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中华大仰蝽转录组学研究及SSR新标记开发 被引量:3
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作者 李敏 张丹丽 +3 位作者 李荣荣 雷廷 宋鲜梅 卜文俊 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期31-43,共13页
【目的】中华大仰蝽Notonecta chinensis为中国和日本冲绳分布的重要水生天敌昆虫,可用于蚊虫的生物防治。本研究旨在建立中华大仰蝽转录组数据库,挖掘其基因信息。【方法】采用高通量测序平台Illumina NextSeq500对中华大仰蝽进行转录... 【目的】中华大仰蝽Notonecta chinensis为中国和日本冲绳分布的重要水生天敌昆虫,可用于蚊虫的生物防治。本研究旨在建立中华大仰蝽转录组数据库,挖掘其基因信息。【方法】采用高通量测序平台Illumina NextSeq500对中华大仰蝽进行转录组测序、de novo组装及生物信息学分析;利用MISA软件基于转录组unigenes数据进行SSR新分子标记筛选。毛细管电泳检测SSR多态性。【结果】总计获得34782282条clean reads(NCBI SRA数据库登录号:SRR13259254),组装成37801条unigenes,N50为913 bp。将unigenes与已知数据库比对进行基因功能注释,分别有36474,32470,27781,35079和5638条序列注释到nr,Swiss-Prot,GO,eggNOG和KEGG数据库。通过GO数据库注释,unigenes的功能可分为生物学过程、细胞组分和分子功能三大类,其中参与细胞、细胞部分及结合功能的unigenes比例较大。eggNOG数据库注释结果显示,37801条unigenes归到25个基因家族,注释到未知功能的最多。KEGG代谢通路富集分析显示,5638条unigenes注释到245个代谢通路,注释到核糖体的数目最多。此外,用MISA软件在转录组测序数据中的37801条unigenes中搜索到3124个SSR位点(占总unigenes的8.26%),发生频率为7.07%。通过PCR筛选出16个SSR位点。7个中华大仰蝽地理种群3个位点NcCF/NcCR,NcKF/NcKR和NcLF/NcLR的多态信息含量(PIC)分别为0.870,0.902和0.857,具高度多态性。【结论】本研究成功获得了中华大仰蝽转录组数据,为其基因功能分析提供了分子理论基础;SSR新标记的开发为中华大仰蝽遗传多样性分析、隐存种鉴定及基因图谱构建提供了更丰富的候选分子标记。 展开更多
关键词 中华大仰蝽 转录组 SSR 基因注释 Illumina nextseq
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Draft genome sequence of a less-known wild Vigna: Beach pea(V. marina cv. ANBp-14-03) 被引量:2
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作者 Awnindra Kumar Singh A.Velmurugan +8 位作者 Debjyoti Sen Gupta Jitendra Kumar Ravi Kesari Aravind Konda Narendra Pratap Singh Sibnarayan Dam Roy Utpal Biswas R.Rahul Kumar Sanjay Singh 《The Crop Journal》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期660-666,共7页
Beach pea or beach cowpea(Vigna marina(Burm.)Merr.)belongs to the family Fabaceae.It is a close relative of cultivated Vigna species such as adzuki bean(V.angularis),cowpea(V.unguiculata),mung bean(V.radiata),and blac... Beach pea or beach cowpea(Vigna marina(Burm.)Merr.)belongs to the family Fabaceae.It is a close relative of cultivated Vigna species such as adzuki bean(V.angularis),cowpea(V.unguiculata),mung bean(V.radiata),and blackgram(V.mungo),and is distributed throughout the tropics.With its ability to tolerate salt stress,beach pea has great potential to contribute salt-tolerance genes for developing salt-tolerant cultivars in cultivated Vigna species.However,it is still underutilized in Vigna breeding programs.A draft genome sequence of beach pea was generated using a high-throughput next-generation sequencing platform,yielding 23.7 Gb of sequence from 79,929,868 filtered reads.A de novo genome assembly containing 68,731 scaffolds gave an N50 length of 10,272 bp and the assembled sequences totaled 365.6 Mb.A total of 35,448 SSRs,including 3574 compound SSRs,were identified and primer pairs for most of these SSRs were designed.Genome analysis identified 50,670 genes with mean coding sequence length 1042 bp.Phylogenetic analysis revealed highest sequence similarity with V.angularis,followed by V.radiata.Comparison with the V.angularis genome revealed 16,699 SNPs and 2253 InDels and comparison with the V.radiata genome revealed 17,538 SNPs and 2300 InDels.To our knowledge this is the first draft genome sequence of beach pea derived from an accession(ANBp-14-03)adapted locally in the Andaman and Nicobar Islands of India.The draft genome sequence may facilitate the genetic enhancement in cultivated Vigna species. 展开更多
关键词 BEACH PEA Vigna MARINA nextseq 500 WHOLE-GENOME sequencing Salinity tolerance
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血流感染样本宏基因组检测平台评估与流程优化研究
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作者 彭鑫 范航 +7 位作者 崔梦楠 林磊 裴广倩 王云飞 左秀娟 方小凤 郭彦 崔玉军 《中国人兽共患病学报》 CAS 2024年第10期928-934,共7页
目的比较MGISEQ-2000、Illumina NextSeq 2000和Ion GeneStudio S5 Plus三种宏基因组测序平台之间的性能差异。同时,针对血流感染样本微生物浓度低的问题,对痕量样本测序流程进行优化。方法采用上述3种测序平台对DNA标准品和模拟样本进... 目的比较MGISEQ-2000、Illumina NextSeq 2000和Ion GeneStudio S5 Plus三种宏基因组测序平台之间的性能差异。同时,针对血流感染样本微生物浓度低的问题,对痕量样本测序流程进行优化。方法采用上述3种测序平台对DNA标准品和模拟样本进行高通量测序,通过分析原始数据质量、对微生物的检出能力等,比较3种平台之间存在的系统差异。同时通过在建库过程中加入外源核酸的方法,优化痕量样本的测序准确性及可靠性。结果在单批次数据量产出、碱基质量方面,MGISEQ-2000高于其它两种平台。在重复reads比例方面,Illumina NextSeq 2000最低,Ion GeneStudio S5 Plus最高,各平台间均有统计学差异(P<0.001)。在测序均一性方面,MGISEQ-2000高于Illumina NextSeq 2000,两者均高于Ion GeneStudio S5 Plus。在微生物检出能力方面,MGISEQ-2000表现出显著优势(P<0.001)。随着菌液浓度降低,差异逐渐减小。在单批次运行时间方面,Ion GeneStudio S5 Plus最短。此外,针对DNA含量≤0.05 ng的痕量样本,实验组(加入外源核酸)比对到的reads数高于对照组(不加外源核酸),倍数为11.09±8.03。结论不同测序平台各有优缺点,实验者可根据不同需求选择合适的测序平台。同时,加入外源核酸,可有效提高微生物的检出效率,为后续结果评估和临床诊断提供更佳支持。 展开更多
关键词 MGISEQ-2000 Illumina nextseq 2000 Ion GeneStudio S5 Plus mNGS 痕量
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