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黄芪甲苷通过影响NogoA/NgR和cAMP/PKA通路改善APP/PS1转基因小鼠认知功能 被引量:4
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作者 于婧文 郭敏芳 +6 位作者 李梦迪 李娜 孟涛 张海飞 宋丽娟 马存根 尉杰忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1188-1198,共11页
目的:观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ, AST Ⅳ)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)模型小鼠认知功能障碍和病理改变的影响,并探讨可能的调控机制。方法:将APP/PS1转基因(APPswe/PSEN1d E9)小鼠随机分为AD+AST Ⅳ组和AD组,并以C57BL/... 目的:观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ, AST Ⅳ)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)模型小鼠认知功能障碍和病理改变的影响,并探讨可能的调控机制。方法:将APP/PS1转基因(APPswe/PSEN1d E9)小鼠随机分为AD+AST Ⅳ组和AD组,并以C57BL/6野生型(wild-type, WT)小鼠作为对照组(WT组),灌胃治疗两个月(n=8)。应用Morris水迷宫和Y迷宫实验评价小鼠空间认知功能(n=8),尼氏染色检测神经元数量与形态,免疫荧光染色观察神经元核抗原(neuronal nuclear antigen, NeuN)和β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein, Aβ)水平(n=4),Western blot法检测全脑组织中神经突生长抑制因子A(neurite outgrowth inhibitor A, NogoA)、Nogo-66受体(Nogo-66 receptor, NgR)、p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor, p75NTR)、含富亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域蛋白1(leucine rich repeat and immunoglobin-like domain-containing protein-1, LINGO-1)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)和蛋白激酶A(protein kinase A, PKA)的表达(n=4)。结果:AST Ⅳ能够显著缓解APP/PS1小鼠的认知功能障碍,提高其学习、记忆和探索功能。与WT组相比,APP/PS1小鼠大脑皮质区和海马区Aβ沉积增加(P<0.01),尼氏小体丢失严重(P<0.05或P<0.01),神经元数量减少(P<0.05);而AST Ⅳ可以显著减少Aβ沉积(P<0.05),减少尼氏小体丢失(P<0.05),增加神经元数量(P<0.05)。与WT组相比,APP/PS1小鼠脑组织NogoA、NgR、p75NTR和LINGO-1表达显著增加(P<0.05或P<0.01),cAMP和PKA表达显著减少(P<0.05或P<0.01);而AST Ⅳ可以显著抑制NogoA、NgR、p75NTR和LINGO-1表达(P<0.05或P<0.01),增加cAMP和PKA表达(P<0.05)。结论:AST Ⅳ通过抑制NogoA及NgR/p75NTR/LINGO-1受体复合物的表达,并上调cAMP/PKA通路,减少APP/PS1小鼠脑组织中Aβ沉积,减轻神经元损伤,从而改善认知功能和缓解学习障碍。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 阿尔茨海默病 nogoa/ngr信号通路 cAMP/PKA信号通路
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法舒地尔通过抑制NogoA/NgR信号通路减轻H_(2)O_(2)诱导的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞凋亡并增强突触可塑性 被引量:1
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作者 郭敏芳 张慧宇 +7 位作者 于婧文 章培军 王玉银 魏文悦 宋丽娟 柴智 尉杰忠 马存根 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期625-631,共7页
目的探讨法舒地尔(Fasudil)对H(2)O_(2)诱导的SY5Y人神经母细胞瘤细胞凋亡和突触可塑性的影响及其机制。方法细胞分为PBS对照组、250μmol/L H(2)O_(2)处理组和250μmol/L H(2)O_(2)联合15μg/mL Fasudil处理组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞... 目的探讨法舒地尔(Fasudil)对H(2)O_(2)诱导的SY5Y人神经母细胞瘤细胞凋亡和突触可塑性的影响及其机制。方法细胞分为PBS对照组、250μmol/L H(2)O_(2)处理组和250μmol/L H(2)O_(2)联合15μg/mL Fasudil处理组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫荧光细胞化学染色检测神经突生长抑制因子A(NogoA)、NogoA受体(NgR)和突触小泡蛋白(Syn)的表达,Western blot法检测NogoA、NgR、p75神经营养因子受体(p75NTR)和含富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白结构域的Nogo相互作用蛋白1(LINGO-1)、Syn和突触后致密区蛋白95(PSD-95)的表达。结果与PBS组比较,H(2)O_(2)组细胞活性降低,细胞凋亡率升高,Fasudil处理可显著提高细胞活性,降低细胞凋亡率。与H(2)O_(2)模型组比较,Fasudil处理能使Syn和PSD-95的表达增加。与PBS组比较,H(2)O_(2)组NogoA及其受体复合物NgR/p75NTR/LINGO-1的表达明显增加,而Fasudil处理可以抑制NogoA及其受体复合物NgR/p75NTR/LINGO-1的表达。结论Fasudil可能通过抑制NogoA/NgR信号通路的激活,从而减轻H(2)O_(2)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡以及增强突触的可塑性。 展开更多
关键词 法舒地尔(Fasudil) 神经突生长抑制因子A(nogoa) Nogo受体(ngr) 细胞凋亡 突触可塑性
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成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA/NgR/RhoA信号通路蛋白表达的影响
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作者 胡艳 郭铁成 +3 位作者 张香玉 鲁银山 张秀娟 田峻 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1409-1415,共7页
目的:观察成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA、NgR、RhoA蛋白表达的影响。方法:90只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PAS组,每组又分为7d、14d、28d三个亚组(n=10)。模型组和PAS组大鼠采用Longa线栓法制作MCAO... 目的:观察成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA、NgR、RhoA蛋白表达的影响。方法:90只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PAS组,每组又分为7d、14d、28d三个亚组(n=10)。模型组和PAS组大鼠采用Longa线栓法制作MCAO模型,假手术组除不插入线栓外,其余操作与模型组和PAS组相同。PAS组于术后第1d开始给予0.05Hz、共90对脉冲的PAS治疗,每日1次,每次持续30min;模型组和假手术组不予任何干预措施,各时间点治疗结束后取缺血半暗带区脑组织,Western Blot和免疫荧光检测缺血半暗带NogoA、NgR、RhoA蛋白的表达和分布情况。结果:术后第7、14、28d,假手术组NogoA、NgR、RhoA蛋白的表达水平均最低,模型组在各时间点NogoA、NgR、RhoA含量均较假手术组明显升高(P<0.05),PAS组术后各时间点NogoA、NgR、RhoA的含量高于假手术组(P<0.05),低于同时间点模型组(P<0.05),PAS组NogoA、NgR、RhoA蛋白在术后28d的含量低于同组第7d、14d(P<0.05)。结论:PAS可抑制NogoA/NgR/RhoA信号通路蛋白的表达,可能是PAS促进脑缺血大鼠神经再生,改善脑缺血大鼠的感觉运动功能障碍的内在分子机制之一。 展开更多
关键词 脑缺血 成对关联刺激 nogoa ngr RHOA
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脊髓损伤大鼠NogoA、NgR mRNA和蛋白的时相表达及电针治疗时间窗 被引量:5
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作者 闵友江 孙洁 +5 位作者 贾永忠 曾学波 余弯 姚海华 周璇 周建华 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第6期621-628,共8页
目的探讨影响脊髓损伤轴突生长的NogoA、NgR时相表达及电针治疗脊髓损伤的时间窗效应。方法 144只Sprague-Dawley雌性大鼠随机分成假手术组(A组,n=48)和造模组(n=96)。造模组大鼠采用改良Allen法制作脊髓损伤大鼠模型,随机分为模型组(B... 目的探讨影响脊髓损伤轴突生长的NogoA、NgR时相表达及电针治疗脊髓损伤的时间窗效应。方法 144只Sprague-Dawley雌性大鼠随机分成假手术组(A组,n=48)和造模组(n=96)。造模组大鼠采用改良Allen法制作脊髓损伤大鼠模型,随机分为模型组(B组,n=48)和电针组(C组,n=48)。C组电针大椎、腰阳关及双侧次髎、足三里,选择疏密波,持续20 min,每天1次。分别在造模后1 d、7 d、14 d介入电针治疗,每个介入治疗点大鼠随机再分成2个亚组,分别持续治疗7 d和14 d。A组于术后1 d、3 d、7 d、14d、21 d、28 d,B组和C组于造模后在相应时间点处死大鼠提取脊髓组织,所有大鼠处死前进行BBB评分。各组每个时间点随机选取4份样本,应用逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)和Western blotting检测损伤脊髓不同时间段NogoA、NgR mRNA和蛋白的表达。结果 B组术后14 d BBB评分开始有所提高,直至28 d,评分较术后1 d、3 d、7 d提高(P<0.05)。C组术后1 d介入治疗7 d,术后7 d、14 d介入治疗7 d和14 d,大鼠BBB评分较相应时间点B组均提高(P<0.05);术后7 d和14 d介入治疗的评分要高于术后1 d介入的评分(P<0.05);不同时间点介入电针治疗7 d与治疗14d评分比较无显著性差异(P>0.05)。B组NogoA、NgR mRNA和蛋白在造模后呈逐渐升高趋势,21 d达到高峰;不同时间点,B组NogoA、NgR mRNA和蛋白表达均明显高于A组(P<0.01)。C组电针介入治疗后,除术后1 d介入治疗7 d的NogoA mRNA(P>0.05)表达外,其他时间点NogoA mRNA和蛋白的表达较相应时间点的模型组均下降(P<0.05);术后14 d介入治疗NogoA、NgR mRNA和蛋白的表达大多要低于术后1 d介入治疗(P<0.05);术后14 d介入治疗与术后7 d介入治疗以及术后7 d介入治疗与术后1 d介入治疗之间比较,NogoA、NgR mRNA和蛋白的表达都无显著性差异(P>0.05);术后不同时间点介入电针治疗7 d与14 d NogoA、NgR mRNA和蛋白表达之间无显著性差异(P>0.05)。结论电针能改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能,可能与电针抑制脊髓损伤后NogoA、NgR mRNA和蛋白的表达有关;且电针早期介入治疗有效,恢复期介入治疗效果更佳。 展开更多
关键词 脊髓损伤 电针 时间窗效应 nogoa ngr 大鼠
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Olfactory ensheathing cell transplantation and inhibition of NogoA,NgR and RhoA expression in the damaged zone to ameliorate spinal cord injury 被引量:2
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作者 Puwei Yuan Xijing He +2 位作者 Guoyu Wang Yangquan Hao Deyu Liu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第13期999-1003,共5页
BACKGROUND: Olfactory ensheathing cell (OEC) transplantation promotes repair of spinal cord injury. Neural regeneration inhibits binding of the myelin protein Nogo to its receptor (NgR), activates downstream inhi... BACKGROUND: Olfactory ensheathing cell (OEC) transplantation promotes repair of spinal cord injury. Neural regeneration inhibits binding of the myelin protein Nogo to its receptor (NgR), activates downstream inhibitory signal RhoA, and leads to axonal degeneration. OBJECTIVE: To determine the relationship between OECs transplantation for spinal cord injury and NogoA, NgR, and RhoA protein expression in the damaged zone. DESIGN, TIME AND SETTING: A randomized, controlled, animal experiment was performed from September 2006 to May 2007 at the Key Laboratory of Environment and Genes in Xi'an Jiaotong University School of Medicine, China. MATERIALS: OECs were harvested from healthy, adult, male, Sprague Dawley rats aged 6 months. Mouse anti-rat NogoA, NgR, and RheA monoclonal antibodies were utilized for detection. METHODS: A total of 40 adult Sprague Dawley rats were randomly assigned to four groups: normal, model, OECs, and DF12, with 10 animals in each group. Transverse section spinal cord injury was established in the OECs and DF12 groups, followed by injection of 1μL OECs suspension (1×10^8/mL) or equivalent DF12 medium at 1 mm above and below the injury site. MAIN OUTCOME MEASURES: Immunohistochemistry and Western blot were utilized to detect NogoA, NgR, and RhoA expression in the spinal cord injury lesions. Morphological changes were observed by argyrophilia staining, and lower extremity function of the animals was assessed using Basso, Beattie, and Bresnahan scores. RESULTS: Eight weeks following OECs transplantation, a significant increase in new axons was observed in the OECs group, and nerve fibers crossed the injury site to repair spinal cord injury. Qualitative and quantitative results from the OECs group were superior to the model and DF12 groups. At 8 weeks after transplantation, Basso, Beattie, and Bresnahan scores were significantly greater in the OECs group compared with the model and DF12 groups (P 〈 0.01), but expression of NogoA, NgR, and RhoA protein was significantly decreased compared with the model and DF12 groups (P〈 0.05). CONCLUSION: OEC transplantation could inhibit NogoA, NgR, and RhoA expression in spinal cord injury lesions, thereby promoting repair of spinal cord injury. 展开更多
关键词 olfactory ensheathing cells nogoa ngr RHOA cell transplantation spinal cord peripheral nerve injury neural regeneration
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空肠弯曲菌脂多糖对大鼠脊髓髓鞘损伤的实验研究
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作者 叶素红 裘颖儿 +2 位作者 洪丽华 何忠平 方秀莲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期515-518,523,共5页
目的探讨空肠弯曲菌脂多糖(Cj-LPS)对大鼠脊髓髓鞘损伤的影响。方法 Wistar大鼠分为对照组(NC组)、脂多糖组(Cj-LPS组)和抗LPS组(Anti-LPS组)。NC组使用试剂为生理盐水混合完全弗氏佐剂(CFA);Cj-LPS组试剂则由Cj-LPS、CFA和生理盐水组成... 目的探讨空肠弯曲菌脂多糖(Cj-LPS)对大鼠脊髓髓鞘损伤的影响。方法 Wistar大鼠分为对照组(NC组)、脂多糖组(Cj-LPS组)和抗LPS组(Anti-LPS组)。NC组使用试剂为生理盐水混合完全弗氏佐剂(CFA);Cj-LPS组试剂则由Cj-LPS、CFA和生理盐水组成;抗LPS组试剂为特异性抗Cj-LPS IgG混合CFA。注射后第4周和第6周分别处死各组大鼠。光镜观察脊髓组织形态变化,RT-PCR检测神经营养因子-3(NT-3)及其受体TrkC和神经生长抑制因子NogoA及其受体NgR mRNA的表达。结果 Cj-LPS组大鼠出现脊髓髓鞘损伤,NT-3/TrkC mRNA的表达下降,NogoA/NgR mRNA的表达增加;与Cj-LPS组比较,抗LPS组脊髓髓鞘损伤减轻。结论 Cj-LPS可诱导大鼠脊髓髓鞘损伤,而抗LPS抗体可以改善由Cj-LPS诱导的大鼠脊髓髓鞘损伤。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 脂多糖 髓鞘 NT-3/TrkC nogoa/ngr
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补肾益髓方及其拆方调控实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠轴突再生抑制信号通路相关分子的实验研究 被引量:2
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作者 王蕾 安辰 +6 位作者 赵晖 薛冰 齐放 李君玲 金良韵 张楠 樊永平 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期200-211,共12页
目的观察补肾益髓方(Bushen Yisui formula,BSYSF)及其拆方补肾方(Bushen formula,BSF)和化痰活血方(Huatan Huoxue formula,HTHXF)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠轴突再生抑制信号通... 目的观察补肾益髓方(Bushen Yisui formula,BSYSF)及其拆方补肾方(Bushen formula,BSF)和化痰活血方(Huatan Huoxue formula,HTHXF)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠轴突再生抑制信号通路NogoA/NgR/RhoA/ROCK的调控作用。方法将雌性C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为正常对照组(normal control,NC)、模型组(model,MO)、醋酸泼尼松组(prednisone acetate,PA,6 mg/kg)、梓醇组(catapol,CA,40 mg/kg)、BSYSF组(生药3.02 g/kg)、BSF组(生药1.44 g/kg)、HTHXF组(生药1.57 g/kg),每组16只。用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein35-55,MOG35-55)免疫小鼠制备EAE模型。NC和MO组小鼠灌服蒸馏水,各治疗组予相应药物灌胃,每日1次,共40 d。免疫第25天和40天,分别取小鼠脑和脊髓。应用实时荧光定量-PCR(quantitative real time-PCR,qRT-PCR)检测NogoA、NgR、RhoA和ROCKⅡmRNA表达;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和蛋白质印迹(Western blotting,WB)法测定上述指标蛋白的表达。结果MO组小鼠脑和脊髓NogoA、NgR、RhoA和ROCKⅡmRNA和蛋白表达较NC组明显上调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。经BSYSF及其拆方BSF和HTHXF治疗后,NogoA、NgR、RhoA和ROCKⅡmRNA和蛋白的表达均有不同程度的降低,BSYSF组的上述指标差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论BSYSF及其拆方BSF和HTHXF均具有调节EAE小鼠轴突抑制因子NogoA/NgR及其信号通路RhoA/ROCK作用,并且BSYSF作用明显。上述结果为阐释BSYSF促进轴突再生的作用机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 补肾益髓方及其拆方 实验性自身免疫性脑脊髓炎 轴突再生 nogoa/ngr/RhoA/ROCK
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