新橙皮苷对化疗损伤骨髓间充质干细胞的保护作用研究

目的探讨新橙皮苷(Neohesperidin)对五氟尿嘧啶(5-FU)化疗损伤大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的保护作用。方法全骨髓贴壁培养法原代培养BMSCs,取P3代细胞进行实验,并将实验分为正常对照组、模型组和给药组。用25μg·mL^(-1)5-FU作用于BMSCs作为模型组,用12.5μmol·L^(-1)和25μmol·L^(-1)新橙皮苷溶液分别干预25μg·mL^(-1)5-FU损伤的BMSCs细胞作为给药组,并设常规培养的BMSCs作为正常对照组。分别用CCK-8法检测细胞存活率,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞早期凋亡率,Western Blot法检测Caspase-3蛋白的表达水平,一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒检测iNOS、TNOS的含量。结果 12.5μmol·L^(-1)和25μmol·L^(-1)新橙皮苷对BMSCs无细胞毒作用且对化疗损伤的BMSCs有较好的保护作用;与正常对照组比较,模型组细胞早期凋亡率显著升高(P<0.01),Caspase-3显著上调(P<0.01),iNOS和TNOS活力明显下降(P<0.01)。与模型组比较,12.5μmol·L^(-1)和25μmol·L^(-1)给药组BMSCs细胞的早期凋亡率显著降低(P<0.05),Caspase-3显著下调(P<0.05),iNOS和TNOS活力明显上升(P<0.05)。结论新橙皮苷可能通过下调Caspase-3表达来抑制细胞凋亡,从而保护化疗损伤的BMSCs细胞。

脯氨酸催化柚皮苷合成新橙皮苷工艺研究

以脯氨酸替代四氢吡咯和乙酸,开发一种新橙皮苷的合成方法。根皮乙酰苯-4′-β-新橙皮糖苷∶脯氨酸∶异香兰素的摩尔比为1∶1∶1.1,以无水乙醇为溶剂,9 0℃下反应1.5h,工艺收率达95%以上,成品纯度大于96%。该工艺收率高,产品质量好。同时,由于脯氨酸为固体催化剂,在生产过程中不会挥发损失,因此生产操作简单,更适用于工业化大生产。