中药露蜂房蛋白对人红白血病K562细胞增殖的影响

目的研究中药露蜂房蛋白(NVP)抗白血病的作用,为中药露蜂房治疗白血病和开发新的抗白血病药物提供实验和理论依据。方法采用细胞培养和透射电子显微镜技术,观察NVP对人红白血病细胞(K562细胞)的生长抑制作用和形态结构的影响;运用免疫组织化学方法和图像分析系统,研究NVP对K562细胞凋亡相关信号转导蛋白NF-κBp65、-βcatenin及iNOS表达的影响。结果1.NVP处理组K562细胞生长饱和密度降低,表示细胞增殖减弱。2.透射电镜下发现,NVP处理组K562细胞呈典型的凋亡形态学改变。3.免疫组织化学和图像分析系统测定光密度值(A值)显示,NVP处理组K562细胞中NF-κBp65、-βcatenin细胞核内转导减少,iNOS表达减弱。结论NVP有明显抑制K562细胞增殖的作用,其作用机制可能通过调节凋亡相关信号传导因子NF-κBp65、-βcatenin及iNOS的表达,从而诱导白血病细胞凋亡。

露蜂房纯化蛋白对急性髓系白血病患者骨髓细胞的影响

目的研究中药露蜂房纯化蛋白(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)的作用并探讨其机制。方法采用NVP-Ⅱ在体外作用于AML患者BMMNC,经光镜、电镜、Hochest33258染色法、TdT缺口末端标记(TUNEL)技术等方法检测NVP-Ⅱ对AML患者BMMNC的影响。结果不同浓度NVP-Ⅱ对AML患者BMMNC有不同程度的生长抑制和诱导凋亡作用。①光镜下观察到,与生理盐水对照组比较,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC数量明显减少,胞质内颗粒增多,并有较多的细胞碎片。②透射电镜下发现,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC细胞核染色质浓缩、碎裂,靠核膜边集呈块状,并形成凋亡小体;线粒体基质深染,呈现空泡样变及髓样变。③Hochest33258染色法显示,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC核染色质高度凝聚,致密浓染,或裂解呈碎块状,边缘光滑清晰。④TUNEL检测见阳性细胞核深染,NVP-Ⅱ处理组与生理盐水处理组比较,凋亡细胞明显增多(P<0.05)。结论NVP-Ⅱ可抑制AML患者BMMNC生长并诱导其凋亡。

露蜂房蛋白对急性髓细胞白血病患者骨髓单个核细胞超微结构的影响

目的:观察中药露蜂房蛋白(NVP)成份对急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)超微结构的影响。方法:采用体外细胞培养,加入不同浓度露蜂房蛋白成分作用于AML患者BMMNC,培养72h收集细胞,常规制备超薄切片,透射电子显微镜下观察AML患者BMMNC的超微结构。结果:露蜂房蛋白各处理组细胞核染色质浓缩、边集,呈新月形或环状或细胞核碎裂呈块状。线粒体出现空泡样变及髓样变。结论:中药露蜂房蛋白成份有明显诱导AML患者体外培养BMMNC凋亡的作用,并呈现典型的细胞凋亡超微结构改变。

露蜂房蛋白体外诱导K562细胞凋亡的作用及其机制

目的探讨露蜂房蛋白(NVP)体外诱导人红白血病细胞系K562细胞凋亡的作用及其机制。方法将露蜂房蛋白NVP1、NVP2、NVP3及NVP4分别作用于K562细胞,采用细胞培养、Hoechst 33258荧光染色技术观察K562细胞形态变化;采用免疫组织化学方法检测K562细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cas-pase-3)表达。结果NVP1~NVP4作用后K562细胞生长缓慢,数量减少,胞质内颗粒增多,并出现大量空泡,细胞碎片逐渐增多;Hoechst33258荧光染色显著增强,染色质呈致密浓染的块状或粗颗粒状荧光。K562细胞cas-pase-3蛋白表达明显增加,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论NVP能抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡;其作用机制可能是使caspase-3蛋白表达升高和活化。

露蜂房纯化蛋白对白血病细胞形态学影响的研究

目的观察中药露蜂房纯化蛋白Ⅱ(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对人早幼粒白血病细胞株HL-60和急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)形态学的影响。方法采用体外细胞培养,加入不同浓度NVP-Ⅱ作用于HL-60细胞和AML患者BMMNC,培养72 h后,生长曲线法测定NVP-Ⅱ对白血病细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞生长状况,并收集细胞常规制备超薄切片,透射电子显微镜下观察HL-60细胞和AML患者BMMNC的超微结构。结果光镜下NVP-Ⅱ处理组白血病细胞数量明显减少,并出现细胞碎片;透射电镜下,NVP-Ⅱ处理组白血病细胞出现核固缩,染色质浓缩边集,呈新月状、块状或碎裂为质膜包绕的团块,形成凋亡小体;线粒体基质深染,出现空泡样变。结论NVP-Ⅱ有明显诱导白血病细胞凋亡的作用,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变。

中药露蜂房蛋白对红白血病小鼠脾组织中Bcl-2/Bax蛋白表达

目的研究露蜂房蛋白(NVP)在体内对红白血病细胞Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法制备红白血病小鼠模型,SP免疫组织化学检测实验各组脾组织中红白血病细胞Bcl-2/Bax表达,图像分析技术对Bcl-2/Bax免疫反应阳性细胞用SAS 8.0统计软件处理分析。结果露蜂房蛋白处理组与生理盐水组比较,Bcl-2阳性表达细胞明显减少(P<0.01),Bax蛋白表达明显增高(P<0.01)。结论Bcl-2蛋白Bax蛋白与露蜂房蛋白对红白血病细胞在体内的作用密切相关。

露蜂房纯化蛋白对人早幼粒白血病HL-60细胞的生长抑制作用

目的研究中药露蜂房纯化蛋白(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对人早幼粒白血病HL-60细胞的生长抑制作用。方法采用NVP-Ⅱ在体外作用于HL-60细胞,经光镜、电镜、荧光显微镜观察形态学变化,TdT缺口末端标记(TUNEL)技术检测NVP-Ⅱ对HL-60细胞增殖、凋亡的影响。结果①光镜下观察到,与生理盐水对照组比较,NVP-Ⅱ处理组HL-60细胞数量减少,胞质内颗粒增多。②透射电镜下发现,NVP-Ⅱ处理组HL-60细胞核染色质靠核膜边集,呈块状或半月形;有的细胞核固缩、断裂为质膜包绕的碎块,有凋亡小体出现。③荧光显微镜下观察到,NVP-Ⅱ处理组HL-60细胞核染色质高度凝聚,致密浓染,或裂解呈碎块状,边缘光滑清晰,呈现典型的凋亡形态特征。④TUNEL检测见阳性细胞核深染,NVP-Ⅱ处理组与生理盐水处理组比较,凋亡细胞明显增多(P<0.05)。结论NVP-Ⅱ可抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡。

露蜂房纯化蛋白对白血病细胞抑制作用的研究

目的研究中药露蜂房纯化蛋白(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对白血病细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法采用NVP-Ⅱ在体外作用于人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60及急性髓系白血病患者(AML)骨髓单个核细胞(BMMNC),MTT比色法检测NVP-Ⅱ对白血病细胞增殖的影响,透射电镜观察细胞超微变化,并用Hochest33258荧光染色法和TdT缺口末端标记(TUNEL)技术分析细胞凋亡。结果0.019 19 mg/L、0.191 9 mg/L NVP-Ⅱ组能明显抑制白血病细胞的生长,使白血病细胞在透射电镜和荧光显微镜下呈现典型的凋亡形态特征,而且TUNEL检测见凋亡细胞核深染,NVP-Ⅱ处理组与生理盐水对照组比较,阳性细胞明显增多(P<0.05)。结论NVP-Ⅱ体外对白血病细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导其凋亡。

中药露蜂房蛋白对人红白血病细胞株K562细胞影响的实验研究

目的:研究中药露蜂房中蛋白成份抗白血病作用的机理,为中药露蜂房治疗白血病的临床应用和开发新的抗白血病药物提供实验和理论依据。方法:采用细胞培养和透射电子显微镜技术,观察中药露蜂房蛋白成份对人红白血病细胞(K562细胞)的生长抑制作用和形态结构的影响,采用免疫组织化学方法测定露蜂房蛋白对K562细胞凋亡相关信号转导蛋白NF-κBp65、-βcatenin及iNOS表达的影响。结果:(1)与生理盐水对照组比较,露蜂房蛋白处理组白血病细胞生长饱和密度降低,细胞增殖活性减弱(P<0.05);(2)露蜂房蛋白处理组白血病细胞呈典型的凋亡形态学改变;(3)与生理盐水对照组比较,露蜂房蛋白处理组白血病细胞中NF-κBp65、-βcatenin及iNOS表达减弱,NF-κBp65和-βcatenin细胞核内转导减少(P<0.05)。结论:中药露蜂房蛋白成份有明显抑制K562细胞的作用,其作用机制可能是通过调节凋亡相关信号传导因子NF-κBp65、-βcatenin及iNOS的表达,从而诱导白血病细胞凋亡。