生物法转化丙烯腈制取丙烯酰胺的研究(Ⅱ)菌种生长、产酶条件及酶反应条件的研究

本文研究了一株腈水合酶产生菌Ｍｉｃｒｏｃｏｃｕｓｓｐ．Ｓ１１５生长、产酶的条件及其所产酶的反应条件。Ｓ１１５在选定的培养基中，于３０℃摇床培养７２ｈ，其生长较好，酶活也较高。在所研究的几种诱导物中，丙腈对产酶的诱导作用最好。本文还研究了培养过程中补腈对产酶的影响以及底物浓度。

腈水合酶产生菌Rhodococcuss p．HUST-1发酵条件的优化

Rhodococcus sp.HUST-1在Co2+的诱导下产腈水合酶,催化丙烯腈水合生成丙烯酰胺.对菌株HUST-1的产酶条件进行优化.研究表明,发酵过程中培养基中的碳氮源、诱导剂浓度以及培养条件影响腈水合酶的高效表达.在葡萄糖20 g/L、酵母粉10 g/L、Co2+0.08 mmol/L、酪氨酸0.2 g/L、pH7.0、培养温度28℃时,HUST-1所产腈水合酶总酶活达1 012.7 U,比优化前提高了47.1%.

腈水合酶高产菌株的诱变选育及发酵条件的优化

用微波和化学诱变剂A对菌株Nocardiasp.DT06进行了复合诱变,经过多次传代实验,获得一株稳定高产腈水合酶的菌株Nocardiasp.DT7879。在优化的发酵培养条件下,即250 mL三角瓶中培养基装量25 mL、接种量9%、培养基的初始pH值7.5、摇床转速220 r.min-1、培养温度28℃、发酵周期88 h,其产酶活性为5198 U.mL-1,较出发菌株提高了84.7%。

腈水合酶生产菌工业发酵技术研究

研究了腈水合酶生产菌的培养基组成、灭菌操作、种子质量控制以及pH值控制等方面对工业发酵的影响,培养基各主要成分的最佳含量为:氯化钴16×10-6,尿素0.90%,酵母膏0.70%,味精0.85%,葡萄糖2.2%,确定了科学的灭菌操作方法、种子质量控制方法以及pH值调控方法,并在生产实际应用中取得了显著效果,发酵周期可缩短20h以上,酶活提高40%以上。

腈水合酶的发酵研究

Nocardia spl63#在含有脲和钴的培养基中发酵生产腈水合酶,可以催化丙烯腈水合为丙烯酰胺。调节培养条件使发酵液的酶活力达到815万u/m1。温度28-30℃,反应体系呈中性酶活性很高并且稳定。

灭菌温度对产腈水合酶菌发酵生产的影响

本文通过菌株Nocardia.sp.163在发酵罐培养时培养基灭菌温度的试验,发酵培养42h后,发酵液通过离心和微滤膜清洗降低色度后,分批投入水合反应釜进行水合反应,计算生产一吨丙烯酰胺消耗发酵液量;筛选到一优良的消毒温度在该温度消毒后培养的发酵液酶活提高了67%,在催化丙烯腈水合生成丙烯酰胺的反应中消耗发酵液的量降低了32%。

腈水合酶生产菌工业发酵技术研究

丙烯酰胺是一种重要的有机化工原料．以它为中间体合成的产品有上百种，其聚合物或共聚物可用作化学灌浆物料、土壤改良剂、絮凝剂、纤维改性剂和涂料等。目前丙烯胺酰的生产工艺有丙烯腈硫酸化学水解法、丙烯腈以还原铜为金属催化剂的化学水合法和丙烯腈以腈水合酶为生物催化剂的微生物法。微生物法比化学法更具有优势．丙烯腈水合反应的条件温和．在常温常压下进行．反应后丙烯腈的转化率高达99．99％，反应液中的丙烯腈的含量可控制在50ppm以下．不需要去除和回收残余丙烯腈。产品的丙烯腈含量指标就完全合格，省去了残留丙烯腈去除和回收工艺流程．减少了设备投资、能耗和环境污染。且生物催化剂具有成本低、催化效率和选择性高的特点，因此微生物法获得的丙烯酰胺产品中杂质含量低．产品活性高．特别适合生产高分子量的聚合物。微生物法丙烯酰胺生产技术以其众多的优点成为了第三代丙烯酰胺生产技术。并在实际生产中得到了广泛应用．目前单线生产能力在2万t/a以上．