内皮细胞型一氧化氮合成酶Glu298Asp基因多态性与牙周炎伴Ⅱ型糖尿病的相关性研究

目的研究内皮细胞型一氧化氮合成酶(eNOS)Glu298Asp基因多态性与牙周炎伴Ⅱ型糖尿病易感性的关系。方法收集慢性牙周炎患者、慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病患者、Ⅱ型糖尿病患者和牙周健康者的颊黏膜拭子,提取DNA后应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测eNOS Glu298Asp的基因型分布。结果慢性牙周炎组、Ⅱ型糖尿病组、慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病组、正常组eNOS Glu298Asp基因型的分布差异有统计学意义(掊2=18.503,P=0.005),等位基因频率分布差异也有统计学意义(掊2=8.243,P=0.041)。慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病组与正常组相比,T基因型的OR值为0.962,95%可信区间为0.737～1.256,说明T基因型可能为糖尿病和牙周炎的保护因素;G基因型的OR值为1.043,95%可信区间为0.781～1.391,说明G基因型可能为二者的危险因素,但差异无统计学意义。结论慢性牙周炎、慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病、糖尿病的易感性可能与eNOS Glu298Asp多态性有关。

eNOS基因多态性与2型糖尿病及糖尿病肾病的相关研究

目的研究内皮型NO合酶(eNOS)基因多态性与2型糖尿病(2型DM)及糖尿病肾病的关系。方法采用聚合酶链反应法对合肥地区399例2型DM、113例非糖尿病对照(NGT)两组人群的eNOS基因第4内含子的VNTR(可变串联重复序列多态性)4A/B多态性进行基因型分析,比较两组间基因型频率、等位基因频率分布有无统计学差异。2型DM组中302例根据尿白蛋白排泄率分为正常蛋白尿排泄率(114例)、微量蛋白尿排泄率(140例)、临床糖尿病肾病(35例)、终末期肾病(13例)4组,比较4组间基因型和等位基因频率分布有无统计学差异。结果2型DM、NGT两组间eNOS基因4A/B座位的基因型和等位基因频率分布差异无显著性。2型DM肾病分组间eNOS基因4A/B座位BB型基因频率分别为88.6%,71.4%,74.3%,76.9%,组间差异有显著性,P=0.009。AB型基因频率分别为9.6%,27.1%,20%,23.1%,组间差异有显著性,P=0.006。A等位基因频率分别为6.6%,15%,15.7%,11.5%,组间差异有显著性,P=0.02。A等位基因频率随糖尿病肾病程度加重而增多,P值为0.01。结论eNOS基因4A/B多态性与2型DM发生无明显关联。eNOS基因4A/B多态性与2型DM肾病发展可能相关,A等位基因可能与2型DM肾病进展相关。

eNOS基因5′-侧翼区T-^(786)→C突变与2型糖尿病患者内皮依赖性血管舒张功能的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者内皮一氧化氮合酶(eNOS)基因5′-侧翼区T-786→C突变与T2DM患者内皮依赖性血管舒张功能(EDD)关系。方法选择无血管并发症的男性T2DM患者162例。采用PCR/ASO探针杂交技术检测eNOS基因5′-侧翼区T-786→C突变。采用高分辨超声检测肱动脉血流介导的EDD。结果T/C或C/C组EDD为3·73%±0·50%,明显低于T/T组(4·15%±0·49%)(P<0·01)。多元逐步分析结果显示,在所有T2DM患者中,EDD与C等位基因呈负相关(P=0·001)。在吸烟者中,T/C或C/C组EDD明显低于T/T组(P<0·05),在非吸烟者中则不然。多元逐步分析结果显示,在吸烟者中,C等位基因是EDD下降的独立危险因子(P<0·01),在非吸烟者中则不然。结论eNOS基因5′-侧翼区T-786→C突变是T2DM患者内皮功能异常的遗传危险因子,尤其是吸烟的T2DM患者。

一氧化氮合成酶基因多态性在全身性疾病及牙周炎中的研究进展

一氧化氮合成酶(NOS)可分为3种:神经原性、内皮性和诱生性,NOS基因多态性主要表现在内皮性NOS。本文主要探讨NOS基因多态性与心血管疾病、糖尿病、牙周炎的密切关系。

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与2型糖尿病合并高尿酸血症相关性研究

目的:探讨汉族人内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因内含子4可变数目串联重复序列插入/缺失多态性(4b/a)与2型糖尿病(T2DM)合并高尿酸血症的关系。方法:提取100例健康人(A组)、76例T2DM无高尿酸血症患者(B组)和124例T2DM合并高尿酸血症患者(C组)的基因组DNA,用聚合酶链反应-可变数目串联重复序列法测定4b/a多态性。结果:3组eNOS基因内含子4等位基因的分布和频率差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM所有患者中4b/b、4b/4a、4a/4a各基因型高尿酸血症的发病率逐渐升高分别为35.4%、58.8%和100%。4b和4a等位基因患者高尿酸血症的发病率分别为36.5%和63.6%,两者比较差异有统计学意义。携带a等位基因的T2DM患者较未携带a等位基因者合并高尿酸血症者的危险性升高(4b/4a的OR为3.42,P<0.05)。结论:eNOS4a等位基因是T2DM患者并发高尿酸血症的独立危险因素,可能为筛查T2DM患者高尿酸血症的高危人群提供侯选基因。

eNOS基因多态性与汉族人糖尿病合并颈动脉粥样硬化关系

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,eNOS)基因第4内因子基因27 bp数目可变的串联重复序列(variable number of tandem repeats,VNTR)多态性与糖尿病合并颈动脉粥样硬化的关系。方法纳入189例糖尿病合并颈动脉粥样硬者和240名对照,分析各组间的等位基因频率与基因型频率的差异。结果糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者的a等位基因频率高于对照组(9.78%、6.04%,掊2=4.119,P<0.05),差别有统计学意义;4a/4b+4a/4a基因型频率在糖尿病合并颈动脉粥样硬化组高于对照组(17.38%、11.65%,掊2=5.518,P<0.05),差异有统计学意义。用Logistic回归分析发现4a等位基因与糖尿病合并颈动脉粥样硬化具有显著相关性(OR=1.594,95%CI 1.256-1.741,P<0.000)。用多元Logistic回归分析校正了年龄、高血压、高血脂、体重指数和吸烟等危险因素的影响后,a等位基因是糖尿病合并颈动脉粥样硬化的遗传危险因素(OR=0.717,P<0.001)。证实eNOS基因VNTR多态性是影响汉族人群中糖尿病患者发生颈动脉粥样硬化的独立危险因素。结论在汉族人群中糖尿病合并颈动脉粥样硬化的发病与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)第4内含子a等位基因密切相关。

内皮细胞固有型一氧化氮合成酶基因G894T变异与糖尿病肾病的关系

目的:观察内皮细胞固有型一氧化氮合成酶(ecNOS)基因外显子7的Glu298Asp基因多态性与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法:利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了天津地区299例2型糖尿病患者和100例正常对照者的ecNOS基因外显子7的基因型,比较各组间的等位基因频率与基因型频率。结果:(1)2型糖尿病合并持续性微量白蛋白尿组(DN1组)的GT基因型和T等位基因频率高于糖尿病非肾病组(DM组)和正常对照组(C组),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)在2型糖尿病患者中GT基因型者较GG基因型者的DN患病率高(χ2=5.252,P=0.022)。(3)高血压、血纤维蛋白原(FIB)、ecNOS外显子7的GT基因型是2型糖尿病合并DN的独立危险因素。(4)2型糖尿病合并高血压组(DMEH组)、糖尿病非高血压组(DM1组)和C组间ecNOS基因外显子7的基因型分布和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ecNOS基因外显子7的基因G894T(Glu298Asp)的变异可能是天津地区2型糖尿病患者DN易感性的基因标志之一,可能参与DN的启动;该基因多态性不是通过促进高血压的发生而增加DN的易感性。

内皮固有型一氧化氮合酶基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性

目的探讨内皮固有型一氧化氮合酶(endothelial constitutive nitric oxide synthase,ecNOS)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法提取210例T2DM患者和196例健康对照者外周血有核细胞DNA,应用荧光标记单碱基延伸分型技术及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测ecNOS基因的2个标签SNP(tagSNP)rs7830和rs3918188。结果 T2DM组rs7830的CC基因型频率和C等位基因频率明显低于健康对照组(P<0.05)。两组rs3918188的基因型频率及等位基因频率无统计学差异(P>0.05)。通过对2个SNP进行单倍型构建分析发现,T2DM组和健康对照组的单倍型频率无统计学差异(P>0.05)。结论 ecNOS基因rs7830多态性变异是T2DM的遗传危险因素。

ecNOS基因多态性与2型糖尿病心血管危险因素集簇的关系

目的:探讨内皮固有型一氧化氮合酶(ecNOS)基因G894T多态性与天津市汉族成年2型糖尿病(T2DM)患者心血管危险因素集簇的关联性。方法:随机抽取无心血管病并发症且无血缘关系的天津市汉族成年T2DM患者80例,静脉血提取基因组DNA,用聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测ecNOS基因G894T多态性。结果:(1)ecNOS基因第7外显子894位点基因型分布为GG基因型63例(78.75%)、GT基因型17例(21.25%)和TT基因型0例;(2)GG与GT基因型患者的各项临床及实验室指标差异均无统计学意义。(3)随着T2DM患者存在心血管危险因素的增多,GT基因型患者的比例逐渐升高,差别具有统计学意义(χ2=7.544,P<0.05)。结论:ecNOS基因G894T多态性与T2DM患者心血管危险因素的集簇存在关联性。

eNOS基因(CA)_n多态性与2型糖尿病合并原发性高血压的相关性研究

目的 探讨内皮细胞型一氧化氮合酶 (eNOS)基因 1 3内含子 (CA) n 二核苷酸重复序列多态性与中国汉族人 2型糖尿病合并原发性高血压的关系。方法 应用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色 ,对 87例单纯 2型糖尿病 (T2DM)患者、78例T2DM合并原发性高血压 (T2DM +EH)患者和 83例中国汉族正常人 (NC)的eNOS基因 (CA) n 多态性进行研究。结果 eNOS基因CA重复序列多态性存在 2 3种等位基因 ,所含CA重复次数分别为 1 9～ 41 ,其中 (CA) 30 (1 66bp)等位基因最常见。该位点杂合度 (H)为 0 85 ,多态信息量 (PIC)为 0 83。病例 对照研究结果显示NC组与T2DM +EH组两组间等位基因频率差异有显著性 (χ2 =2 6 91 ,P <0 0 5) ;T2DM +EH组、T2DM组和NC组中 (CA) 34 等位基因频率分别为 1 3 5 %、7 5 %和 3 0 % ,其中T2DM +EH组与T2DM组 (CA) 34 等位基因频率差异有显著性 (P <0 0 5 ,OR =1 51 ,95 %CI =1 0 6～3 77) ;T2DM +EH组与NC组 (CA) 34 等位基因频率差异有显著性 (P <0 0 1 ,OR =2 31 ,95 %CI =1 1 7～ 4 96) ;当n≥ 34时 ,T2DM +EH组与NC组 (CA) n 等位基因频率差异有显著性 (P <0 0 5 ,OR =2 63 ,95 %CI=1 1 4～ 5 2 7)。结论 eNOS基因 (CA) n 可看作一个含有较高遗传信息的DNA?

2型糖尿病ecNOS基因27bpVNTR多态性与颈动脉内膜中层厚度的关系

目的研究2型糖尿病(T2DM)内皮性一氧化氮合酶(ecNOS)基因27bp数目可变的串联重复序列(VNTR)多态性与颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法选择昆明地区汉族无血缘关系的143例T2DM患者和80例健康对照(NC)者,采用PCR技术检测ecNOS基因27bpVNTR多态性,检测相关临床指标,采用高频超声多普勒测定IMT。结果T2DM患者含有4a(4次重复系列)等位基因的频率为0.084,T2DM组与NC组的颈动脉IMT有显著差异,ecNOS4a+与ecNOS4a-组间血浆TG水平的差异有统计学意义,而两组间IMT相比差异无统计学意义。结论ecNOS4a等位基因与T2DM患者的高TG水平有关,与颈动脉IMT可能无关。

内皮一氧化氮合酶基因多态性与高脂血症的关系

目的:探讨内皮一氧化氮合酶基因内含子4(eNOS4)多态性与高脂血症的关系。方法:取患者血清,用电化学发光法、钟点法测定血糖、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1C)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)。从患者全血中提取DNA,进行多聚酶链反应(PCR),对PCR产物行6%聚丙烯酰胺凝胶电泳;部分PCR产物被克隆进载体,选阳性集落,进行核酸测序。结果:对照组eNOS4只有2种等位基因(a和b),而糖尿病患者有3种等位基因(a、b和c),对第3种多态(等位基因c)进行了序列分析,其基因序列较等位基因b多27bp,即:GAAGTCTAGACCTGCTGCGGGGGTGAG。患者组等位基因a携带者血清TG及TC显著增高。结论:糖尿病患者eNOS4上的多态性有3种等位基因即:a、b和c;等位基因a与高脂血症,特别是高TG血症显著相关。

内皮固有型一氧化氮合酶基因4b/a多态性与2型糖尿病并发冠心病的关联性研究

目的本研究探讨内皮固有型一氧化氮合酶(ecNOS)基因第4内含子27bp可变数目串联重复序列(VNTR)插入/缺失多态性(4b/a)与2型糖尿病(T2DM)并发冠心病的关联性。方法观察80例2型糖尿病、92例T2DM合并冠心病患者及119例正常对照组人群,提取基因组DNA并应用PCR技术检测ecNOS基因内含子4VNTR多态性。结果ecNOS基因4b/a多态性与T2DM及T2DM并发冠心病无关。发现1例4a/a纯合子基因型者,位于T2DM并发冠心病组。结论缺失型等位基因4a可能处于非统治地位,是否与T2DM并发冠心病有关仍待更大样本的观察。

NOS1AP基因多态性与2型糖尿病发病风险关联分析

目的探讨一氧化氮合酶1转接蛋白（NOS1AP）基因多态性与中国淮海地区汉族人群2型糖尿病发病风险的关系。方法采用聚合酶链式反应一限制性片断长度多态性（PCR—RFLP）方法对200例2型糖尿病患者（病例组）和200例健康人群（对照组）进行NOS1AP基因多态性检测。结果病例组NOS1APrs12742393位点CC基因型和C等位基因频率均高于对照组（P〈0．05），C等位基因显著增加2型糖尿病的遗传风险性（OR=1．662，95％CI=1．089～2．535，P=0．018）。结论NOS1APrs12742393位点多态性可能与中国淮海地区汉族人群2型糖尿病的发病相关，C等位基因可能是2型糖尿病的遗传风险因子。

eNOS基因多态性与糖尿病肾病易感性相关关系

目的探讨eNOS基因多态性与糖尿病肾病易感性的相关关系。方法选择病程大于10年的88例南方汉族2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象。将尿微量白蛋白排泄率(UAER)>20μg/mL归入糖尿病肾病(DN)组,将UAER≤20μg/mL归入对照组,比较两组患者的年龄、性别构成、血压、血脂、血糖、C肽、糖化血红蛋白等传统危险因素的差异,并进行eNOS基因多态性分析。结果①两组患者在性别构成、年龄、糖尿病病程、吸烟及高血压比例、收缩压、舒张压、体重指数、空腹血糖、餐后2 h血糖、空腹C肽、餐后2 h C肽、糖化血红蛋白、胆固醇和甘油三酯等方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②DN组GT基因型及T等位基因显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 eNOS基因GT基因型及T等位基因是DN是易感因素。

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与原发性高血压、2型糖尿病的关系

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因 2 7bp数目可变的串联重复序列 (VNTR)多态性与中国汉族人原发性高血压 (EH)、2型糖尿病 (DM)的关系。方法 (1)聚合酶链反应 (PCR) 琼脂糖凝胶电泳检测基因型。 (2 )硝酸盐还原酶法测定空腹血清一氧化氮代谢物 (NOx)水平。 (3)放免法检测葡萄糖耐量试验时血清免疫活性胰岛素 (IRI)、C肽 (CP)。结果 (1)EH组、2型DM组a等位基因频率显著高于对照组 (0 .10 9对 0 .0 5 1;0 .12 9对 0 .0 5 1,P均 <0 .0 5 )。 2型DM组aa +ab基因型频率显著高于对照组 (0 .2 2 4对 0 .10 3,P <0 .0 5 )。 (2 )对照组内aa +ab基因型空腹血清NOx明显低于bb基因型 (P <0 .0 5 )。 (3)EH组aa +ab基因型空腹、糖负荷后血清IRI、CP均高于bb基因型 ,其中部分时点差异有显著性 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。 2型DM组aa+ab与bb基因型间各个点血清IRI、CP变化方向不一致。 (4 )EH组内aa +ab基因型HOMA IR显著高于bb基因型 (P <0 .0 5 )。结论 eNOS基因 2 7bpVNTR多态性与中国汉族人EH及 2型DM发生有关 ,a等位基因可能通过减少内皮基础NO释放参与EH发病 ,通过胰岛素抵抗机制参与EH和 2型DM的发病。

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与2型糖尿病及视网膜病变

采用PCR RFLP研究内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因多态性与 2型糖尿病 (DM )及糖尿病视网膜病变 (DR)的关系。未发现eNOS基因的G894T及 4A/B多态性与 2型DM发生关联 ,eNOS基因 4A/B多态性与DR发生可能相关 ,eNOS基因的G894T多态性与DR发生可能无关。

eNOS基因T-786C变异与糖尿病肾病相关

采用PCR/ASO探针杂交技术检测早期糖尿病肾病(DN)患者、糖尿病非DN患者及健康个体血管内皮一氧化氮合酶基因5′一侧翼区T-786C变异,结果提示该位点变异与DN发生可能有关。

2型糖尿病患者内皮型一氧化氮合酶基因(CA)_n多态性分析

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因 (CA)n多态性与 2型糖尿病及 2型糖尿病患者血清中一氧化氮 (NO)含量的相关关系。 方法 采用聚合酶链反应 (PCR)技术结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色 ,检测不同个体基因型 ;硝酸还原酶法测定空腹血清NO含量 ;分光光度法测定空腹血清NOS含量。 结果 eNOS基因 (CA)n多态性存在 2 2种等位基因 ,所含CA重复次数分别为 19～ 4 0 ,其中 (CA) 3 0 (16 6bp)等位基因最常见。该位点杂合度为 0 85 ,多态信息量为 0 83。糖尿病组和对照组中 (CA) 3 4 等位基因频率分别为 7 5 %和 2 9% ,差异有显著性 (χ2 =5 8,P <0 0 5 ,OR =1 31,95 %CI =1 2 7～ 3 96 ) ;基因型为 (CA)n1(CA)n2 的 2型糖尿病个体 ,当n1≥ 34或n2 ≥ 34时 ,血清中NO的含量显著低于对照组 (P <0 0 5 )。 结论 eNOS基因 (CA) 3 4 可能与 2型糖尿病相关 ,该基因多态性与血清NO水平有一定关系。

诱导型一氧化氮合酶基因多态性与糖尿病肾病的关系

采用基因测序方法研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因多态性的分布及与糖尿病肾病(DN)的关系,发现其多态性在不同种族的分布差异有统计学意义,但iNOS基因多态性与DN无显著相关。