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Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响 被引量:2
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作者 周竞奇 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第19期3373-3377,共5页
目的:研究Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响。方法:将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组12只;假手术组只行颅骨开窗手术,其余各组均建立胶质细胞瘤模型。模型组腹腔注射0.9%氯化钠,治疗组腹腔注射N... 目的:研究Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响。方法:将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组12只;假手术组只行颅骨开窗手术,其余各组均建立胶质细胞瘤模型。模型组腹腔注射0.9%氯化钠,治疗组腹腔注射NRP-1 MAb,均每日1次。干预14天后取材。对肿瘤组织称重,免疫组化检测Bax和Bcl-2表达,Western blot检测NRP-1蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达量,qPCR检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达情况,TUNEL检测细胞凋亡情况。结果:假手术组无肿瘤,治疗组肿瘤组织重量显著小于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示:与假手术组比较,模型组和治疗组Bax表达显著下降,Bcl-2表达显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组Bax表达上升,Bcl-2表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组NRP-1蛋白和Bcl-2蛋白表达量显著上升,Bax蛋白表达量显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组NRP-1蛋白和Bcl-2蛋白表达量显著下降,Bax蛋白表达量显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。qPCR检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组Bax mRNA表达显著下降,Bcl-2mRNA表达显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组Bax mRNA表达上升,Bcl-2mRNA表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。TUNEL检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组的细胞凋亡率显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组的细胞凋亡率显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:NRP-1MAb可通过抑制NRP-1表达而上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达促进胶质细胞瘤凋亡。 展开更多
关键词 胶质细胞瘤 凋亡 neuropilin1 BAX BCL-2
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沉默NRP-1基因对人T细胞白血病Jurkat细胞株增殖与凋亡的影响 被引量:4
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作者 王红梅 徐振媛 +2 位作者 杜秀平 李滔涛 韩正祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1447-1452,共6页
目的:探讨RNAi沉默NRP-1基因对人T细胞白血病细胞株增殖与凋亡的影响。方法:将我们前期构建好的p LB-NRP-1/shRNA重组慢病毒质粒,感染至Jurkat细胞中,用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况及化疗药物表柔比星(EPI)处理后细胞增殖情况;用AV/P... 目的:探讨RNAi沉默NRP-1基因对人T细胞白血病细胞株增殖与凋亡的影响。方法:将我们前期构建好的p LB-NRP-1/shRNA重组慢病毒质粒,感染至Jurkat细胞中,用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况及化疗药物表柔比星(EPI)处理后细胞增殖情况;用AV/PI法结合流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期。结果:细胞增殖结果:在48、72、96 h时间点NRP-1/shRNA干扰组的OD值均低于相应对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05);细胞凋亡率结果:与对照组比较,NRP-1/shRNA干扰组细胞的凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);对化疗药物表柔比星(EPI)敏感性检测结果:EPI浓度为0.025、0.05、0.1、0.2、0.4μg/ml时,NRP-1/shRNA干扰组的细胞生长抑制率较相应对照组高,差异皆有统计学意义(P<0.05),并且选择IC50进行EPI诱导后,NRP-1/shRNA干扰组的细胞凋亡率明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);WB结果显示:与对照组相比,NRP-1/shRNA干扰组Bcl-2蛋白的表达水平明显下降,Bax的表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);细胞周期结果:与对照组比较,NRP-1/shRNA干扰组G0/G1期细胞的比例增高,S期细胞的比例明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:RNAi沉默NRP-1基因可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡,提高对化疗药物的敏感性,其机制可能涉及Bcl-2/Bax途径的调节;并可将细胞周期阻滞在G0/G1期,降低细胞的增殖水平,诱导细胞进入凋亡期。 展开更多
关键词 NRP-1 RNA干扰 慢病毒载体 T细胞白血病 增殖 凋亡 细胞周期 化疗药物敏感性
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Silencing Neuropilin 1 gene reverses TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition in HGC-27 gastric cancer cell line 被引量:1
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作者 Weiguo Xu Xin Yang +5 位作者 Qiqi Zhan Guanyi Ding Shang Guo Bing Zhu Hong Xu Xiangmei Liu 《Oncology and Translational Medicine》 CAS 2020年第6期258-265,共8页
Objective The aim of this study was to determine Neuropilin 1(NRP1)contribution to transforming growth factorβ1(TGF-β1)-induced epithelial mesenchymal transition(EMT)of HGC-27 gastric cancer cells and study its mech... Objective The aim of this study was to determine Neuropilin 1(NRP1)contribution to transforming growth factorβ1(TGF-β1)-induced epithelial mesenchymal transition(EMT)of HGC-27 gastric cancer cells and study its mechanism.Methods In this study,TGF-β1 was used to induce EMT in HGC-27 cells.Further,these cells were stably transfected with siRNA targeting NRP1.Wound healing and transwell assays were used to measure cell migration and invasion,respectively.NRP1 and EMT markers were measured using quantitative real time reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting.Results Exposure of TGF-β1 conferred a fibroblastic-like shape to cancer cells and significantly increased the expression of NRP1 in HGC-27 cells.TGF-β1 subsequently promoted migration and invasion of HGC-27 cells.Furthermore,silencing NRP1 inhibited the invasion and migration of TGF-β1-induced cells undergoing EMT.Conclusion Silencing NRP1 can inhibit cell migration,invasion,and metastasis and reverse the TGF-β1-induced EMT process of gastric cancer. 展开更多
关键词 neuropilin1(NRP1) epithelial-mesenchymal transition(EMT) gastric cancer transforming growth fqactor-β1
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神经纤毛蛋白1基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响 被引量:7
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作者 连海峰 吴小翎 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第11期1190-1192,1197,共4页
目的探讨神经纤毛蛋白1(Neuropilin1,NRP1)基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响。方法构建NRP1基因特异性shRNA表达质粒,经脂质体介导转染入人胃腺癌SGC7901细胞。采用Western blot法检测细胞中NRP1蛋白的表达水平,应... 目的探讨神经纤毛蛋白1(Neuropilin1,NRP1)基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响。方法构建NRP1基因特异性shRNA表达质粒,经脂质体介导转染入人胃腺癌SGC7901细胞。采用Western blot法检测细胞中NRP1蛋白的表达水平,应用流式细胞术和Annexin-V-FITC/PI法检测细胞的增殖水平和凋亡率。结果经酶切及测序鉴定证明,shRNA-NRP1质粒构建正确,转染SGC7901细胞48h后,能有效抑制NRP1蛋白的表达,G0/G1期细胞百分比显著升高,S期细胞显著减少,细胞凋亡率增加。结论 shRNA-NRP1质粒能有效抑制胃腺癌SGC7901细胞株NRP1蛋白的表达,细胞周期阻滞在G0/G1期,从而降低细胞的增殖水平,诱导细胞进入凋亡期。 展开更多
关键词 神经纤毛蛋白质1 胃肿瘤 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡
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