Sema 3A/NRP-1信号通路与骨代谢的研究进展

信号素3A(semaphorin 3A,Sema 3A)是信号素家族一员,参与轴突引导、心血管发育、肿瘤形成、免疫细胞的调节,以及骨稳态,神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)作为其辅助受体发挥作用。近年来研究发现,Sema 3A/NRP-1通路能够促进骨形成、抑制骨吸收从而调节骨代谢。具体通过经典Wnt/β-catenin信号通路、sGC-cGMP信号通路、神经调节、RANK-RANKL通路、炎症反应调节等途径调节骨代谢。笔者对近年来国内外相关文献进行综述,旨在为防治骨质疏松提供参考。

复方斑蝥胶囊联合紫杉醇、卡铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察及对血清NRP-1、B7-H3水平的影响

目的:观察复方斑蝥胶囊联合紫杉醇、卡铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效及对血清神经纤毛蛋白1 (NRP-1)、B7-H3水平的影响。方法:选取80例晚期非小细胞肺癌患者,按照随机数字表法分为对照组和研究组各40例。对照组给予紫杉醇加卡铂化疗方案,研究组在对照组基础上加用复方斑蝥胶囊治疗。比较2组临床疗效,简易智能精神状态检查量表(MMSE)、日常生活能力量表(ADL)评分,CD3^(+)、CD4^(+)和自然杀伤(NK)细胞以及血清NRP-1、B7-H3水平。结果:研究组总有效率为75.00%,对照组为40.00%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组MMSE、ADL评分均较治疗前升高(P<0.05),且研究组2项评分均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组CD4^(+)、NK细胞水平均较治疗前升高(P<0.05),CD8^(+)水平较治疗前降低(P<0.05);且研究组CD4^(+)、NK细胞水平高于对照组(P<0.05),CD8^(+)水平低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组血清NRP-1、B7-H3水平均较治疗前降低(P<0.05),且研究组2项水平均低于对照组(P<0.05)。结论:复方斑蝥胶囊联合紫杉醇加卡铂化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效显著,可有效改善患者免疫功能,下调血清NRP-1、B7-H3水平,提高患者认知功能与生活能力。

环状人网状蛋白4调节miR-582-5p/神经纤毛蛋白1轴对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨环状人网状蛋白4(CircRTN4)调节miR-582-5p/神经纤毛蛋白1(NRP1)轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法选取2019年1月至2023年1月河南科技大学第一附属医院收治的CRC患者50例,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹法分别检测患者的癌组织、癌旁组织、人正常结肠黏膜上皮细胞和CRC细胞中CircRTN4、miR-582-5p mRNA及NRP1的蛋白表达;将SW480细胞分别转染si-RTN4、miR-582-5p inhibitor及相应对照,qRT-PCR检测转染效率;通过平板克隆实验、Transwell小室和流式细胞仪等研究CircRTN4对CRC细胞的影响;蛋白质免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及NRP1蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-582-5p与RTN4和NRP1的作用;构建肺癌裸鼠模型,分析敲低RTN4对肿瘤质量、体积及移植瘤中miR-582-5p、NRP1、Ki-67蛋白表达的影响。结果在CRC组织和细胞系中,RTN4、NRP1表达升高,miR-582-5p表达降低(P<0.05);敲低RTN4,降低SW480细胞迁移、增殖与侵袭,下调PCNA、Bcl-2、MMP-2、NRP1表达,促进miR-582-5p、Bax表达及细胞凋亡(P<0.05);miR-582-5p作为RTN4靶点,下调miR-582-5p可减弱RTN4敲低对SW480细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05);体内实验显示,抑制RTN4可降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、NRP1表达水平,升高miR-582-5p表达(P<0.05)。结论在CRC组织和细胞系中,CircRTN4高表达,敲低CircRTN4可能通过调节miR-582-5p/NRP1轴抑制CRC细胞的恶性行为。

血清NRP-1、PDGF与子宫内膜异位症患者体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性

目的研究子宫内膜异位症患者血清神经纤毛蛋白-1(NRP-1)、血小板衍生生长因子(PDGF)水平与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的相关性。方法回顾性分析2017年6月至2019年10月廊坊市人民医院收治的接受IVF-ET治疗的子宫内膜异位症患者89例作为观察组,根据对患者随访结果,分为妊娠结局良好组(n=53),妊娠结局不良组(n=36)。另选择在廊坊市人民医院体检健康女性82名为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清NRP-1、PDGF水平。Pearson法对分析妊娠结局不良患者血清NRP-1、PDGF、雌二醇、促黄体生成素(LH)、基础卵泡刺激素(FSH)的相关性。利用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清NRP-1、PDGF水平预测子宫内膜异位症患者IVF-ET妊娠结局的价值。结果观察组的血清NRP-1、PDGF水平分别为(27.81±6.47)μg/L、(31.83±7.58)ng/mL,均高于对照组[(18.06±3.91)μg/L、(21.61±4.62)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。妊娠结局不良组的基础FSH、基础雌二醇、基础LH水平分别为(8.83±1.46)mIU/mL、(85.67±17.09)pg/mL、(8.32±1.35)mIU/mL,均高于妊娠结局良好组[(4.63±0.91)mIU/mL、(50.12±11.31)pg/mL、(3.66±0.91)mIU/mL],血清NRP-1、PDGF水平分别为(22.72±5.28)μg/L、(24.98±5.95)ng/mL,均低于妊娠结局良好组[(31.27±7.27)μg/L、(36.49±8.68)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组血清NRP-1与PDGF表达水平呈正相关(P<0.05);妊娠结局不良患者血清NRP-1、PDGF水平均与基础FSH水平、基础雌二醇水平、基础LH水平均呈负相关(P<0.05)。ROC分析显示,NRP-1联合PDGF预测子宫内膜异位症患者患者IVF-ET妊娠结局的AUC为0.942,其敏感度、特异度分别为80.60%、96.20%。结论妊娠结局良好的子宫内膜异位症患者血清NRP-1和PDGF呈高表达,二者与IVF-ET妊娠结局密切相关,NRP-1和PDGF对子宫内膜异位症患者IVF-ET妊娠结局有一定预测价值。

基于CiteSpace的神经纤毛蛋白-1研究的可视化分析

目的运用CiteSpace分析神经纤毛蛋白-1(NRP1)的研究现状、热点和趋势。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网及Web of Science核心合集数据库从建库至2022年9月NRP1的相关文献,利用CiteSpace对年份、作者、机构及关键词进行可视化分析。结果共纳入中文文献536篇和英文文献2444篇,年发文量呈现波动上升趋势。中文文献发文量最多的作者是颜江华和韩正祥,英文作者是Ruhrberg,Christiana。厦门大学和哈佛大学分别是中英文文献发文量最多的机构。胃癌、血管生成、乳腺癌是中文研究热点,表达、受体、内皮生长因子是英文研究热点。结论NRP1的研究仍处于发展阶段,研究热点和趋势是机制和临床研究。团队间应加强合作,使研究更为系统。

子宫内膜癌组织NRP1、Talin1的表达及其临床意义

目的:探究神经纤毛蛋白-1(NRP1)、踝蛋白1(Talin1)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法:选取2015年1月至2017年1月我院收治的子宫内膜癌患者156例,术中分别取其癌组织和癌旁组织。采用免疫组织化学法检测组织中NRP1、Talin1的表达,分析NRP1、Talin1表达与临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法分析NRP1、Talin1表达与预后的关系,多因素Cox回归分析影响子宫内膜癌患者预后的危险因素。结果:癌组织中NRP1阳性率高于癌旁组织,Talin1阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。组织分化程度低、临床分期Ⅲ期的子宫内膜癌患者NRP1阳性率升高,Talin1阳性率降低(P<0.05);NRP1阳性者生存率低于阴性者(P<0.05);Talin1阴性者生存率低于阳性者(P<0.05)。Cox回归分析显示,NRP1高表达、Talin1低表达、低分化程度、临床分期Ⅲ期是影响子宫内膜癌预后的危险因素(P<0.05)。结论:子宫内膜癌患者癌组织中NRP1表达上调、Talin1表达下调,均与组织分化程度、临床分期以及预后密切相关。

上皮性卵巢癌患者血清外泌体miR-200c与组织NRP1表达、辅助化疗反应及预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者血清外泌体微小RNA(miR)-200c与组织神经纤毛蛋白1(NRP1)表达、化疗反应及预后的关系。方法:纳入2018年2月至2022年10月期间在本院接受初级减瘤手术和辅助化疗的135例EOC患者,另外纳入30例良性肿瘤患者作为对照。术前3 d采集患者血清样本,提取并纯化血清外泌体,通过实时荧光定量PCR法检测血清外泌体miR-200c表达水平。术中收集135例EOC癌组织、48例癌旁正常组织和30例良性肿瘤组织样本,通过免疫组织化学法评估组织NRP1蛋白表达。118例患者术后完成至少6个疗程的标准化疗方案,化疗完成后>6个月无复发视为化疗敏感。化疗耐药定义为原发性化疗难治性患者或化疗完成后≤6个月复发。结果:EOC组织中NRP1蛋白阳性表达率高于癌旁正常卵巢组织和良性肿瘤组织(P<0.001)。与良性肿瘤患者相比,EOC患者血清外泌体miR-200c表达水平显著降低(P<0.001)。血清外泌体miR-200c水平可良好地区分EOC患者和良性肿瘤患者,ROC曲线下面积(AUC)为0.955(95%CI 0.921~0.989)。EOC患者血清外泌体miR-200c水平与组织NRP1表达呈负相关(P<0.001)。血清外泌体miR-200c表达水平在化疗耐药组患者中更低(P<0.001),其预测EOC患者化疗反应的AUC为0.846(95%CI 0.769~0.924)。Cox回归和Kaplan-Meier预后分析显示,血清外泌体miR-200c低表达是导致EOC患者更短总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的独立危险因素(P<0.05)。结论:血清外泌体miR-200c低表达与组织NRP1高表达、化疗耐药及预后不良有关,有希望作为术前预测EOC化疗反应和预后的生物标志物。

基于FAK/ERK途径探讨NRP-1对结直肠癌细胞的影响

目的探究神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞行为的作用,及其对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)/胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)信号途径的影响。方法将CRC细胞系DLD-1随机分为对照组、CT-707组、sh-NRP-1组、sh-NRP-1+CT-707组,按分组使用sh-NRP-1慢病毒液感染细胞与FAK抑制剂CT-707处理细胞,通过荧光显微镜观察感染慢病毒后细胞内增强型绿色荧光蛋白表达情况,实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞内NRP-1mRNA与蛋白的表达变化。CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖能力,细胞划痕实验观察细胞划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭,Western blot法测定细胞内FAK/ERK相关蛋白表达情况。结果感染sh-NRP-1重组慢病毒的DLD-1细胞中可见明显绿色荧光,细胞内NRP-1mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),表明转染成功。与对照组比较,CT-707组和sh-NRP-1组的细胞增殖活性显著下降,EdU阳性百分比显著降低,细胞划痕愈合率显著降低,细胞迁移数目与侵袭数目均显著减少,FAK蛋白磷酸化水平和ERK蛋白磷酸化水平均显著下调(P<0.05);与sh-NRP-1组比较,sh-NRP-1+CT-707组细胞增殖活性显著下降,EdU阳性百分比和细胞划痕愈合率均显著降低,细胞迁移数目与侵袭数目也均显著减少,FAK蛋白磷酸化水平和ERK蛋白磷酸化水平均显著下调(P<0.05)。结论下调NRP-1表达能够发挥抑制CRC细胞增殖、迁移及侵袭的作用,该机制可能与调控FAK/ERK信号转导途径有关。

大肠癌组织中NRP-2、NRP-1的表达及其与肿瘤淋巴结转移的相关性研究

目的检测大肠癌组织中NRP-2、NRP-1的表达情况,探讨NRP-2、NRP-1的表达与大肠癌淋巴结转移的关系,以期揭示NRP-2与NRP-1在大肠癌发生和发展过程中的作用。方法采用免疫组化法检测55例大肠癌患者大肠癌组织、癌旁组织中NRP-2、NRP-1的表达情况,并分析NRP-2、NRP-1的表达与大肠癌淋巴结转移的相关性。结果 (1)大肠癌组织中NRP-2的阳性表达率为81.8%,癌旁组织中的阳性表达率为14.5%,差异有统计学意义(χ2=58.49,P<0.01);大肠癌组织中NRP-2高表达组的淋巴结转移阳性例数显著多于NRP-2低表达组(χ2=10.69,P<0.01)。(2)大肠癌组织中NRP-1的阳性表达率为70.9%,癌旁组织中的阳性表达率为25.5%,差异有统计学意义(χ2=22.76,P<0.01);大肠癌组织中NRP-1高表达组的淋巴结转移阳性例数显著多于NRP-1低表达组(χ2=7.73,P<0.01)。(3)大肠癌组织中NRP-2、NRP-1均为高表达的患者淋巴结转移率显著高于均为低表达者(χ2=10.76,P<0.01)。结论 NRP-2、NRP-1的表达可能与大肠癌的发生和发展密切相关,并且可能有协同作用。

NRP-1在胃癌组织及细胞系中的表达及临床意义

目的研究神经纤毛蛋白1(NRP-1)在胃癌组织的表达,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理因素的关系及可能的临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测180例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织标本NRP-1表达,用免疫印迹方法检测胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞NRP-1表达,K-M生存曲线和多因素回归模型用于分析胃癌预后。结果胃癌组织中NRP-1表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001),胃癌组织中NRP-1高表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、AJCC分期、T分期呈正相关(P<0.05)。多因素生存分析表明高表达NRP-1是胃癌患者总生存期的独立预后因子。结论过表达NRP-1可能在胃癌进展中发挥着重要作用,过表达NRP-1可作为生物标志物预测胃癌患者的不良预后。

沉默NRP-1基因对人T细胞白血病Jurkat细胞株增殖与凋亡的影响

目的:探讨RNAi沉默NRP-1基因对人T细胞白血病细胞株增殖与凋亡的影响。方法:将我们前期构建好的p LB-NRP-1/shRNA重组慢病毒质粒,感染至Jurkat细胞中,用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况及化疗药物表柔比星(EPI)处理后细胞增殖情况;用AV/PI法结合流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期。结果:细胞增殖结果:在48、72、96 h时间点NRP-1/shRNA干扰组的OD值均低于相应对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05);细胞凋亡率结果:与对照组比较,NRP-1/shRNA干扰组细胞的凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);对化疗药物表柔比星(EPI)敏感性检测结果:EPI浓度为0.025、0.05、0.1、0.2、0.4μg/ml时,NRP-1/shRNA干扰组的细胞生长抑制率较相应对照组高,差异皆有统计学意义(P<0.05),并且选择IC50进行EPI诱导后,NRP-1/shRNA干扰组的细胞凋亡率明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);WB结果显示:与对照组相比,NRP-1/shRNA干扰组Bcl-2蛋白的表达水平明显下降,Bax的表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);细胞周期结果:与对照组比较,NRP-1/shRNA干扰组G0/G1期细胞的比例增高,S期细胞的比例明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:RNAi沉默NRP-1基因可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡,提高对化疗药物的敏感性,其机制可能涉及Bcl-2/Bax途径的调节;并可将细胞周期阻滞在G0/G1期,降低细胞的增殖水平,诱导细胞进入凋亡期。

胃癌中VEGF、NRP1和干细胞标志物CD44的表达及相关性

目的探讨VEGF、NRP1和干细胞标志物CD44在胃癌组织中的表达及三者间的相关性。方法应用高通量组织芯片技术和免疫组化SP法检测72例胃癌和52例正常胃组织中VEGF、NRP1和CD44蛋白的表达,并分析三者之间的相关性以及与胃癌临床病理特征的关系。结果 (1)胃癌组织中VEGF、NRP1和CD44蛋白阳性率分别为76.4%、66.7%、83.3%,三者在胃癌组织中的表达显著高于正常胃组织,差异均具有统计学意义(P均<0.01)。(2)VEGF、NRP1蛋白表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05);CD44表达与Lauren分型、分化程度、淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05)。(3)胃癌组织中VEGF、NRP1和CD44蛋白的表达均呈正相关(rs=0.578,rs=0.278,rs=0.316,P均<0.05)。结论 VEGF、NRP1和干细胞标志物CD44在胃癌中均呈高表达,且与胃癌的恶性生物学行为密切相关。VEGF与NRP1之间可能存在协同作用,二者均与干细胞标志物CD44的表达密切相关,其具体机制有待进一步研究。

大肠癌组织中Neuropilin-1的表达及其与肿瘤血管生成的相关性研究

目的:检测大肠癌组织中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)mRNA的表达情况及微血管密度(MVD)值,探讨NRP-1mRNA的表达与MVD间的相关性,以期了解NRP-1与肿瘤血管生成的关系。方法:取45例大肠癌组织及相应正常大肠组织,采用半定量RT-PCR方法检测其NRP-1mRNA的表达情况,采用免疫组化染色法检测CD105标记的新生肿瘤血管,计数MVD值。结果:45例大肠癌组织中39例可见NRP-1mRNA的表达,阳性率为87.0%;相应正常大肠组织仅3例表达,阳性率为6.7%。大肠癌组织中NRP-1mRNA的表达程度与肿瘤的大小、浸润的深度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与肿瘤部位、组织学类型、分化程度、患者的性别及年龄无关(P>0.05)。大肠癌组织中NRP-1mRNA的表达程度随MVD值的增加而升高(r=0.38,P=0.01)。结论:NRP-1可能与大肠癌的肿瘤血管生成相关,NRP-1mRNA高表达代表着大肠癌不良的生物学行为趋向。

Nrp1、Nrp2及SEMA3F在口腔癌组织及TCa、ACC细胞系中的表达及其可能的作用

目的研究SEMA3F及其受体Nrp1和Nrp2在口腔癌组织和细胞(ACC2,ACCM和TCa)中的表达情况,并推测其在口腔癌生成中的可能意义。方法应用RT-PCR和Western bloting以及免疫组化法检测SEMA3F、Nrp1及Nrp2在口腔癌(ACC2,ACCMand TCa)组织和细胞中的表达情况。结果在所有口腔癌组织和癌细胞中均可检测到Nrp1和Nrp2的表达,但Nrp2相对表达较弱。Western bolting、RT-PCR提示Nrp1呈高表达,Nrp2及SEMA3F均表达较低。在免疫组织化学中显示癌及癌周组织中Nrp1均呈高表达,且癌巢中的表达明显高于癌间隙组织,Nrp2及SEMA3F呈较弱表达。结论提示在肿瘤的发展进程中,Nrp1可能对肿瘤本身的发生,增殖及肿瘤的血管生成均可能起到了重要的作用。

siRNA靶向NRP-1基因沉默经Wnt、ROS及TGF-β1途径抑制宫颈癌细胞增殖

目的:探讨RNA干扰神经纤毛蛋白1(NRP-1)基因对宫颈癌细胞凋亡、ROS水平及免疫分子表达的影响。方法:以人正常宫颈细胞Ect1/E6E7为对照细胞,Western blot检测宫颈癌Hela、Ca Ski、Si Ha、HCC94细胞NRP-1的蛋白表达;通过Lipofectamine^(TM)2000将NRP-1-siRNA瞬时转染Ca Ski细胞,并设置阴性对照组(NC-siRNA)和空白对照组(Control组),转染48 h后,CCK8法检测各组细胞活力;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及ROS含量; Western blot检测免疫抑制因子TGF-β1及Wnt信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin、Survivin和Cyclin D1的蛋白表达。结果:宫颈癌细胞中NRP-1的表达均显著高于在Ect1/E6E7细胞中的表达(P<0. 05);转染NRP-1-siRNA的Ca Ski细胞NRP-1的蛋白表达显著低于对照组(P<0. 05);与对照组比较,NRP-1-siRNA组细胞活力显著降低,细胞凋亡率及ROS含量均显著升高,TGF-β1、Wnt1、β-catenin、Survivin和Cyclin D1的蛋白表达均显著降低(P<0. 05)。结论:抑制宫颈癌中NRP-1基因表达可降低癌细胞活力,诱导细胞凋亡,降低免疫抑制分子TGF-β1表达,其机制与提高细胞ROS水平和下调Wnt信号通路有关。

胃癌组织中NRP-1的表达与临床病理特征及预后的相关性

目的检测胃癌组织中神经纤毛蛋白-1(NRP-1)的表达,分析其与胃癌临床病理特征之间的关系,探讨其对判断胃癌预后的价值。方法回顾性分析168例胃癌患者的临床病理资料及预后情况,采用免疫组化法检测癌组织及相对正常组织NRP-1的表达,研究NRP-1的表达与临床病理及预后之间的关系。结果(1)NRP-1在胃癌组织中表达高于相对正常组织(66.7%vs.8.33%,P<0.05)。(2)NRP-1的表达与肿瘤大小、细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。(3)NRP-1高表达的患者的生存期短于低表达的患者(中位生存期28个月vs.64个月,P<0.05)。(4)COX比例风险模型进行多因素分析表明,NRP-1的表达为影响胃癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 (1)NRP-1在胃癌的发生、发展中起到重要作用,与胃癌的恶性生物学行为密切相关。(2)NRP-1高表达提示预后不良。(3)NRP-1有望作为判断胃癌生物学行为和预后的参考指标。

NRP1表达与晚期非小细胞肺癌一线含铂方案化疗敏感性及预后的相关性分析

背景与目的：神经菌毛素-1（neuropilin-1,NRP1）作为血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）受体,在肿瘤新生血管形成和肿瘤细胞迁移中发挥重要作用。本研究目的是探索NRP1表达与晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）含铂一线化疗敏感性及预后的相关性。方法：应用免疫组织化学法检测104例一线应用含铂双药方案化疗的晚期NSCLC肿瘤组织中NRP1表达,采用χ^2检验及Logistic回归模型分析NRP1表达与化疗反应率的关系。采用Kaplan-Meier和Cox比例风险回归模型分析NRP1表达对生存期的影响。结果：在104例患者中,56例（53.8%）出现NRP1高表达。NRP1高表达与年龄、性别、组织类型、分化程度、行为状态和化疗方案等临床病理因素无关。NRP1低表达患者的化疗反应率高于高表达患者（43.8%vs 23.2%,P=0.026）。Logistic多因素分析结果显示,NRP1表达为化疗反应率的独立预测因素（OR=3.103,95%CI：1.320-7.290,P=0.009）,NRP1低表达患者较高表达患者具有更长的无进展生存期（4.6个月vs 3.0个月,χ^2=11.273,P=0.001）和总生存期（11.5个月vs 9.2个月,χ^2=14.392,P=0.000）,NRP1高表达是晚期NSCLC化疗反应率及总生存期的独立预测因素。结论：NRP1高表达与晚期NSCLC一线含铂联合化疗反应率和生存期相关,NRP1表达可能是预测晚期NSCLC化疗敏感性和预后的生物标志物。

NRP-1对喉癌Hep-2细胞增殖侵袭及体外癌细胞促血管形成的影响

目的:探讨NRP-1对喉癌Hep-2细胞株的增殖迁移、侵袭及体外血管形成的功能的影响,为研究NRP-1在喉癌发生发展过程中的作用提供依据。方法:用MTT法、细胞运动实验、细胞侵袭实验及体外血管生成实验分别检测NRP-1抗体组及对照组Hep-2细胞株增殖、粘附迁移、侵袭能力及体外促血管形成的能力并进行比较。结果:NRP-1抗体干预组Hep-2细胞增殖抑制率随NRP-1抗体浓度的增加而升高(r=0.624,P<0.01)。NRP-1抗体处理48h后细胞迁移能力减弱、细胞粘附能力明显减弱、侵袭力明显下降,均与对照组差异有显著性(P<0.01),在体外基质胶上诱导血管细胞形成的管腔也明显减少(P<0.01)。结论:NRP-1抗体有效抑制了喉癌Hep-2细胞株的增殖、粘附、迁移、侵袭能力及癌细胞促体外血管形成的能力,证实NRP-1不仅在肿瘤血管生成中起到重要作用,其对癌细胞自身增殖及迁移也有显著影响,提示NRP-1在喉癌发生发展过程中起到重要作用,拮抗NRP-1可能成为肿瘤治疗新途径。

Nrp1^＋T细胞对淋巴细胞增殖的调节作用以及对同种异体移植物的影响

目的探讨表达神经纤毛蛋白质1(Nrp1)的T细胞(Nrp+T细胞)对体内外反应性淋巴细胞增殖的调节作用以及对同种异体移植物的影响。方法采用流式细胞术分选近交系C57BL/6j小鼠脾脏中的Nrp1+T细胞作为调节细胞,在刀豆蛋白A(Co-nA)的刺激下与标记了羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)的C57BL/6j小鼠脾脏单个核细胞等比例共培养5d,对比观察反应细胞的增殖情况。采用流式细胞术分选C57BL/6j小鼠脾脏的Nrp1+T细胞、CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞各1×106个,分别经尾静脉注入到以Balb/C小鼠作为供者,以C57BL/6j小鼠作为受者行皮肤移植的小鼠体内,另外建立供、受体均为C57BL/6j小鼠的同品系对照组(注入等体积的RPMI1640培养基)。对比观察各组移植皮肤的存活情况。结果加入Nrp1+T细胞的实验组增殖指数为50.92%±2.30%,明显低于未加入调节性T细胞的对照组(90.31%±1.83%,P=0.0169)。实验组移植皮肤存活时间注入Nrp1+T细胞者为20.66±1.11d,注入Nrp1-T细胞者为13.20±0.76d,注入CD4+CD25+Treg者为17.67±1.0d,均明显高于对照组(9.70±1.23d,P<0.01)。结论Nrp1作为一种新型的T细胞表面分子,在淋巴细胞增殖体系中起着重要作用;与注入CD4+CD25+Treg相比,注入Nrp1+T细胞可明显延长小鼠移植皮肤的存活时间。

Neuropilin-1 mRNA在不同动情周期及周龄阶段小鼠卵巢中的表达

目的:探讨Neuropilin-1(NRP-1)mRNA在繁殖适龄期小鼠动情周期间以及不同周龄阶段小鼠卵巢中的表达。方法:选用繁殖适龄期不同动情周期小鼠以及不同周龄阶段小鼠,通过实时定量聚合酶链反应检测其卵巢中NRP-1 mRNA的表达。结果:NRP-1在小鼠不同动情周期卵巢中的表达在mRNA水平差异无显著性(P>0.05)。比较其mRNA在不同周龄阶段小鼠卵巢的中表达显示,近绝育期32周组表达水平显著高于其他组:为3周组的2.94倍(P<0.01),6周组的4.92倍(P<0.01),11周组的2.29倍(P<0.01)。而其他各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NRP-1 mRNA在小鼠卵巢中的表达不随动情周期而改变,且随着卵巢生理功能的下降而显著升高,提示NRP-1与卵巢衰老进程有关。