超声心动图参数及外周血T淋巴细胞亚群、NF-κB、CD64水平预测新生儿败血症预后的价值

【目的】探讨超声心动图参数及外周血T淋巴细胞亚群、核因子-κB(NF-κB)、簇分化抗原64(CD64)水平预测新生儿败血症预后的价值。【方法】选取2020年1月至2023年2月本院收治的95例新生儿败血症,根据预后情况将其分为存活组(n=80)和死亡组(n=15)。比较两组患儿超声心动图参数[左室短轴缩短率(FS)、升主动脉内径(AAO)、左室射血分数(LVEF)]、心肌损伤标志物[肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))、NF-κB、CD64水平;采用Logistic多因素回归分析新生儿败血症预后不良的相关影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析心电图指标及实验室指标预测新生儿败血症预后的临床价值。【结果】两组患儿肌酸激酶CK、CK-MB水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组FS、AAO及LVEF高于死亡组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿CD8^(+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组患儿CD3^(+)、CD4^(+)水平高于死亡组,NF-κB、CD64水平低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白(CRP)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组患儿白细胞计数(WBC)低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示:FS、LVEF、CD64是影响新生儿败血症预后的相关因素(P<0.05)。FS、LVEF、CD64联合预测新生儿败血症预后的ROC曲线下面积为0.948,明显高于各指标单独预测的0.827、0.895和0.877(P<0.05)。【结论】FS、LVEF联合CD64检测对新生儿败血症预后有良好的预测价值,临床可通过密切监测上述指标及时判断新生儿败血症预后,采取相关干预措施。

化浊解毒抑溃煎对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2平衡、应激反应及肠黏膜的影响

目的探讨化浊解毒抑溃煎对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2平衡、应激反应及肠黏膜的影响。方法SPF级别Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、化浊解毒抑溃煎低、中、高剂量(1.25、2.5、5 kg·L^(-1))组及阳性药美沙拉嗪(0.05 kg·L^(-1))组,共6组。除对照组外,其余各组大鼠均建立溃疡性结肠炎动物模型,分别灌胃给予相应药物。ELISA法检测TNF-α、IL-8、IL-13、IL-10、IFN-γ及IL-4水平;相关试剂盒检测SOD、MDA及GSH-Px水平;HE染色观察肠道组织病理形态并计算评分;TUNEL法检测肠道上皮细胞凋亡率;免疫印迹检测肠组织NF-B、TLR4、MyD88、Bcl-2及Bax蛋白水平。结果与模型组相比,化浊解毒抑溃煎组TNF-α、IL-8、IL-13、MDA、IFN-γ、病理评分、肠上皮细胞凋亡率、NF-B、TLR4、MyD88及Bax水平降低(P<0.05),IL-10、IL-4、SOD、GSH-Px、Bcl-2水平升高(P<0.05)。结论化浊解毒抑溃煎可明显抑制溃疡性结肠炎大鼠氧化应激及炎症反应,促使Th1/Th2平衡,并发挥肠黏膜保护作用,其作用机制与抑制NF-B/TLR4/MyD88信号通路相关。

固本咳喘颗粒治疗老年慢性阻塞性肺疾病伴下呼吸道细菌感染的临床效果研究

目的探究固本咳喘颗粒治疗老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)伴下呼吸道细菌感染(LRTBI)的临床效果。方法应用随机对照试验设计,选取2022年7月至2023年7月商丘市梁园区中医医院收治的104例老年COPD伴LRTBI患者,采用随机数表法分为观察组和对照组各52例。对照组患者给予常规对症治疗,观察组患者于对照组基础上联合固本咳喘颗粒治疗,两组均治疗2周。比较两组患者的治疗效果以及治疗前后不同时间的痰液病原菌清除率和肺功能指标、TLR4/NF-κB信号通路因子(TLR4、NF-κB蛋白)水平、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、炎性因子,同时比较两组患者治疗期间的不良反应发生率。结果观察组患者的治疗总有效率为94.23%,明显高于对照组的80.77%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗1周、2周后的痰液病原菌清除率分别为65.38%、96.15%,明显高于对照组的44.23%、82.69%,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1周、2周后,观察组患者的用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量(FEV1)、最大呼气流量(PEF)分别为(2.59±0.22)L、(2.27±0.32)L、(3.19±0.46)L/s和(2.68±0.25)L、(2.41±0.34)L、(3.56±0.51)L/s,明显高于对照组的(2.40±0.21)L、(1.96±0.28)L、(2.73±0.48)L/s和(2.47±0.23)L、(2.05±0.31)L、(3.08±0.53)L/s,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1周、2周后,观察组患者的外周血TLR4、NF-κB蛋白水平分别为0.68±0.15、0.66±0.15和0.57±0.12、0.54±0.13,明显低于对照组的0.77±0.17、0.75±0.14和0.69±0.15、0.67±0.14,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1周、2周后,观察组患者的外周血CD3^(+)、CD4^(+)阳性细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)分别为(66.07±3.65)%、(42.55±2.73)%、1.76±0.24和(68.54±3.26)%、(44.21±2.86)%、1.83±0.25,明显高于对照组的(62.54±3.71)%、(40.61±2.81)%、1.60±0.25和(65.17±3.49)%、(41.93±2.79)%、1.69±0.23,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1周、2周后,观察组患者的血清CRP、PCT、IL-17水平分别为(53.70±12.38)mg/L、(0.71±0.18)μg/L、(47.13±8.96)ng/L和(31.69±8.75)mg/L、(0.42±0.13)μg/L、(36.42±7.35)ng/L,明显低于对照组的(65.16±15.07)mg/L、(0.86±0.21)μg/L、(58.25±9.71)ng/L和(40.36±10.42)mg/L、(0.55±0.16)μg/L、(45.89±8.21)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗期间的不良反应总发生率为5.77%,明显低于对照组的19.23%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论固本咳喘颗粒治疗老年COPD伴LRTBI患者的疗效显著,能更有效改善患者肺功能,抑制TLR4/NF-κB信号通路活性,上调T淋巴细胞亚群,且安全性高。

胀果甘草粗多糖及其纯化多糖对树突状细胞成熟和抗肿瘤作用的影响及机制

目的研究胀果甘草粗多糖(GiP)及其纯化多糖GiP-B1对荷瘤小鼠树突状细胞(DC)成熟和抗肿瘤作用的影响及机制。方法将体外培养的肝癌细胞H22荷瘤小鼠未成熟DC(imDC)分为对照组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组、GiP组及GiP-B1组,检测荷瘤小鼠成熟DC(mDC)的细胞活力,表面标志物(CD11c、CD80、CD86、MHC-Ⅱ)阳性表达率,白细胞介素12p70(IL-12p70)及IL-4水平;通过荷瘤小鼠m DC与CD4^(+)T淋巴细胞共培养生成CD4-细胞毒性T细胞(CD4-CTL),检测刺激指数,CD4-CTL上清液中IL-12p70、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4、IL-10水平及对H22细胞的杀伤活性;检测共培养后荷瘤小鼠mDC中IL-12、IL-12受体(IL-12R)、信号转导和转录激活因子4(STAT-4)mRNA表达量,以及IL-12Rβ2蛋白表达量,核转录因子κB(NF-κB)p65、STAT-4蛋白磷酸化水平。结果与对照组比较,GiP组与GiP-B1组荷瘤小鼠mDC细胞活力、MHC-Ⅱ阳性表达率以及IL-12p70、IL-4水平均显著升高(P<0.05),CD11c、CD80、CD86阳性表达率均有升高趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05)。共培养后刺激指数、IL-12p70、IFN-γ水平均显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10(GiP组除外)水平均显著降低(P<0.05),对H22细胞的杀伤活性均显著增强(P<0.05);荷瘤小鼠m DC中IL-12、IL-12R(GiP组除外)、STAT-4 mRNA表达量,IL-12Rβ2蛋白表达量以及NF-κB p65、STAT-4蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。结论GiP及GiP-B1对荷瘤小鼠DC的成熟有较好的促进作用,能有效刺激CD4^(+)T细胞增殖并增强CD4-CTL的抗肿瘤活性,其作用机制可能与激活IL-12/NF-κB/STAT-4信号通路有关。

苦参碱调节IL-6/STAT3/NF-κB信号通路对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model组,低、中、高剂量MT组(MT-L组,50 mg/kg;MT-M组,100 mg/kg;MT-H组,200 mg/kg),美沙拉嗪组(MSLM组,0.42 g/kg)、MT-H+rIL-6(IL-6激活剂)组(200 mg/kg+0.05 mg/kg),每组18只。除CK组外,其余组大鼠均采用50 g/L三硝基苯磺酸(20 mg/kg)缓冲液与500 mL/L乙醇按照1∶1比例混匀后灌肠以构建炎症性肠病大鼠模型,建模成功后,分别进行给药处理,每天1次,持续7周。分别在给药1、3、5、7周时对大鼠进行体质量的测量;比较各组大鼠结肠长度的变化;HE染色检测大鼠结肠组织病理损伤;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17(IL-17)、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;Western blotting检测大鼠结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠结肠组织病理损伤严重,体质量(3、5、7周时)、IL-10水平、Treg细胞比例、Foxp3蛋白表达降低,结肠变短,TNF-α、IL-17水平、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、RORγt、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达增高(P<0.05);与Model组比较,MT-L组、MT-M组、MT-H组、MSLM组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);rIL-6减弱了高剂量MT对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的促进作用。结论MT可能通过抑制IL-6/STAT3/NF-κB信号通路,促进炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡。

利用牛乳腺细胞和小鼠乳腺组织分析异绿原酸C通过NF-κB信号通路对乳腺炎症反应的抑制效应

旨在探究异绿原酸C(ICAC)对乳腺炎及NF-κB炎性通路的抑制作用。本研究以脂多糖(LPS)分别刺激牛乳腺上皮细胞(MAC-T)和小鼠乳腺组织建立体外和体内炎性模型,采用MTT方法筛选ICAC处理MAC-T细胞的适宜浓度,ELISA检测炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)和炎性介导因子(COX-2和iNOS)的表达水平,Western blot方法检测NF-κB信号通路关键蛋白(IκB和p65)的表达水平和磷酸化水平。结果发现:1)ICAC在20~100 mg·L^(-1)的浓度下对MAC-T细胞没有显著的生长抑制作用(P>0.05);2)1 mg·L^(-1)的LPS处理引起MAC-T细胞中IL-1β、IL-6的蛋白质表达量极显著高于对照组(P<0.01),ICAC处理(20、50、80 mg·L^(-1))极显著下调了MAC-T细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2和iNOS的表达量(P<0.01);3)小鼠腹腔注射的ICAC(60、80、100 mg·kg^(-1))均降低了LPS诱导的CD3的表达,小鼠乳腺组织T淋巴细胞浸润减少;4)ICAC显著降低了LPS诱导的MAC-T细胞和小鼠乳腺组织中p65和IκB的磷酸化水平(P<0.05),抑制了p65的核转移。上述结果说明,异绿原酸C通过NF-κB炎性通路抑制MAC-T细胞和小鼠乳腺组织的炎性反应,但是异绿原酸C在奶牛乳腺炎防治中的应用有待进一步研究。

存活蛋白和NF-κB在外周T细胞性淋巴瘤中的表达和意义

本研究旨在探讨存活蛋白和NF-κB在外周T细胞性淋巴瘤中的表达及意义。应用免疫组织化学法检测26例外周T细胞性淋巴瘤组织中存活蛋白和NF-κB的表达,30例良性淋巴组织反应增生被选作对照组。结果发现,外周T细胞性淋巴瘤患者中有21例存活蛋白表达阳性,阳性率为80.8%;17例NF-κB表达阳性,阳性率为65.4%。与对照组相比,具有显著性差异(p<0.01)。实验组中,存活蛋白阳性率与NF-κB阳性率呈正相关。结论:存活蛋白和NF-κB在外周T细胞性淋巴瘤组织中广泛表达,对肿瘤细胞的促增殖和抑凋亡发挥着重要的作用。

苯烯莫德对人外周血单个核细胞增殖、凋亡作用及对T细胞NF-κB的调节

目的探讨苯烯莫德对人外周血单个核细胞(PBMC)增殖凋亡及T细胞核因子NF-κB的调节作用。方法提取健康志愿者外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,用CCK-8法测定苯烯莫德对人PBMC增殖的影响;用流式细胞法测定苯烯莫德对人PBMC凋亡的影响;用Western blot法检测活化的人T细胞核因子NF-κB p65,p-NF-κb p65,IKK,p-IKK,IκBα,p-IκBα蛋白表达的经时变化。结果苯烯莫德抑制人PBMC增殖的IC50为9.67μmol/L;苯烯莫德可诱导人PBMC的早期凋亡和晚期凋亡;苯烯莫德作用于活化的T细胞后,随着时间的延长,NF-κB通路中活化性因子p-NF-κB p65和p-IKK表达逐渐降低,而抑制性因子p-IκBα表达却逐渐升高,提示苯烯莫德对NF-κB通路为负向调节。结论苯烯莫德抑制人PBMC增殖,诱导其凋亡。苯烯莫德对T细胞NF-κB通路为负向调节。

阿糖胞苷上调白血病细胞CD86分子及细胞因子表达的研究

目的:观察阿糖胞苷(Ara-C)对急性白血病细胞CD86分子表达的影响,并探讨其作用机制。方法:流式细胞术(FCM)检测U937、HL60、NB4细胞经Ara-C处理前后CD86分子表达变化,RT-PCR检测Ara-C对各组细胞CD86mRNA、NF-κB以及细胞因子IFN-γ的表达变化。结果:经Ara-C处理的急性白血病细胞CD86分子表达与对照组相比均明显升高(P<0.05);CD86mRNA表达水平也明显增强;Ara-C处理后细胞核内NF-κB表达明显上调;并且IFN-γmRNA在T细胞活化72h可检测到。结论:Ara-C能使U937、HL60、NB4急性白血病细胞CD86表达增加,有利于NF-κB等转录因子活化,促进CD86转录增强、表达增加并可有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞,B7-2在T细胞活化中起着更重要的作用。

老年慢性牙周炎合并冠心病患者龈沟液及血清IL-8、TNF-α、IL-10的水平及其临床意义

目的探究老年慢性牙周炎合并冠心病患者龈沟液及血清中白细胞介素8(IL-8)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)表达水平,研究慢性牙周炎与冠心病的相关性。方法选择2013年2月至2015年4月期间治疗的老年患者76例作为研究对象,其中A组为慢性牙周炎合并冠心病患者(40例),B组为单纯患有慢性中重度牙周炎患者(36例)。同期健康对照组为C组(38例)。对三组患者探诊深度、探诊出血指数等指标进行记录。所有患者均抽取龈沟液及肘正中静脉血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对IL-8、TNF-α、IL-10水平进行分析,探究慢性牙周炎与冠心病相关性。结果 A、B组患者牙周指数BI、PD等指标显著高于C组健康志愿者,A组指标高于B组,B组指标高于C组,表明三组患者牙周炎严重程度顺次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。A组、B组被试的龈沟液及血清IL-8、TNF-α水平均显著高于C组,A组、B组龈沟液、血清IL-10水平均显著低于C组,差异有统计学意义(P<0.05);A组的龈沟液及血清IL-8、TNF-α均显著高于B组,IL-10水平低于B组,差异均有显著性(P<0.05)。牙周指数与IL-8、TNF-α水平呈正相关关系(P<0.05),牙周指数与血清、龈沟液内IL-10水平呈负相关关系(P<0.05)。结论老年慢性牙周炎与冠心病间存在相关性,它们有共同的致病因素,与血清IL-8、TNF-α、IL-10等炎性因子有一定联系。

氟他胺诱导干眼模型大鼠角膜和泪腺组织病理变化及TNF-α、IL-1α的表达

目的通过雄激素受体拮抗剂氟他胺溶液灌胃建立大鼠干眼模型,观察干眼大鼠角膜及泪腺组织病理变化及TNF-α、IL^(-1)α的表达。方法取32只SPF级SD雌性大鼠随机分为4组,氟他胺高、中、低浓度组和对照组,每组8只,每天分别用浓度为16 mg·kg-1、13 mg·kg-1、10 mg·kg-1氟他胺溶液和1 m L生理盐水灌胃。给药后0周、2周、4周、8周、16周、20周分别检测各组基础泪液分泌试验(SchirmerⅠtest,SⅠt)值、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及角膜荧光素钠染色情况。给药后0周、10周、20周采用放射免疫法检测各组血清睾酮浓度。给药后20周处死大鼠取各组角膜与泪腺组织行病理学观察,免疫组织化学方法检测各组TNF-α、IL^(-1)α的表达情况。结果给药后4周时高、中浓度组SⅠt值开始减小,与对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。8周时高、中、低浓度组的SⅠt值均小于对照组(均为P<0.05),20周时高(3.23±0.31)mm、中(3.98±0.36)mm、低(4.73±0.18)mm浓度组的SⅠt值进一步减小,且均较对照组(9.60±0.60)mm下降大于50%(均为P<0.05),高、中、低浓度组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后4周时高浓度组大鼠即出现BUT缩短,8周时,高、中、低浓度组的BUT均短于对照组(均为P<0.05),20周时高(2.40±0.61)s、中(4.32±0.68)s、低(6.10±0.81)s浓度组的BUT较对照组(9.12±0.73)s进一步缩短,各组之间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后4周时高、中浓度组开始出现角膜上皮点状荧光素钠着色,16周时中、低浓度组出现小片状着色,高浓度组可见角膜上皮弥漫性大片状着色,20周时各组染色评分两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后20周时睾酮浓度高浓度组(5.08±0.21)pg·m L^(-1)、中浓度组(4.23±0.16)pg·m L^(-1)、低浓度组(3.58±0.24)pg·m L^(-1)较对照组(2.24±0.15)pg·m L^(-1)不同程度升高,与对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),高、中、低浓度组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。HE染色显示高、中、低浓度组角膜出现不同程度鳞状上皮层次增加,基底细胞排列紊乱,基质层水肿;高、中、低浓度组泪腺上皮细胞小而密集,腺泡萎缩融合,结构紊乱,高浓度组改变最为显著。免疫组织化学结果显示高、中、低浓度组角膜与泪腺上皮细胞中TNF-α、IL^(-1)α阳性表达细胞数均高于对照组(均为P<0.05)。结论雄激素受体拮抗剂氟他胺溶液灌胃可以成功诱导混合型干眼模型,干眼大鼠角膜和泪腺上皮细胞发生病理学改变,炎性因子TNF-α、IL^(-1)α的表达明显增高。

一氧化氮——NF-κB信号通路在人初始T细胞向Th1/Th2分化中的作用

目的 :探讨一氧化氮 (NO)核因子κB(NF κB)信号通路在人幼稚T细胞向 1型辅助性T细胞 (Th1) /2型辅助性T细胞(Th2 )分化过程中的作用。方法 :分离人脐血幼稚T细胞 ,分别加入不同浓度的NO供体硝普钠 (SNP)、NO合成抑制剂左旋精氨酸甲基酯 (NAME)和NF κB抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC) ,通过流式细胞术检测细胞内IFN γIL 4的表达 ,了解幼稚T细胞的分化。结果 :在不同浓度的SNP和NAME和PDTC作用下 ,表达IFN γ(即Th1)或IL 4(即Th2 )T细胞的百分率与对照组相比较均无显著差异 (P >0 .0 5)。结论 :NONF κB信号通路对人幼稚T细胞向Th1和Th2细胞的分化均无显著影响。

肿瘤坏死因子-α诱导骨髓间充质干细胞凋亡作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的影响。方法:分离培养大鼠BMSCs,经成骨、成脂诱导分化鉴定后,分别用浓度为0、20、40μg/L的TNF-α对其进行刺激。24 h后,通过细胞活性检测观察不同浓度TNF-α对BMSCs的活性影响;Tunel染色观察不同浓度TNF-α对BMSCs凋亡的影响;Western blot检测不同浓度TNF-α刺激后,BMSCs中Bax、Bcl-2蛋白的表达量。结果:BMSCs经体外培养扩增后,成骨、成脂鉴定均为阳性。台盼蓝染色、Tunel染色结果显示,随TNF-α浓度增高,BMSCs的死亡率增高,细胞凋亡率则呈浓度依赖性增高(P<0.05);Western blot结果显示,随TNF-α浓度增高,BMSCs中Bax表达逐渐增加,Bcl-2表达逐渐降低(P<0.05)。结论:TNF-α可诱导BMSCs的凋亡。

HBV感染对人T细胞免疫及细胞因子TNF-α、GF-β_2的影响

目的:检测HBV感染后外周血及感染肝组织内CD4+T 和CD8+T细胞的数量及功能,以及肝组织内TNF-α及TGF-β2表达,探讨HBV对人体T细胞免疫的影响及其可能机制. 方法:用流式细胞仪检测HBV感染者36例和正常人20 例外周血中T细胞亚群的数量.用免疫组化法HBV感染肝组织50例中CD4,CD8,CD25和TNF-α,TGF-β2 的表达,并作相应比较. 结果:HBV感染组外周血,CD4+和CD4+/CD8+比值明显低于对照组(P<0.05);CD8+细胞升高,明显高于对照组(P<0.05).肝组织内浸润的淋巴细胞主要聚集在汇管区和小叶坏死区,免疫组化结果显示HBV感染组肝组织内的CD8+和CD4+细胞数量多于非HBV感染组(P<0.01).HBV感染组肝组织内CD25+细胞数量减少,但统计学上无显著意义.HBV感染组肝组织TNF-α表达明显增强,与非HBV感染组相比有显著差异(P<0.05);而TGF-β2在HBV感染组肝组织的表达与非HBV感染组相比无显著差异.TGF-β2及TNF-α在肝硬化、癌旁肝硬化、肝细胞癌中均较强表达,且与慢性乙肝组和正常对照组比较有非常显著差异(P<0.01). 结论:HBV感染者外周血和肝内的T细胞亚群紊乱, 活性下降,功能受损.TNF-α表达与HBV感染和免疫损伤密切相关,而HBV对TGF-β2的影响微弱.

硝普钠对核因子κB活性影响的初步研究

目的 :探讨不同浓度的硝普钠 (SNP)对人外周血T淋巴细胞核因子kappaB(NF -κB)活性的影响及机制。方法 :应用人外周血T淋巴细胞培养、Westernblot和RT -PCR等技术 ,观察不同浓度的一氧化氮 (NO)供体SNP对人T细胞受植物血凝素 (PHA -P)刺激 30min、12 0min后IκBαmRNA和蛋白质表达的影响。结果 :中高浓度的SNP能显著减少PHA -P刺激 30min时IκBα 蛋白的降解 ,并明显增加刺激 12 0min时IκBαmRNA的再表达。结论 :中高浓度的SNP抑制NF -κB活性的机制与其通过NO减少IκBα 降解、促进IκBα 再合成有关 ,而低浓度SNP对NF -κB活性影响的机制可能不是通过IκBα。

伊马替尼抑制Jurkat T细胞增殖与影响A20和NF-κB表达相关

目的研究伊马替尼(IM)对T细胞Fyn、A20和NF-κB转录的影响及意义。方法 50 nmol/L浓度IM作用Jurkat细胞24 h后,以K562细胞为对照,应用实时荧光定量PCR技术检测Fyn、A20和NF-κB基因表达水平变化;Western blot技术检测A20和NF-κB蛋白水平变化。结果 IM明显上调Jurkat细胞A20基因表达水平,明显下调NF-κB基因表达水平,而Fyn基因表达水平没有明显变化。K562细胞受到IM处理后,A20和NF-κB的表达水平改变与Jurkat细胞相似,但Fyn基因水平明显下调。Fyn基因表达下调与IM下调BCR/ABL融合基因表达有显著的相关性。A20和NF-κB蛋白水平变化与mRNA变化一致。结论 IM不仅通过抑制BCR/ABL融合基因表达下调Fyn转录水平,而且也可通过上调A20和下调NF-κB表达抑制T细胞增殖作用。

NF-κB介导的调节性T细胞的发育及其在移植物抗宿主病中的作用

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后长期存活患者的主要并发症,也是导致移植后长期存活患者非复发相关死亡的主要原因。诸多研究表明,调节性T细胞(Treg)可以抑制早期GVHD。作为一种多效的转录因子,核因子-κB(NF-κB)可以调控Treg细胞的增殖和活化,从而成为防治GVHD的潜在靶点。现就NF-κB的功能、激活途径以及与GVHD的关系作一阐述。

苯妥英钠对内毒素作用下人牙周膜成纤维细胞增殖和表达TNF-α的影响

目的:观察苯妥英钠(PHT)对内毒素(LPS)作用下人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)增殖和表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:原代培养h PDLFs,分别与100 mg/L LPS、不同浓度PHT(5、20 mg/L)以及100 mg/L LPS+不同浓度PHT共同培养24 h后,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法观察不同浓度PHT对LPS作用下h PDLFs增殖活性的影响;采用免疫细胞化学SP法检测PHT对LPS作用下h PDLFs内TNF-α的表达情况。结果:100 mg/L的LPS可明显抑制h PDLFs的增殖活性、刺激h PDLFs表达TNF-α(P<0.05);20 mg/L PHT可明显促进h PDLFs的增殖(P<0.05),并可明显抑制h PDLFs表达TNF-α(P<0.05);将20 mg/L PHT与100 mg/L LPS联合作用于h PDLFs时,可明显逆转LPS对h PDLFs增殖(P<0.05),明显拮抗LPS介导h PDLFs表达TNF-α(P<0.05)。结论:20 mg/L PHT对LPS作用下的h PDLFs具有保护作用。

伊马替尼诱导原代T细胞凋亡作用机制研究

目的:研究伊马替尼(IM)诱导正常人原代CD3^+T细胞凋亡的分子机制。方法:0~100 nmol/L的IM作用原代T细胞24 h后,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用实时荧光定量PCR技术检测Caspase-3、Caspase-8、A20和NF-κB基因表达变化;应用Western blot技术检测A20和NF-κB蛋白表达变化。结果:IM具有明显促T细胞凋亡能力,其凋亡分子Caspase-3和A20基因表达水平均上调,而NF-κB的基因和蛋白水平均下调。结论:IM通过上调A20的表达诱导了T细胞的凋亡。

TGF-β_1基因修饰树突状细胞对免疫排斥反应影响的研究

目的探讨术前输注TGF-β1基因修饰的供者树突状细胞(dendriticcell,DC)对大鼠肝移植免疫排斥的抑制作用及相关机制。方法TGF-β1重组腺病毒转染供者DC,静脉输注受体大鼠,1周后建立大鼠肝移植免疫排斥模型并鉴定表达,记录存活时间,凝胶电泳迁移率试验法检测脾T细胞、Kupffer细胞NF-кB活性及相关细胞因子TNF的表达,观察移植肝排斥病理改变。结果Ad-TGF-β1-DC输注组移植大鼠的T细胞、Kupffer细胞活性及TNF表达明显低于对照组,排斥病理改变明显减轻,存活时间延长,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1-DC能有效降低T细胞和Kupffer细胞活性,提高移植肝免疫耐受,延长存活时间。