肝细胞癌 nm23-HI mRNA 表达水平及其临床意义

探讨肝细胞癌ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ表达水平与临床病理特征的联系。方法通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术检测５６个外科手术切除的肝细胞癌及癌旁肝组织中ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ水平，并分析其表达与肿瘤大小、血清ＡＦＰ值、肝内转移或门静脉癌栓、包膜侵犯、ＴＮＭ分期等的关系。结果肝癌组织ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ表达水平与肝内转移和／或门静脉形成癌栓，以及ＴＮＭ分期呈负相关，在ｍＲＮＡ低表达组，６６．７％的肝癌伴肝内转移和／或门静脉癌栓，７３．３％为ＴＮＭⅢ、Ⅳ期肝癌。结论ｎｍ２３┐ＨＩ基因低表达在肝癌浸润过程中具有一定作用，ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ表达水平下降可作为肝内转移的标志。

大肠癌组织nm23-HI p53 PCNA的表达

目的研究大肠癌组织ｎｍ２３ＨＩ，ｐ５３，ＰＣＮＡ的表达意义及其与肿瘤浸润转移的关系．方法１９９１年３月～１９９６年５月采用免疫组织化学方法检测７４例（男３９例，女３５例，平均年龄５３２岁，术前未做化疗及放疗）大肠癌组织（石蜡切片，厚４μｍ）中ｎｍ２３Ｈ１，ｐ５３，ＰＣＮＡ以及Ⅳ型胶原的表达情况．结果大肠癌ｎｍ２３Ｈ１，ｐ５３，ＰＣＮＡ的阳性率分别为７１６％、５２７％和８１１％．ｎｍ２３Ｈ１低表达与淋巴结转移有关（Ｐ＜００５），在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１的表达无明显差异；ｐ５３和ＰＣＮＡ过表达与浸润程度和淋巴结转移有关（Ｐ＜００５）．结论ｎｍ２３ＨＩ低表达可作为预测大肠癌转移的较好指标．ｐ５３过表达在浸润转移过程及细胞增殖中均起重要作用．

nm23-H1基因对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的抑制作用

目的:研究转染nm23-H1基因对体外培养A549细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机理。方法:构建nm23-H1基因的真核表达载体,转染到体外培养的人肺腺癌细胞A549中,通过G418筛选出稳定表达克隆,RT-PCR及免疫组化检测nm23-H1在细胞内的表达情况。绘制细胞生长曲线检测nm23-H1基因对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞周期,原子力显微镜观察细胞膜表面伪足的超微结构。结果:转染后的肿瘤细胞能稳定表达nm23-H1基因,抑制了肿瘤细胞的增殖。nm23-H1基因没有诱导细胞凋亡但使G1期细胞增加而S期细胞减少,停滞于G0期。转染nm23-H1基因后细胞边缘的伪足减少。结论:nm23-H1基因能抑制体外培养的A549肿瘤细胞的增殖,可能通过改变细胞表面结构减弱细胞的侵袭能力。

COX-2抑制剂(NS-398)对结肠癌HT-29细胞体外侵袭力的作用及CD44v6、nm23-H1基因的调节

目的研究NS-398对结肠癌HT-29细胞体外侵袭力的作用及CD44v6、nm23-H1基因的调节。方法通过流式细胞仪检测COX-2和CD44v6的表达,MTT检测细胞活性,改良的Boyden小室法观察HT-29细胞侵袭重组基底膜的能力,RT-PCR观察nm23-H1mRNA的表达。结果HT-29细胞COX-2表达阳性,0.1、1.0、10μmol/L NS-398可显著抑制HT-29细胞侵袭重组基底膜的能力,且上述作用与NS-398的毒性作用无关。NS-398可下调CD44v6的表达,上调nm23-H1mRNA的表达。结论NS-398具有抑制结肠癌细胞HT-29体外侵袭力的作用,下调CD44v6的表达和上调nm23-H1mRNA的表达可能是其作用机制。

肝细胞癌组织中MMP-9,CD_(44)V_6与nm23-H_1表达的相关性及意义

目的检测肝细胞癌(HCC)组织中MMP-9,CD44V6及nm23-H1的表达水平,了解HCC中MMP-9,CD44V6与nm23-H1表达的相关性及其与HCC侵袭转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例HCC中MMP-9,CD44V6及nm23-H1的表达。结果侵袭转移倾向高危组的35例HCC标本中,MMP-9,CD44V6及nm23-H1表达的强阳性率分别为71.4%(25/35),68.6%(24/35)和25.7%(9/35);侵袭转移倾向低危组的25例HCC标本中,MMP-9,CD44V6及nm23-H1表达的强阳性率分别为40.0%(10/25),36.0%(9/25)和60.0%(15/25);MMP-9及CD44V6的表达与HCC侵袭转移倾向呈正相关性(P<0.01),nm23-H1的表达与HCC的侵袭转移倾向呈负相关性(P<0.01),MMP-9与CD44V6的表达呈正相关性,而MMP-9,CD44V6与nm23-H1的表达呈负相关性。结论MMP-9,CD44V6及nm23-H1的表达可能作为HCC预后及转移潜能判断的指标。

nm23-H_1基因在急性白血病中表达及与多药耐药关系

①目的 检测急性白血病病人nm23- H1 基因表达,探讨其与病人预后和多药耐药的关系。②方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术,检测46 例初诊急性白血病病人及15 例正常对照组骨髓细胞nm23 H1 表达,同时检测其多药耐药基因MDR1及MRP表达。③结果 正常骨髓细胞nm23 H1 表达阴性;46 例急性白血病病人中,43例有nm23- H1 表达,且其表达水平与MDR1 及MRP 表达水平无明显相关性(r= 0.39、0.21,P>0.05)。④结论 nm23 -H1 高表达与急性白血病发生有关,但与MDR1及MRP基因的表达无关。

nm23-H1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建

目的:制备用于nm23-H1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的质粒标准品。方法:通过PCR扩增出目的片断,纯化后T-A连接至pMD18-T载体,转化宿主菌E.coliDH5α,获得阳性克隆;通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确;大量抽提重组质粒,测定其拷贝浓度,10倍稀释成梯度标准品,并进行荧光定量PCR检测分析。结果:nm23-H1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上,获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性。梯度浓度标准质粒的荧光定量PCR结果显示,循环阈值(C t)与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系。结论:成功构建了nm23-H1基因实时荧光定量PCR质粒标准品。

nm23-H1与Tiam1在睑板腺癌中的表达及意义

目的:检测睑板腺癌组织中nm23-H1及Tiam1的表达,探讨其与临床病理特征的关系,评价其临床意义。方法:睑板腺癌标本34例及癌旁正常组织34例,应用Western blot法及qRT-PCR检测nm23-H1和Tiam1蛋白及mRNA的表达,观察其蛋白水平表达与临床病理特征的相关性,观察其与睑板腺癌术后复发的关系。结果:nm23-H1蛋白及mRNA在睑板腺癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.05),Tiam1蛋白及mRNA在睑板腺癌组织中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。nm23-H1及Tiam1蛋白表达水平与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤分化程度有相关性(P<0.05),nm23-H1及Tiam1与睑板腺癌术后复发率具有相关性,在复发的睑板腺癌中nm23-H1及Tiam1表达高于未复发者(P<0.05)。结论:nm23-H1和Tiam1表达水平与睑板腺癌的临床病理特征具有相关性,nm23-H1和Tiam1高表达提示睑板腺癌患者不良预后。

Ad-GFP-nm23-H1裸鼠体内抑制人恶性黑色素瘤A375作用的研究

目的探讨Ad-GFP-nm23-H1对人恶性黑素瘤裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,从而为后期nm23-Hl基因和腺病毒载体用于人恶性黑色素瘤及其它肿瘤的基因治疗提供一定的理论和方法。方法在裸鼠真皮下建立人A375细胞黑色素瘤动物模型后,设对照组及109PFU/ml、1010PFU/ml的Ad-GFP-nm23-Hl干预组。经Ad-GFP-nm23-Hl干预治疗后,取瘤体称重,计算抑瘤率,通过光镜进行瘤组织病理形态学观察。结果对照组及109PFU/ml、1010PFU/ml的Ad-GFP-nm23-Hl干预组的平均肿瘤体积和瘤重分别为:1.4129±0.4832mm3、1.1914±0.3304mm3、0.75±0.2548mm3和1.924±0.539g、1.655±0.5754g、1.195±0.2639g。与另两组比较,1010PFU/ml的Ad-GFP-nm23-Hl干预组对A375具有明显的抑制作用。结论1010PFU/ml的Ad-GFP-nm23-Hl干预组对裸鼠移植A375实体瘤有明显的抑制作用。

nm23-H1基因对舌癌细胞株化疗敏感性的影响体外实验

目的 通过nm23-H1的转化及导入BcaCD85细胞株,观察nm23-H1对BcaCD885细胞株化疗敏感性的影响。方法 完成细胞培养和基因转染后,MTT法观察nm23-H1对BcaCD885化疗敏感性影响。结果 转染前BcaCD885细胞株对ADM、5-FU、MTX的化疗敏感性无显著差异。但转染后的BcaCD885细胞株对CDDP明显增敏。结论 nm23-H1可能通过特异性地影响细胞内的能量交换过程来达到对CDDP化疗增敏的效果。

Transfection of Nm23-H1 Gene Inhibited the Metastatic Potential of Human High-metastatic Large Cell Lung Cancer L9981

Background and objective Invasion and metastasis is not only the malignant phenotypes of lung cancer but also the main cause of death. Elucidating the molecular mechanism of

转移与非转移性食管鳞癌PCNA、p53、nm23-H1表达及临床病理对比研究

目的：探讨影响食管鳞癌（ESCC）淋巴结转移（LNM）的临床病理及生物学相关因素。方法：应用免疫组化S—P法检测60例食管鳞癌（LNM阳性组与阴性组各30例）标本中PCNA、p53、nm23-H1蛋自表达，并对两组病例的检测结果及相关临床病理资料作对比研究。结果：比较转移组与非转移组ESCC，发现侵袭肌层与穿透肌层的癌LNM率分别是37．1％和68％，P=0．018；Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级鳞癌的LNM率分别是27．8％、45．5％和75％，P=0．013；Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期癌的LNM率分别是36．4％和66．7％，P=0．020；p53阳性与阴性癌的LNM率分别是68．4％和18．2％，P〈0．0001；nm23-HI阳性与阴性癌的LNM率分别是36．1％和70．8％。P〈0．001。Pearson’s相关分析显示：LNM与癌侵袭深度（rs=0．304）、肿瘤分期（rs=0．302）、p53过表达（rs=0．456）呈显著正相关，P〈0．05；与癌分化程度（rs=-0．377）和nm23-HI（rs=-0．400）阳性表达呈显著负相关，P〈0．03。结论：癌的分化程度、侵袭深度、肿瘤分期、p53过表达和nm23-H1阴性表达是影响ESCCLNM的重要因素。p53和nm23-HI的不同表达在LNM中可能起协同作用，联合检测p53和nm23-HI的表达，可作为预测ESCC预后的参考指标。

Nm23-H1基因沉默后K562细胞中肿瘤相关基因的差异表达

目的:应用基因芯片技术,检测nm23-H1基因沉默后K562细胞中与肿瘤相关基因的差异表达情况,探讨nm23-H1基因沉默对K562细胞生物学行为变化的分子作用机制。方法:采用Trizol一步法抽提K562-siNM23细胞和K562-siNC细胞总RNA;用RNA扩增试剂盒进行双链cDNA的合成及荧光标记cRNA的合成,并纯化cRNA。与功能分类基因芯片杂交反应后,用计算机分析比较2种细胞中与肿瘤相关基因的差异性表达。结果:共筛选出表达差异性基因14个,其中表达上调基因9个(ratio>2);表达下调基因5个(ratio<0.5)。结论:nm23-H1基因沉默后,引起显著变化的基因与细胞周期调控和抗凋亡信号转导等生物学功能相关。

nm23-H1、MMP-2在贲门癌中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1和基质金属蛋酶MMP-2在贲门癌中表达及临床意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例贲门癌与25例正常贲门组织中nm23-H1和MMP-2表达。结果 nm23-H1在贲门癌与正常贲门组织的阳性表达率分别为28.0%(14/50)和84.0(21/25),其表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、分化程度无关(P>0.05)。MMP-2在贲门癌与正常贲门组织的阳性表达率分别为74.0%(37/50)和24.0%(6/25),其表达与肿瘤淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤浸润深度、分化程度无关(P>0.05)。结论 nm23-H1和MMP-2与贲门癌的临床病理特点浸润、转移密切相关,联合检测二者可作为判定贲门癌生物学行为的参考指标。

The N-Terminal Kinase Suppressor of Ras (KSR1) Complex Exhibits Nucleoside Diphosphate Kinase (NDPK) Activity

Background and objective Lung cancer has not only become the most frequent malignant cancer which is increasing fastest among all the tumors, but also become the rst killer

Comparative Proteomics Study on Human High-metastatic Large Cell Lung Cancer Cell Lines with Differential Metastatic Potential

Background and Objective Lung cancer is not only the most dangerous threating tumor to humans health and life, but also a malignant tumor with poor prognosis. It has been