RNA干扰和洛拉曲克对结直肠癌LOVO细胞胸苷酸合成酶表达及细胞增殖的影响

目的探讨下调胸苷酸合成酶（Ts）基因以及化疗药洛拉曲克对人结直肠癌LOVO细胞胸苷酸合成酶表达水平以及对细胞生长、凋亡的影响。方法构建针对人Ts基因的小分子干扰RNA（siRNA）和阴性对照，转染至LOVO细胞，利用RT—PCR和Westernblot技术观察沉默TS基因后其基因和蛋白表达水平的变化，MTF法检测细胞增殖情况；另联合洛拉曲克作用于LOVO细胞，观察两者对LOVO细胞的TS蛋白表达和细胞生长的影响。结果转染TSsiRNA后，LOVO细胞TSmRNA及蛋白的表达水平明显低于阴性对照组，细胞增殖速度亦低于对照组（均P〈0．05）。TSsiRNA联合洛拉曲克组细胞IC50值为（1．46±0．25）μm01／L，而阴性对照组和单用洛拉曲克组的IC50值分别为（6．81±0．31）μmol／L和（6．47±0．43）μmol／L。TSsiRNA联合洛拉曲克作用于细胞36h后。细胞凋亡指数为（62．12±0．89）％，高于单用TSsiRNA和洛拉曲克[（21．56±0．67）％和（40．51±0．83）％．均P〈0．05]。结论TSsiRNA可以下调人LOVO细胞中TS基因和蛋白的表达，使细胞生长速度减慢，凋亡增加，并可以增强洛拉曲克的药物敏感性。