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Biological Characterization and Whole Genome Sequencing of a Genotype VII Newcastle Disease Virus Strain
1
作者 Sun Hualu Li Xiqing +5 位作者 Bi Yunying Yu Zekun Li Sifei Liu Yang Li Mingyi Cui Xianlan 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2018年第5期300-305,310,共7页
[Objective] The aim of this paper was to study the genotype, pathogenicity and nucleotide difference between Newcastle disease virus(NDV) isolates and traditional NDV vaccine strain(La Sota). [Method] A suspected NDV ... [Objective] The aim of this paper was to study the genotype, pathogenicity and nucleotide difference between Newcastle disease virus(NDV) isolates and traditional NDV vaccine strain(La Sota). [Method] A suspected NDV strain was isolated from a chicken farm. The isolate was preliminarily determined by HA and HI tests. A pair of primers was designed based on the partial sequence of NDV F gene published in GenBank(accession No. JF950510.1). F gene was amplified by RT-PCR, cloned and sequenced. The sequencing result was compared with the F gene sequences published in GenBank, and the phylogenetic tree was constructed to analyze the genotypes. The pathogenicity of the virus was determined by mean death time(MDT) of chicken embryos, intracerebral pathogenicity index(ICPI) of one-day-old chicks and intravenous pathogenicity index(IVPI) of six-week-old chickens, respectively. Based on the NDV genome sequence published in GenBank(accession No. JF950510.1), nine pairs of primers were designed to amplify the genome sequence of the isolate, and its structure was analyzed. [Result] The length of F gene was about 500 bp, and a NDV strain of genotype VII was isolated. The MDT, ICPI and IVPI were 52.8 h, 1.675 and 2.46, respectively, indicating the isolate was a virulent strain. The whole genome sequence analysis results showed that the full genome length of the isolate was 15 192 bp, which had 6 more nu-cleotides than that of La Sota strain, and the homology between the two strains was 82.8%. [Conclusion] A virulent NDV strain of genotype Ⅶ was isolated, with low homology to La Sota strain in nucleotide sequence. 展开更多
关键词 Newcastle disease virus(ndv) F gene virulent strain Whole genome
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Rescue and Preliminary Application of a Recombinant Newcastle Disease Virus Expressing Green Fluorescent Protein Gene
2
作者 Shun-lin HU Qin SUN Qu-zhi WANG Yu-liang LIU Yan-tao WU Xiu-fan LIU 《中国病毒学》 CSCD 2007年第1期34-40,共7页
把 ZJI 紧张基于纽卡斯尔疾病病毒(NDV ) 的完全的染色体顺序,七份教材被设计为构造 plasmid pNDV/ZJI 放大 cDNA 碎片,它包含了 NDV ZJI 紧张的全身的 cDNA。与三助手 plasmids, pCIneoNP, pCIneoP 和 pCIneoL, pNDV/ZJI 当时是... 把 ZJI 紧张基于纽卡斯尔疾病病毒(NDV ) 的完全的染色体顺序,七份教材被设计为构造 plasmid pNDV/ZJI 放大 cDNA 碎片,它包含了 NDV ZJI 紧张的全身的 cDNA。与三助手 plasmids, pCIneoNP, pCIneoP 和 pCIneoL, pNDV/ZJI 当时是进表示 T7 RNA 聚合酶的 BSR-T7/5 房间的 cotransfected。在进受胎的鸡肉的 transfected 房间文化上层清液的接种以后,从 specific-pathogen-free (SPF ) 的鸡蛋结队,传染 NDV ZJI 紧张成功地被救。格林荧光灯蛋白质(GFP ) 基因被放大并且插入了到 NDV 全身的 cDNA 产生标注 GFP 的 recombinant plasmid pNDV/ZJIGFP。在进 BSR-T7/5 房间的结果的 plasmid 和三支持 plasmids 的 cotransfection 以后, recombinant NDV, NDV/ZJIGFP,被救。特定的绿荧光在 BSR-T7/5 和鸡胚胎成纤维细胞(CEF ) 房间 48h 被观察感染以后,显示 GFP 基因被表示在一相对高级。NDV/ZJIGFP 被 oculonasal 线路接种进 10-day-old SPF 鸡。四天感染以后的、强壮的绿荧光能在肾和 tracheae 被检测,显示标注 GFP 的 NDV 能是的 recombinant 为 NDV 传播和致病的分析的一个很有用的工具。关键词纽卡斯尔疾病病毒(NDV )- 格林荧光灯蛋白质(GFP )- 营救 - 表示 CLC 数字 S831.7 基础条款:给中国(No.30630048 ) 展开更多
关键词 Newcastle disease virus (ndv) Green fluorescent protein (GFP) RESCUE Expression
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Multiple RT-PCR Detection of H5,H7,and H9 Subtype Avian Influenza Viruses and Newcastle Disease Virus
3
作者 Feng Fei 《Veterinary Science Research》 2019年第2期41-45,共5页
Objective:This paper focuses on the multiple detection RT-PCR technology of H5,H7,AND H9 subtype avian influenza viruses and Newcastle disease virus,and points out the specific detection methods and detection procedur... Objective:This paper focuses on the multiple detection RT-PCR technology of H5,H7,AND H9 subtype avian influenza viruses and Newcastle disease virus,and points out the specific detection methods and detection procedures of avian influenza and Newcastle disease virus.Methods:The genes of Newcastle disease virus carrying out the HA gene sequence of H5,H7 and H9 subtype AIV in GenBank were used to establish a strategy for simultaneous detection of three subtypes of avian influenza virus and Newcastle disease virus.Results:The results showed that the program can detect and distinguish H5,H7 and H9 subtype avian influenza viruses and Newcastle disease virus at one time.Conclusion:Multiple RT-PCR detection method has high detection sensitivity and can detect and determine different subtypes of avian influenza virus and Newcastle disease virus quickly and accurately,therefore,it has a crucial role in the detection and control of avian influenza H5,H7 and H9 subtypes and Newcastle disease. 展开更多
关键词 H5 H7 and H9 subtype avian influenza viruses Newcastle disease virus(ndv) RT-PCR
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鸡胚免疫新城疫疫苗后宿主法氏囊转录组学分析
4
作者 蒋立人 冯贺龙 +9 位作者 姜鑫瑞 王梓晨 张高峰 商雨 曾哲 姚伦 汪宏才 罗青平 田光明 温国元 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1632-1641,共10页
【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组... 【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组和对照组,30枚/组,免疫组将NDV TS09-C株通过羊膜腔接种鸡胚,剂量为103.0 EID 50/枚,注射体积为0.1 mL,对照组以同样的方法接种等体积PBS。检测免疫后不同时间点肺脏、胸腺、脾脏和法氏囊组织的病毒载量。选取病毒载量最高的法氏囊组织进行转录组学测序后,筛选免疫相关差异表达基因并分析其参与的主要功能及通路。【结果】免疫后1 d法氏囊组织中即可监测到病毒,免疫后3 d病毒载量达到最高。将免疫后3 d的法氏囊进行转录组学分析,与对照组相比,免疫组有453个基因上调、98个基因下调,其中免疫相关基因有36个上调、10个下调。免疫相关差异表达基因主要富集于自噬和细胞因子-细胞因子受体相互作用的免疫相关通路。差异表达基因蛋白互作分析显示,自噬通路中富集的BCL2与其他免疫相关基因有较多互作关系,且在B细胞活化、分化、免疫系统发育等功能注释中均有参与。【结论】本研究结果揭示了鸡胚免疫NDV TS09-C株后法氏囊内调控B细胞活化、分化的潜在靶向基因及通路,为进一步研究该毒株鸡胚免疫后B淋巴细胞调控的分子机制提供新的信息。 展开更多
关键词 新城疫病毒(ndv) TS09-C株 鸡胚免疫 法氏囊 转录组分析
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新城疫病毒(NDV)HN基因真核表达重组质粒的构建 被引量:9
5
作者 仲大莲 余为一 +2 位作者 刘兢 李向明 郭霄峰 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期34-37,共4页
应用一对自行设计的引物 ,通过反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)获得新城疫病毒 (NDV) Lasota株的血凝素神经氨酸酶 (HN)基因片段 ,其长度约为 1 .7kb,与已报道的 NDV-HN基因片段大小一致。再将该 HN基因片段定向插入真核表达质粒 pc DNA3... 应用一对自行设计的引物 ,通过反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)获得新城疫病毒 (NDV) Lasota株的血凝素神经氨酸酶 (HN)基因片段 ,其长度约为 1 .7kb,与已报道的 NDV-HN基因片段大小一致。再将该 HN基因片段定向插入真核表达质粒 pc DNA3中 ,经酶切和测序鉴定 ,表明构建的重组质粒含有 NDV-HN基因片段。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN基因 免疫 真核表达重组质粒 构建 ndv 禽病
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检测NDV诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法建立 被引量:2
6
作者 李梅 李宝全 +4 位作者 宋文刚 郭慧君 王海荣 柴家前 常维山(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期935-938,共4页
目的:建立检测新城疫病毒(NDV)诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法,实时分析NDV免疫鼠的IFN-γ水平。方法:用NDV单克隆抗体包被96孔混纤板,在反应孔中加入小鼠脾淋巴细胞和NDV刺激抗原,37℃,5%CO2培养7小时。裂解细胞,依次加入酶标二... 目的:建立检测新城疫病毒(NDV)诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法,实时分析NDV免疫鼠的IFN-γ水平。方法:用NDV单克隆抗体包被96孔混纤板,在反应孔中加入小鼠脾淋巴细胞和NDV刺激抗原,37℃,5%CO2培养7小时。裂解细胞,依次加入酶标二抗、底物、显色液,倒置显微镜下计数ELISPOT斑点。结果:ELISPOT试验的特异性与培养时间和刺激抗原浓度密切相关。在106/孔的脾淋巴细胞浓度下,培养时间越长、刺激抗原越多,试验的特异性越低;当培养时间为7小时,抗原量为5μg/孔时,试验的特异性最强。ELISPOT斑点数,随细胞浓度的增加而增加,当小鼠的脾淋巴细胞浓度为106/孔时,最有利于斑点的计数,试验误差最小。结论:试验成功建立了检测NDV细胞免疫的ELISPOT方法,可用于NDV细胞免疫的研究。 展开更多
关键词 新城疫病毒(Newcastle disease virus) ELISPOT IFN-Γ检测
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胃癌患者术后NDV-ATV治疗对机体免疫功能的影响 被引量:9
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作者 吴淼 余佩武 +3 位作者 曾冬竹 雷晓 周立新 饶云 《实用癌症杂志》 2003年第2期179-181,共3页
目的 探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗 (NDV -ATV )治疗胃癌术后患者机体免疫功能的影响。方法 采用流式细胞术分析 3 6例胃癌术后 (术后 2、3、4、5周 )NDV -ATV治疗患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化情况 ,并以15例术... 目的 探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗 (NDV -ATV )治疗胃癌术后患者机体免疫功能的影响。方法 采用流式细胞术分析 3 6例胃癌术后 (术后 2、3、4、5周 )NDV -ATV治疗患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化情况 ,并以15例术后未接受NDV -ATV治疗的胃癌患者作对照。结果 对照组术后CD+3 、CD+4、NK细胞所占百分比和CD+4/CD+8逐渐升高 ,以术后 3周内升高最为明显。NDV -ATV治疗组 ,术后CD+3 、CD+4、NK细胞所占百分比和CD+4/CD+8上升速度更快 ,持续时间更长。治疗结束后与治疗前比较 ,有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ;且明显高于未接受NDV -ATV治疗的对照组患者 (P <0 .0 5 )。第 1次治疗后和治疗结束后相比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 NDV -ATV可同时视为 1种免疫调节剂 ,能明显改善胃癌患者术后机体的免疫功能 。 展开更多
关键词 胃癌 术后 免疫功能 ndv-ATV 自体肿瘤疫苗 新城鸡瘟病毒 免疫调节剂 流式细胞术
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RT-PCR对新城疫病毒(NDV)分离株的鉴定及其临床应用 被引量:5
8
作者 温贵兰 瞿继红 李永明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1137-1140,共4页
采用新城疫病毒的通用引物PA+PB、强毒引物PA+PC、弱毒引物PA+PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增。结果15株新城疫毒株均被PA+PB引物扩增出359bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1、P2被PA+PC... 采用新城疫病毒的通用引物PA+PB、强毒引物PA+PC、弱毒引物PA+PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增。结果15株新城疫毒株均被PA+PB引物扩增出359bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1、P2被PA+PC引物扩增出254bp的条带,而PA+PD引物未扩增出DNA条带;ND89、Lasota被PA+PD引物扩增出254bp的条带,而PA+PC引物未扩增出DNA条带。采用3对引物对自然发病斗鸡脑、脾、咽喉试子、泄殖腔试子进行RT-PCR检测,确诊为斗鸡新城疫强毒感染,且与传统病毒分离与毒力鉴定的结果相一致。 展开更多
关键词 新城疫病毒 RT-PCR 斗鸡
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NDV对小鼠H_(22)腹水瘤治疗作用的探讨 被引量:3
9
作者 尹致良 刘晓波 +1 位作者 田伏州 李小军 《西南国防医药》 CAS 1997年第6期325-326,共2页
肿瘤逃避机体免疫排斥的机制之一,是肿瘤细胞存在的肿瘤相关抗原的免疫原性较弱,不足以引起宿主有效的抗肿瘤免疫反应。NDV可以改变或影响瘤细胞的免疫原性,诱发和促进机体对肿瘤的排斥反应。本文探讨了新城疫病毒(new castle disease v... 肿瘤逃避机体免疫排斥的机制之一,是肿瘤细胞存在的肿瘤相关抗原的免疫原性较弱,不足以引起宿主有效的抗肿瘤免疫反应。NDV可以改变或影响瘤细胞的免疫原性,诱发和促进机体对肿瘤的排斥反应。本文探讨了新城疫病毒(new castle disease virus,NDV)对小鼠H_(22)腹水瘤的治疗作用。对照组接种H_(22)瘤细胞后第8d死亡1只,至第16d10只小鼠全部死亡,存活率为0%,平均存活14.1d。实验组注射瘤细胞后第12d死亡2只,至23d死亡9只,1只无瘤存活,存活率为10%。死亡鼠平均存活天数为18d,比对照组延长3.9d,两组相差显著(P<0.05)。实验结果表明NDV对小鼠H_(22)腹水瘤有治疗作用,能抑制小鼠H_(22)腹水瘤的生长,可延长小鼠生存时间。NDV可作治疗肿瘤的一种新生物制剂。 展开更多
关键词 ndv(新城疫病毒) H22腹水瘤 抑制
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NDV CN株对几种人肿瘤细胞的杀伤作用及其机理的分析 被引量:2
10
作者 徐葛林 解付磊 +1 位作者 全家妩 全宁 《中国病毒学》 CSCD 2003年第3期227-231,共5页
本文研究了NDV-CN株对5株不同的人肿瘤细胞的体外杀伤作用。结果表明5株肿瘤细胞对NDV-CN敏感,于感染早期出现细胞收缩变圆,失去贴壁性,感染第5天时细胞存活率低于10%。其中尤以HEP3B细胞最敏感。但NDV-CN株对人二倍体细胞2BS有弱杀伤... 本文研究了NDV-CN株对5株不同的人肿瘤细胞的体外杀伤作用。结果表明5株肿瘤细胞对NDV-CN敏感,于感染早期出现细胞收缩变圆,失去贴壁性,感染第5天时细胞存活率低于10%。其中尤以HEP3B细胞最敏感。但NDV-CN株对人二倍体细胞2BS有弱杀伤性。病毒感染早期可检测到感染细胞中有病毒核酸的复制、感染细胞表面有病毒蛋白的表达,胞浆内有病毒粒子存在。NDV-CN株主要诱导HEP3B及T24细胞产生凋亡,主要诱导Hep2、Hela及A549细胞产生坏死。 展开更多
关键词 ndv CN株 肿瘤细胞 杀伤作用 杀伤机理 新城疫病毒
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Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004株微型基因组的构建及其功能鉴定 被引量:1
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作者 陈云霞 管峰 +4 位作者 赵云玲 郑东霞 张维 刘华雷 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2011年第9期27-31,共5页
目的本研究旨在构建Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的微型基因组和辅助质粒,为构建病毒拯救体系奠定基础。方法根据Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的全基因组序列,采用SOE方法将增强绿色荧光蛋白基因(eGFP)插入NDV08-004的3’-Leader和5’-Trailer... 目的本研究旨在构建Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的微型基因组和辅助质粒,为构建病毒拯救体系奠定基础。方法根据Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的全基因组序列,采用SOE方法将增强绿色荧光蛋白基因(eGFP)插入NDV08-004的3’-Leader和5’-Trailer区域之间后反向插入转录载体pOLTV5中,构建了NDV08-004的微型基因组pLGT-03。将pLGT-03转染辅助病毒NDV08-004感染的表达T7RNA聚合酶BSRT7/5细胞进行功能鉴定。采用RT-PCR将NDV08-004的NP、P和L蛋白基因亚克隆入表达载体pCI-neo中,分别构建了三个辅助质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L。通过构建的微型基因组pLGT-03和三个辅助质粒按照一定的比例共转染BSRT7/5细胞来验证辅助质粒的功能。结果微型基因组pLGT-03转染辅助病毒感染的BSRT7/5细胞后可见明显荧光,表明微型基因组构建成功。微型基因组和辅助质粒共转染可见荧光表达,表明三个辅助质粒均具有相应的功能。结论表明微型基因组和辅助质粒均具有相应的功能,为建立NDV08-004的反向遗传操作平台奠定了基础。 展开更多
关键词 Ⅰ类新城疫病毒 辅助性质粒 微型基因组 病毒拯救
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NDV-ATV联合化疗对消化道肿瘤患者免疫功能的影响 被引量:2
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作者 巩平 李永祥 +2 位作者 王仙 陈雪玲 王红英 《农垦医学》 2006年第4期241-243,共3页
目的:探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞疫苗特异性主动免疫(NDV-ATV)联合化疗治疗消化道肿瘤的临床应用价值及对患者免疫功能的影响。方法:消化道肿瘤患者术后36例治疗组给予NDV-ATV及化疗,与单用化疗对照组22例进行比较,对其疗效进... 目的:探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞疫苗特异性主动免疫(NDV-ATV)联合化疗治疗消化道肿瘤的临床应用价值及对患者免疫功能的影响。方法:消化道肿瘤患者术后36例治疗组给予NDV-ATV及化疗,与单用化疗对照组22例进行比较,对其疗效进行判断评价,检测治疗前后外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值变化及NK细胞的活性I、gAI、gMI、gG免疫球蛋白水平。结果:NDV-ATV联合化疗治疗组,患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞和免疫球蛋白水平均较治疗前显著增高(P<0.05),且明显高于未接受NDV-ATV治疗的对照组(P<0.05),而对照组无明显变化(P>0.05)。近期随诊也表明NDV-ATV联合化疗效果明显优于单纯化疗组(p<0.01)。结论:NDV-ATV可以改善消化道肿瘤患者的免疫功能,联合化疗可提高治疗效果。 展开更多
关键词 新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗 消化道肿瘤 免疫功能
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4株不同基因型新城疫病毒毒力测定及与商品疫苗株抗原性比较
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作者 黄青红 华俊 +6 位作者 谢丽基 谢芝勋 曾婷婷 李孟 罗思思 李丹 谢志勤 《动物医学进展》 北大核心 2024年第2期16-21,共6页
为了探究不同基因型和不同来源4株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)及现有商品疫苗株的抗原性差异,测定4株新城疫病毒的鸡胚最小致死量的平均死亡时间(mean death time,MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(intracerebral pathogen... 为了探究不同基因型和不同来源4株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)及现有商品疫苗株的抗原性差异,测定4株新城疫病毒的鸡胚最小致死量的平均死亡时间(mean death time,MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(intracerebral pathogenicity index,ICPI),分别制备油乳苗,再与商品疫苗NDV La Sota株、A-Ⅶ株分别接种SPF鸡,收集单因子血清进行HI交叉试验和细胞交叉中和试验。结果显示,基因Ⅵ型NDV B27为中等毒力毒株,基因Ⅶ型NDV B9、基因Ⅸ型NDV B14、基因Ⅻ型NDV GX01为强毒株;HI交叉试验结果显示,基因Ⅵ型NDV B27和基因Ⅸ型NDV B14抗原同源性为0.64,抗原性差异微小,其他毒株之间的抗原同源性为0.69~0.99,抗原差异不大;细胞交叉中和试验结果显示,基因Ⅵ型NDV B27和基因Ⅸ型NDV B14抗原同源性为0.42,基因Ⅵ型NDV B27和基因Ⅱ型疫苗株La Sota抗原同源性为0.47,抗原差异较大,其余毒株及疫苗株La Sota之间抗原差异微小。试验结果可为后续筛选NDV疫苗候选株提供参考。 展开更多
关键词 新城疫病毒 基因型 抗原性 致病指数
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真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染
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作者 刘兆球 姜世金 常维山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期444-446,共3页
通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将... 通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。 展开更多
关键词 真核重组表达质粒 新城疫病毒F基因 转染
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鸡源NDV WF00C株F基因的测序与蛋白特性分析
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作者 胡元庆 路振香 +2 位作者 张训海 金光明 陈会良 《安徽科技学院学报》 2009年第1期9-14,共6页
用鸡源新城疫病毒凤阳分离株WF00C对9-10日龄SPF鸡胚的尿囊腔接种,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF00C病毒的F基因,获得了1条1.7kb的特异性条带。用PCR产物直接测序。测序结果表明,扩增片段大小为1782bp,含有1个1662bp的... 用鸡源新城疫病毒凤阳分离株WF00C对9-10日龄SPF鸡胚的尿囊腔接种,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF00C病毒的F基因,获得了1条1.7kb的特异性条带。用PCR产物直接测序。测序结果表明,扩增片段大小为1782bp,含有1个1662bp的开放性阅读框,编码554个氨基酸。核苷酸同源性分析表明:WF00C株与国内外其他NDV F基因的同源性为84.8%-97.5%,其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为87.1%,说明WF00C与国内外的传统毒株有较大变异。与Taiwan95株和J株的同源性为94.1%和97.5%,说明WF00C与Taiwan95株和J株亲缘关系较近,具有较高的相似性。F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112Arg-Arg-Gln-Lys-Arg-Phe117,表明为NDV的强毒株。蛋白疏水性和抗原性分析表明与标准强毒株相比没有太大的变异。 展开更多
关键词 鸡源ndv F基因 序列测定 病毒毒力 同源性分析
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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究 被引量:5
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作者 宁晓檬 金卫红 +2 位作者 关智慧 朱秀芝 赵领娣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期136-138,共3页
IBV毒株H120、H52、MA5对NDV-LaSota的干扰实验证明IBV特异性干扰NDV增殖。1)采取不同顺序的同胚接种法:IBV接种之后再接种NDV;或NDV接种之后再接种IBV,及IBV,NDV同时接种,IB... IBV毒株H120、H52、MA5对NDV-LaSota的干扰实验证明IBV特异性干扰NDV增殖。1)采取不同顺序的同胚接种法:IBV接种之后再接种NDV;或NDV接种之后再接种IBV,及IBV,NDV同时接种,IBV均干扰NDV的增殖。2)NDV接种36小时之内,干扰现象最为明显,H120,H52的干扰能力稍强于MA5。3)NDV血清中和实验结果显示,不同顺序同胚接种NDV、IBV时,NDV-LaSota不影响IBV的增殖能力。同胚增殖IBV,NDV的关键是控制NDV、IBV的接毒量及选择合适的收毒时间。 展开更多
关键词 新城疫病毒 干扰作用 IBV ndv
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4株NDV分离株F基因的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 沈志强 管宇 +7 位作者 刘吉山 李峰 吴信明 赵蕾 王艳 徐守振 鲍卫超 王辉暖 《动物医学进展》 CSCD 2005年第4期78-83,共6页
对4 株具有一定代表性的NDV(新城疫病毒)分离株的F基因进行RT PCR(反转录聚合酶链反应)扩增和序列分析,根据基因裂解位点的氨基酸序列推测,其中1 株属于弱毒株,3 株属于强毒株;核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较结果表明,3株强毒株与C... 对4 株具有一定代表性的NDV(新城疫病毒)分离株的F基因进行RT PCR(反转录聚合酶链反应)扩增和序列分析,根据基因裂解位点的氨基酸序列推测,其中1 株属于弱毒株,3 株属于强毒株;核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较结果表明,3株强毒株与Clone30 基因核苷酸序列的同源性在83.6%~84.0%之间,与F48 E9典型NDV强毒株同源性在86.5.6%~88.3%之间,推导的氨基酸序列同源性与Clone 30 株在85.9%~87.0%之间,与F48E9典型NDV强毒株在89.1%~91.3%之间;利用MegAlign软件绘制了NDV 的系统发育进化树,结果表明, 3株分离强毒株为Ⅶ基因型,弱毒株为基因Ⅱ型。 展开更多
关键词 序列分析 ndv F基因 分离株 反转录-聚合酶链反应 系统发育进化树 核苷酸序列 克隆 RT-PCR 新城疫病毒 氨基酸序列 强毒株 序列同源性 裂解位点 序列比较 弱毒株 代表性 基因型 推导
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An improved reverse genetics system for Newcastle disease virus genotype Ⅶ 被引量:1
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作者 Yuzhang Sun Minglun Sun +2 位作者 Yonghan Dai Renfu Yin Zhuang Ding 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期521-524,共4页
Dear Editor, Newcastle disease virus (NDV), also known as avian paramyxovirus serotype 1 (APMV-1), is a member of the genus Avulavirus within the family Paramyxoviridae, or- der Mononegavirales (Miller et al., 2... Dear Editor, Newcastle disease virus (NDV), also known as avian paramyxovirus serotype 1 (APMV-1), is a member of the genus Avulavirus within the family Paramyxoviridae, or- der Mononegavirales (Miller et al., 2010). Although all isolated NDV strains belong to a single serotype, epi- demiological studies have revealed that the genotype VII strain is currently the most prevalent circulating geno- type worldwide and is associated with many of the most recent outbreaks in China since 1997 (Liu et al., 2007). 展开更多
关键词 An improved reverse genetics system for Newcastle disease virus genotype LENGTH ndv FIGURE DNA
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Phylogenetic Analysis of HN Gene of Eight Pigeon NDV Isolates in Guangxi
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作者 Lu Bingxia Liang Jiaxing +10 位作者 Duan Qunpeng Chen Zhongwei Jiang Dongfu Lu Jingzhuan Zhou Yingning Bi Bingfen He Ying Qin Yibin Li Bin Su Qianlian Zhao Wu 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2018年第2期136-138,共3页
[Objective] The paper was to provide a basis for scientific prevention and control of pigeon Newcastle disease(ND).[Method] The HN gene of eight pigeon NDV strains isolated from different pigeon farms in Guangxi wer... [Objective] The paper was to provide a basis for scientific prevention and control of pigeon Newcastle disease(ND).[Method] The HN gene of eight pigeon NDV strains isolated from different pigeon farms in Guangxi were amplified by RT-PCR,sequenced and analyzed.The molecular evolution characteristics of HN gene of pigeon NDV isolates in Guangxi was discussed.[Result] The nucleotide sequence length of HN gene of the eight NDV isolates was 1 716 bp,encoding 571 amino acids.They belonged to virulent group C,and the gene length characteristic of HN gene accorded with virulent strain.Analysis of nucleotide homologies indicated that the eight NDV isolates shared higher homology with genotype VIb,ranging from 90.4% to 99.5%.Phylogenetic tree analysis demonstrated that the genetic relationship between the eight NDV strains in Gangxi and the NDV isolates from Guangxi,Guangdong,Jilin,Liaoning,Yunnan and Heilongjiang during 2011 and 2013 was close.They were located in the same cladogram branch.[Conclusion] We assume that the eight pigeon NDV isolates in Guangxi all belong to the gene class II genotype VI b NDV. 展开更多
关键词 PIGEON Newcastle disease virus (ndv HN gene Phylogenetic analysis
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应用生物素标记的NDV-cDNA探针检测感染尿囊液中NDV-RNA的初步研究
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作者 陈书琨 何云生 +1 位作者 李观娣 钟安清 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 1995年第4期362-368,共7页
本文应用聚合酶链反应(PCR)技术从构建的新城疫病毒(NDV)cDNA文库中扩增含编码F糖蛋白前体──Fo酶切位点序列的359bp的F蛋白基因cDNA片段。将此359bpcDNA片段经光敏生物素标记后,即成NDV-c... 本文应用聚合酶链反应(PCR)技术从构建的新城疫病毒(NDV)cDNA文库中扩增含编码F糖蛋白前体──Fo酶切位点序列的359bp的F蛋白基因cDNA片段。将此359bpcDNA片段经光敏生物素标记后,即成NDV-cDNA探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出NDV强毒株和疫苗毒株的基因组RNA,而不与IBDv-dsRNA、AIBv-ssRNA、EDS76-dsDNA、MDV-dsDNA,FPV-dsRNA及AILV-dsDNA发生交叉杂交反应。试验结果表明:尽管该探钎含有编码Fo蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把NDV的强、弱毒株区分开。这说明NDV强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对NDV来说具有特异性,这就为NDV的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。 展开更多
关键词 新城疫 病毒 聚合酶链反应 探针 斑点杂交
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