NewLeaf-Y^(TM)转基因马铃薯PCR检测鉴定方法的建立

建立了商业化种植的NewLeaf-YTM转基因马铃薯的筛选检测和鉴定的PCR方法。该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225bp片段和PVY-cp基因161bp片段。PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5min。本实验中的F-primer(PVY01-5')/R-primer(PVY01-3')引物是针对商业化种植的NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计的,具有很强的特异性,可以达到对NewLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定的目的。