓基质细胞的neuropilin_1基因及其配体semaphorinIII可表达于AML和正常人的骨髓细胞中 。

靶向Neuropilin-1的抗肿瘤研究进展

Neuropilin-1(NRP-1)又称神经鞭毛素蛋白,是一个大小为130～140 kD的非酪氨酸激酶跨膜蛋白,参与脊椎动物胚胎的神经和心血管系统发育。它作为一个多功能受体调节VEGF(血管内皮生长因子),PDGF(血小板衍生生长因子),bFGF(成纤维生长因子)等细胞因子的信号通路,与肿瘤血管新生和肿瘤转移密切相关。NRP-1被认为是一个新的肿瘤治疗靶点,近年来针对NRP-1为靶点的药物研究有不少新进展。本文主要介绍NRP-1的生物学特征,对肿瘤作用以及相关药物研究。

大鼠弥漫性轴索损伤后突起坍塌蛋白Sema3A及其受体neuropilin-1的表达

目的研究突起坍塌蛋白(semaphorin 3A,Sema3A)及其受体神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)在弥漫性轴索损伤(DAI)大鼠脑组织中的表达,探讨二者在DAI后脑损伤及神经修复中的可能作用及分子机制。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为4组:对照组、DAI后6h、24h、7d组,每组各12只。采用大鼠头颅瞬间旋转损伤装置,制作大鼠颅脑DAI模型,改良NSS法评估大鼠神经功能的改变。按预定时间点灌注取脑进行HE及镀银染色,免疫荧光染色检测Sema3A和NRP-1的表达定位。RT-PCR与Western blot分别检测皮质、海马、脑干Sema3A和NRP-1的mRNA及蛋白表达。结果 DAI造模后在脑干、皮髓交界区、胼胝体等部位观察到神经轴突有不同程度的肿胀、迂曲、断裂、轴索球形成等病理征象,并有不同程度的神经细胞变性、核固缩等改变,伤后24h最明显。免疫荧光显示Sema3A主要表达于各脑区神经元,NRP-1表达于神经元、星形胶质细胞及微血管内皮细胞。对照组Sema3A和NRP-1mRNA及蛋白表达水平较低,DAI后6h其表达显著升高,24h达高峰,并持续到7d。结论 Sema3A及其受体NRP-1在DAI大鼠脑组织内表达升高,参与神经损伤及修复的病理生理过程。

Semaphorin 3A及其受体Neuropilin-1在舌癌组织及Tca8113中的表达

目的:观察Semaphorin 3A(SEMA3A)及其受体Neuropilin-1(Nrp-1)在舌癌组织及舌癌细胞系Tca8113中的表达,探讨其对舌癌中血管生成的意义。方法:应用免疫组织化学方法检测舌癌组织和癌旁组织中SEMA3A及Nrp-1的表达,应用免疫细胞化学检测SEMA3A及Nrp-1在Tca8113中的表达,并用Western印迹检测舌癌组织、癌旁组织及舌癌细胞系Tca8113中SEMA3A及其受体Nrp-1的表达情况。采用SPSS11.0软件包对数据进行χ2检验。结果:免疫组织化学显示,17/20例舌癌组织SEMA3A呈阴性表达,18例Nrp-1呈阳性表达。19/20例癌旁组织中SEMA3A阳性表达,而Nrp-1均呈阴性表达。免疫细胞化学显示,SEMA3A在舌癌细胞中检测不到,而Nrp-1均呈阳性表达。Western印迹检测与此结果完全相符。SEMA3A及Nrp-1在舌癌及癌旁组织中的表达有显著差异(P<0.001)。结论:SEMA3A及其受体Nrp-1在舌癌组织及细胞系中表达异常,提示其可能与肿瘤血管生成相关。

Neuropilin-1在子宫内膜癌细胞系中的表达及17β雌二醇对其表达的调控及意义

目的:探讨神经纤毛蛋白(NRP-1)在子宫内膜癌细胞系中的表达及17β雌二醇(17β-E2)对其表达的调控。方法:采用RT-PCR法及Western blot法检测NRP-1在子宫内膜癌HEC-1A及Ishikawa细胞系中的表达;荧光定量PCR法检测17β-E2对HEC-1A及Ishikawa细胞系中NRP-1 mRNA表达的调控;Western blot法检测Ishikawa细胞中NRP-1表达的变化。结果:HEC-1A及Ishikawa细胞中NRP-1 mRNA及蛋白水平均为阳性表达。17β-E2对Ishikawa细胞系中NRP-1 mRNA表达的影响显著强于HEC-1A,且17β-E2浓度为2×10-7mol/L,作用时间48h时对NRP-1 mRNA表达的促进作用最明显。17β-E2对Ishikawa细胞中NRP-1蛋白表达呈时间依赖性。结论:NRP-1表达于高表达雌激素受体(ER)细胞系Ishikawa及低表达ER细胞系HEC-1A中,且2×10-7mol/l E2作用48h能明显促进Ishikawa细胞系中NRP-1的表达,提示NRP-1可能与子宫内膜癌的发生发展密切相关。

Neuropilin-1在小鼠黑色素瘤细胞增殖中的作用

目的:探讨Neuropilin-1(Nrp-1,神经菌毛素)在小鼠黑色素瘤细胞体外增殖中的作用。方法:用活细胞荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE)标记小鼠B16-F10黑色素瘤细胞后,将肿瘤细胞分别用Nrp-1阻断抗体及Nrp-1配体血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor165,VEGF165)阻断抗体预孵育,体外培养72小时后流式细胞术结合Modfit软件分析肿瘤细胞增殖情况。结果:CFDA-SE标记黑色素瘤细胞生长良好,非抗体阻断组的肿瘤细胞增殖指数显著高于Nrp-1抗体阻断组[(20.67±1.16)%vs(12.67±0.28)%,P<0.01]及VEGF-165抗体阻断组[(20.67±1.16)%vs(15.15±0.83)%,P<0.01],两个抗体阻断组的增殖指数差异也非常显著(P<0.01)。结论:Nrp-1及其配体VDGF-165对小鼠黑色素瘤细胞的增殖有显著地促进作用,阻断Nrp-1产生的抑制肿瘤细胞增殖作用比阻断VEGF165更强;VEGF165/Nrp1直接作用及Nrp-1/Nrp-1直接作用也可能是肿瘤细胞增殖的重要机制。

大鼠海马突起坍塌蛋白Sema3A及其受体neuropilin-1 mRNA的表达

目的探讨大鼠海马Sema3A及其受体neuropilin-1(NP-1)mRNA在发育过程中表达的规律。方法采用RT-PCR方法检测大鼠海马发育不同阶段Sema3A及其受体NP-1 mRNA的表达。结果Sema3A电泳条带灰度呈下降趋势,在胚胎期、新生期有较高的表达,幼年期、成年期和老年期表达较弱。NP-1电泳条带在大鼠海马发育的各个时期均有较高的表达,以胚胎期最高,新生期表达相对其他时期弱,但在幼年期、成年期和老年维持较高表达水平。结论大鼠海马在胚胎期和新生期是非目的性突起坍塌的活跃期,幼年、成年和老年期处于相对休眠期;NP-1始终处于高表达状态,可能参与神经退行性疾病的发生。

Neuropilin-1在结肠癌中的表达及其与预后的关系

目的研究结肠癌中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)的表达,并探讨其与预后的关系。方法收集我院具有随访资料结肠癌石蜡标本58例,采用免疫组化法检测结肠癌及癌旁组织中NRP-1的表达,并采用KaplanMeier方法分析NRP-1表达的高低与患者预后的关系。结果免疫组化结果显示,结肠癌组织中NRP-1表达明显高于癌旁组织(t=2.464,P=0.017);NRP-1阳性表达患者32月生存率显著低于阴性表达患者(χ~2=6.832,P=0.009)。结论NRP-1的高表达参与结肠癌的发生及发展,并导致患者预后不佳。

Neuropilin-1在胰腺癌的表达及其与微血管密度的相关性研究

胰腺癌是常见的恶性肿瘤,恶性程度高、转移早。本研究通过免疫组织化学的方法探讨Neuropilin-1在胰腺癌的表达及其同肿瘤微血管密度（MVD）之间的关系。

射波刀治疗对复发胶质瘤患者外周血CD4^+CD25^+Neuropilin-1^+调节性T细胞与近期疗效的影响

背景与目的:观察复发胶质瘤患者接受射波刀治疗后外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+调节性T细胞(Treg)的变化,分析患者的近期疗效,旨在探讨射波刀对复发胶质瘤可能的治疗机制。方法:以12名健康成年人作为对照组,用流式细胞仪检测53例手术后复发的胶质瘤患者(分为A、B两组,A组为射波刀治疗组,n=25;B组为非射波刀治疗组,仅给予保守对症治疗而未进行任何放化疗,n=28)外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg水平,并进行30月的生存随访,观察两组的近期疗效。结果:治疗前A、B两组患者外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg分别为(13.44±2.76)%和(12.91±2.87)%,明显高于对照组(2.78±1.07)%(P<0.01)。A组经射波刀治疗3月后外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg水平为(3.13±1.09)%,较治疗前明显下降(P<0.01)。B组CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg为(16.12±2.98)%,较3月前升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。A组缓解率为76.0%,无进展率为12.0%,进展率为12.0%;B组缓解率为10.7%,无进展率为17.9%,进展率为71.4%。A组死亡5例(20%),中位生存时间13个月(3~31月)。B组随访死亡15例(53.6%),中位生存时间7个月(1~13月)。其中两组缓解率、进展率、死亡率及中位生存时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复发胶质瘤患者体内CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg升高,外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg检测有助于监测胶质瘤复发和预后的评估;射波刀可以降低复发胶质瘤患者的CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg水平,近期疗效优于保守治疗;射波刀治疗复发胶质瘤的机理可能与解除瘤负荷、降低CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg、纠正机体免疫功能紊乱有关。

Neuropilin-1 mRNA在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达

目的:探讨Neuropilin-1(NRP-1)mRNA在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达。方法:选用C57BL/6j小鼠新生及促性腺激素预处理不同时间点卵巢,通过实时定量聚合酶链反应检测NRP-1mRNA表达。结果:NRP-1mRNA在新生第3天小鼠卵巢中的表达是第5天的1.7倍(P<0.05),是第14天的1.5倍(P<0.05);相对于对照生理盐水注射组(对照组),在孕马血清处理后4、8、12、24h,NRP-1mRNA表达显著降低(P<0.05),至24h最低,而48h显著增高为对照组的1.5倍(P<0.05);给予人绒毛膜促性腺激素后与0h相比NRP-1mRNA表达于第4小时下降至最低(P<0.05),后于第12小时升至最高(P<0.05)。结论:NRP-1在始基卵泡募集和卵泡发育、成熟及排卵过程中发挥重要作用。

GAP-43,Netrin-1,Collapsin-1和Neuropilin-1在出生后小鼠小脑中的动态表达(英文)

GAP-43,netrin-1,collapsin-1和neuropilin-1被认为在成网络分布的神经联系中发挥重要的作用.在年幼的啮齿类动物中,小脑包含5种不同的集中分布层:白质、内颗粒细胞层(IGL)、浦肯野氏细胞层(PCL)、分子层(ML)和外颗粒细胞层(EGL).与浦肯野氏神经元在出生前产生这一点不同的是,EGL中的细胞在出生后产生,它们接受从前脑olivary核团发出的攀援纤维的主要神经投射,以及从内颗粒细胞发出的平行纤维的神经投射.这些神经投射主要在出生后的前3个星期内建立,同时还有浦肯野氏细胞的发育和成熟.而GAP-43,netrin-1,collapsin-1和neuropilin-1在出生后小脑发育的潜在作用仍然不清楚.为了更加清楚地探讨上述问题,检验了GAP-43,netrin-1,collapsin-1和neuropilin-1的mRNA与蛋白质在出生后5,10,20天和成年小鼠小脑中的表达情况.研究结果显示,这4种分子在小鼠出生后的小脑中有不同的时间和空间表达形式,这些结果与出生后发育和成年期间的轴突发生、延伸以及突触形成都有关联.通过免疫组织化学双标染色,发现小鼠出生后10天的小脑中,GAP-43阳性的浦肯野氏细胞也显示netrin-1或collapsin-1阳性,并且collapsin-1阳性的细胞也对netrin-1阳性.上述研究结果证明这4种分子可能参与了小脑的出生后发育.

Neuropilin-1在肿瘤发生发展中的作用

神经菌毛素(neuropilin-1,Nrp-1)是一种多功能的非酪氨酸激酶受体,在内皮细胞及多种肿瘤细胞表面高表达。Nrp-1主要作为血管内皮细胞生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)的共受体,可显著提高VEGF165受体(vascular endothelial growth factor receptor 2,KDR)与VEGF165结合,促进肿瘤血管新生及肿瘤迁移。近期的研究表明,Nrp-1还能通过与脑信号蛋白Ⅲ(semaphorin Ⅲ,SEMA3)相互作用、与转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)相互作用从而促进纤连蛋白聚集,改善肿瘤微环境,并介导调节性T细胞到肿瘤组织等多种途径,促进肿瘤的发生发展。由于Nrp-1在于肿瘤发生发展中所起到的病理性促进作用,Nrp-1逐渐成为肿瘤治疗的一个新靶标,本文主要介绍Nrp-1的生物学特征以及其对于肿瘤发生发展中的信号转导作用。

Neuropilin-1在胰腺癌组织及细胞系中的表达

目的了解Neuropilin1在胰腺癌组织、癌旁组织及胰腺癌细胞系中的表达情况。方法运用免疫组化法和RTPCR法分别检测Neuropilin1及其mRNA在胰腺癌组织、癌旁组织及细胞系中的表达。结果免疫组化检测发现18例胰腺癌组织标本中Neuropilin1均呈高表达,而癌旁组织中无一例表达;RTPCR检测mRNA的表达结果显示14例胰腺癌组织中有9例表达,癌旁组织中无一例表达,Panc1、Aspc1、Bxpc3细胞系中均表达。结论Neuropilin1表达于大多数胰腺癌组织及细胞系中,而在癌旁组织中不表达,提示Neuropilin1的表达可能与胰腺癌的发生发展密切相关。

Neuropilin-1在食管鳞癌中的表达及其意义

目的探讨Neuropilin_1(NRP_1)在食管鳞癌中的表达及其生物学和临床意义。方法取42例新鲜原发食管鳞癌和邻近正常食管粘膜标本,所有的标本均经病理诊断确诊。用RT_PCR方法检测每例患者癌组织和相应癌旁正常组织中NRP_1mRNA的表达。癌与癌旁正常组织表达值之间的比较采用配对t检验,癌组织的表达值与临床病理因素之间的关系采用成组t检验,检验结果以P<0.05为有意义。结果在42例患者中,37例NRP_1mRNA表达强于相应癌旁正常组织,占89.00%,肿瘤直径≥3cm组、外膜浸润组和淋巴结转移组的NRP_1mRNA表达明显增高。癌组织中NRP_1mRNA的表达与肿瘤分化程度和性别无关。结论在食管鳞癌中NRP_1mRNA的表达明显高于癌旁正常组织,并且与食管鳞癌的发展、浸润和转移有关。