碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌的耐药机制及抗菌药物的研究进展

碳青霉烯类抗生素是一类非典型的β-内酰胺类药物,是目前抗菌谱最广、杀菌活性最强的抗生素,然而随着此类抗生素的广泛使用,碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌(Carbapenem-resistant organism,CRO)在全球范围内扩散,导致临床选择抗菌药物越来越艰难,给临床治疗带来了新的挑战。本文从碳青霉烯酶的产生、通道蛋白的缺失、外排泵的过度表达、药物结合位点的改变、生物膜的形成等5个方面介绍了碳青霉烯类抗生素的耐药机制,以及对抗菌药物的选择进行综述,为临床预防和治疗CRO提供科学依据。

The Increased Frequency of Carbapenem Resistant Non Fermenting Gram Negative Pathogens as Causes of Health Care Associated Infections in Adult Cancer Patients

Background and Aim: Multi drug resistant Non fermenting gram negative bacilli (NFGNB) have emerged as a major cause of health-care associated infections especially in immunocompromised hosts. The aim of the study was to investigate the prevalence of NFGNB as a cause of health-care associated infections (HAI) in cancer patients and determine their resistance pattern. Patients and Methods: During the study period, 158 NFGNB isolates were collected. Microscan Walk Away 9 was used for identification and testing for the metallo-β-lactamases (MBLs) was done by Imipenem-EDTA combined disk synergy test (CDST-IPM). Results: NFGNB represented 29.0% of infections caused by gram negative organisms. Carbapenem resistance, the multi-drug resistant (MDR) phenotype, and MBL production were documented in 70%, 63%, and 59% of NFGNB isolates, respectively. MDR-NFGNB rates were significantly higher among hospitalized patients, medical department and those with longer duration of hospital stay (p = 0.034, 0.026, 0.019;respectively) than non MDR-NFGNB. Conclusion: A high level of carbapenem and multi-drug resistance were detected among the non-fermenter pathogens isolated from hospitalized cases and were more frequently encountered in high risk adult cancer patients requiring longer duration of hospitalization. The MDR-NFGNB are constituting important causes of health-care associated infections in cancer patients.

非发酵菌鉴定及耐药性分析

目的 了解非发酵菌感染情况及耐药特点 ,为临床正确合理选用抗菌药物 ,延缓和减少医院感染的耐药菌株产生提供科学依据。方法 对本院 1999年 1月～ 2 0 0 1年 12月各类临床标本培养分离出的 6 6 6株非发酵菌进行分析。结果 在分离到的 4 2 72株致病菌中 6 6 6株为非发酵菌 ,经耐药性分析提示 :非发酵菌对头孢一代的耐药率达90 94 % ,对阿莫西林和氨曲南的耐药率分别为 86 88%、4 4 38%。结论 非发酵菌对抗生素的耐药性已发展到一个新的高峰 ,提示临床医生应根据病人的病情 ,结合药敏试验结果对“菌”下药 。

803株革兰氏阴性杆菌的来源组成及耐药性分析

分析我院 1997～ 1999年临床分离的 80 3株革兰氏阴性杆菌的来源组成及主要革兰氏阴性杆菌的耐药状况。用 VITEK- AMS32鉴定细菌 ,药敏试验采用 AMS专配试验卡。结果分离率居前五位的革兰氏阴性杆菌是大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、乙酸钙不动杆菌和阴沟肠杆菌。对革兰氏阴性杆菌耐药率最低的抗生素依次是亚胺培南 (10 % )、头孢他啶 (2 7% )、氨曲南 (30 % ) ;耐药率最高的抗生素是氨苄青霉素 (90 % )、四环素 (78% )、头孢唑林 (73% )。结论 :大肠埃希氏菌是临床标本中最常见的革兰氏阴性杆菌 ,亚胺培南、头孢他啶和氨曲南对革兰氏阴性杆菌的耐药率最低。

重症监护病房下呼吸道感染中革兰氏阴性杆菌分布及耐药分析

目的探讨G-杆菌在ICU病人下呼吸道感染分布及耐药特点。方法用API20E细菌鉴定系统对ICU送检的痰标本进行细菌分离鉴定,用ATBG-5药敏卡行20种抗感染药物的敏感试验。ESBLs检测采用双纸片协同试验。结果ICU下呼吸道感染G-杆菌中位于前6位的菌株分别是:鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌。复数菌感染率为24.2%。所有G-杆菌耐药率均高,产ESBLs者耐药率更高。碳青霉烯类抗生素除对嗜麦芽窄食假单胞菌天然耐药外,对大多数G-杆菌仍敏感。结论ICU下呼吸道感染的G-杆菌耐药情况严重。临床医生应熟悉其病原菌分布及耐药特点。

1998—2005年我院临床分离非发酵革兰阴性杆菌耐药性分析

目的了解1998—2005年我院临床分离非发酵革兰阴性杆菌的分布和耐药性。方法 MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定和药敏系统从我院临床标本中分离的12700株非发酵革兰阴性杆菌进行鉴定和药敏试验。结果非发酵革兰阴性杆菌前4位依次是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和洛菲不动杆菌。非发酵革兰阴性杆菌对11种抗菌药的耐药率均呈上升趋势,尤其是铜绿假单胞菌对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、庆大霉素和妥布霉素,鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率上升明显。洛菲不动杆菌耐药率仍很低。嗜麦芽窄食单胞菌对12种常用抗菌药物呈现多重耐药,除对环丙沙星和复方磺胺甲嗯唑耐药率较低外,其余均在42.9%～100%。结论铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌是多重耐药且耐药率高的病原菌,应根据药敏试验结果选用抗菌药物。

239株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

检测超广谱β-内酰胺酶(extendedspectrumβ-lactamases,ESBLs)在革兰阴性杆菌中的表达及耐药特点,为临床积累经验。方法:应用双纸片协同试验和确证试验对239株革兰阴性杆菌进行ESBLs检测,同时分析药敏结果。结果:239株革兰阴性杆菌中ESBLs的检出率为20.5%(49/239),其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、其他菌种的检出率分别为23.3%(21/90)、33.3%(8/24)、16.0%(20/125)。产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类、第三代头孢菌素、β-内酰胺酶抑制药、β-内酰胺类、氨基糖苷类的耐药率分别为100%,57%～95%、19%～71%、0～90%、38%～90%,其中耐药率最低的为β-内酰胺类的亚胺培南-西司他丁(0)、β-内酰胺酶抑制药的哌拉西林-三唑巴坦(19%)和氨基糖苷类的阿米卡星(38%)。结论:不仅大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌可产ESBLs,其他革兰阴性杆菌也可产ESBLs;对产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染的治疗可首选亚胺培南-西司他丁。

我院2004—2016年3种非发酵革兰氏阴性杆菌耐药性分析

目的:为临床合理选用针对非发酵革兰氏阴性杆菌的抗菌药物提供参考。方法:收集青岛大学附属医院(以下简称"我院")2004年1月-2016年12月临床分离的铜绿假单胞菌(PA)、鲍曼不动杆菌(AB)、嗜麦芽窄食单胞菌(SM)的病原学资料,回顾性分析其对常用抗菌药物的耐药情况。结果:共检出PA 15 587株、AB 7 446株、SM 2 950株。PA对常用抗菌药物的耐药率虽有波动,但整体呈下降趋势;除亚胺培南外,PA对其他常用抗菌药物的耐药率均明显下降,其中对阿米卡星、庆大霉素的耐药率分别降至4.60%、7.48%。AB对大部分常用抗菌药物的耐药率均超过了40%,但对替加环素较为敏感(耐药率为0~4.03%)。SM对头孢哌酮钠舒巴坦钠的耐药率由2004年的3.03%上升至2016年的39.01%,但对复方磺胺甲噁唑、米诺环素、左氧氟沙星较为敏感。结论:我院检出的非发酵革兰氏阴性杆菌以PA为主。PA对大部分抗菌药物的耐药率呈下降趋势,AB的耐药情况严峻,SM对头孢哌酮钠舒巴坦钠的耐药率呈上升趋势。对上述3种非发酵革兰氏阴性杆菌敏感的药物包括阿米卡星、替加环素、米诺环素等,临床应根据药敏试验结果合理选用。

天津市总医院常见革兰氏阴性菌构成及耐药性分析

目的:了解天津医大总医院感染患者临床分离革兰氏阴性菌菌群分布及耐药性,为临床治疗提供试验依据。方法:按常规方法将患者血液、尿、粪便、分泌物等标本进行细菌培养和鉴定,部分抗生素采用kirby-Bauer法药敏试验。结果:共分离1727株细菌,G-杆菌1510株(87.43%),G+球菌217株(12.57%),分离率较高的细菌是铜绿假单胞菌(15.34%)、大肠埃希氏菌(13.49%)、肺炎克雷伯菌(12.50%)、鲍曼不动杆菌(10.02%)等。药敏试验显示:革兰氏阴性杆菌(除嗜麦芽窄食单胞菌外)对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那等抗菌药物敏感。结论:该院感染致病菌以G-杆菌占多数,G+球菌居次。

1595株革兰阴性杆菌对常用抗菌药物的耐药性分析

目的 :了解浙江绍兴地区临床分离的主要革兰阴性病原菌的耐药情况。方法 :采用Kirby -Bauer法对浙江省绍兴地区 2 0 0 2～ 2 0 0 3年分离的 15 95株革兰阴性杆菌进行药物敏感试验。采用双纸片法检测上述菌株产生的超广谱 β -内酰胺酶。结果 :上述革兰阴性杆菌最为敏感的抗生素为碳青酶烯类抗生素亚胺培南 (95 5 % ,965 / 10 10 )和美洛培南(94 6% ,95 4/ 10 0 8) ,其次是派拉西林 /他唑巴坦 (93 8% ,64 0 / 682 ) ,敏感性最低的抗生素为头孢噻吩 (15 8% ,2 3 8/15 0 8)。 2 5 4% (4 0 / 15 7)和 2 6 1% (4 1/ 15 7)的铜绿假单胞菌菌株对美洛培南和亚胺培南耐药。大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率高达 61 3 % (4 10 / 669)。 13 2 %的大肠埃希菌 (89/ 675 )和 18 4%的肺炎克雷伯菌 (80 / 43 6)为超广谱 β -内酰胺酶菌株 (ESBLs) ,但未发现铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌有ESBLs菌株。结论 :碳青酶烯类抗生素、派拉西林 /他唑巴坦仍是目前细菌耐药性较低抗生素。但本地区耐碳青酶烯类抗生素的铜绿假单胞菌株 ,以及大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs菌株已较为常见。

6511株临床分离需氧革兰阴性杆菌耐药性分析

目的 了解临床分离需氧革兰阴性杆菌的分布及其耐药性，为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法 应用TDR、MicroScan及Vitek2微生物鉴定系统，结合K-B法药敏试验对临床分离革兰阴性杆菌进行鉴定和药物敏感性测定，以SPSS软件对结果进行统计分析。结果 6511株革兰阴性杆菌中分离率居前五位的依次为铜绿假单胞菌（21．5％）、大肠埃希菌（16．1％）、肺炎克雷伯菌（12．4％）、鲍曼不动杆菌（10．0％）和阴沟肠杆菌（8．5％）；流感嗜血杆菌（5．9％）和副流感嗜血杆菌（5．0％）的分离率仪次于以上五种细菌的分离率。不同来源标本病原菌分布不同；呼吸道标本以铜绿假单胞菌为主，其余标本以大肠埃希菌为主。肠杆菌科细菌对美洛西林、头孢曲松、头孢派酮、头孢噻肟等β-内酰胺类药物的耐药率达47．9％～845％，对头孢哌酮／舒巴坦和关洛培南耐药率低于16．7％。铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌对关洛西林、复方新诺明和庆大霉素耐药率超过50％，对头孢派酮／舒巴坦及美洛培南敏感性高，耐药率低于6．8％；流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌对头孢呋肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟和头孢唑肟在内的头孢菌素敏感率最高，达86．8％～99．4％，而对青霉素和复方新诺明敏感率低于30％。结论 铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌是临床分离的主要需氧革兰阴性杆菌，且耐药性已十分严重；应加强耐药性监测，合理应用抗菌药物。

临床分离主要病原菌菌群分布及耐药分析

目的了解临床常见病原菌菌群分布及耐药情况,为临床经验用药提供参考依据。方法对临床分离病原菌进行统计和分析。结果共分离病原菌3586株,革兰阴性菌1953株,革兰阳性菌1433株。药敏结果显示,革兰阳性球菌对万古霉素、氨苄西林/舒巴坦、利福平高度敏感;革兰阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡星、敏感性较高。结论肠杆菌科大肠埃希菌耐药率高于肺炎克雷伯菌,非发酵菌的鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌显示多重耐药。

2005年天津总医院常见革兰阴性菌构成及耐药性分析

目的:了解2005年天津医科大学总医院感染患者临床分离革兰阴性(G-)菌菌群分布及耐药性,为临床治疗提供实验依据。方法:按常规方法将患者血液、尿、粪便、分泌物等标本进行细菌培养,细菌鉴定和药敏试验采用法国Bio-Merieux公司的VITEK AMS-60全自动微生物系统GNI+细菌鉴定卡及GNS-506和GNS-135药敏卡片,部分抗生素采用kirby-Bauer法药敏试验。结果:共分离2 055株细菌,其中G-杆菌1 574株(76.59%),G+球菌481株(23.41%),分离率较高的细菌是铜绿假单胞菌株(14.26%)、大肠埃希菌株(14.26%)、肺炎克雷伯菌(13.38%)、醋酸钙鲍曼复合不动杆菌(7.45%)等。药敏试验显示,常见的革兰阴性杆菌(除嗜麦芽窄食单胞菌外)对美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那等抗菌药物敏感。结论:本院感染致病菌以G-杆菌占多数,G+球菌居次,这些致病菌对不同抗生素有一定程度的耐药性,临床医生在治疗感染性疾病时应参考药敏试验,合理应用抗生素。

13种抗生素对革兰阴性杆菌抗菌活性及耐药性分析

目的 :研究临床常用抗生素的体外抗菌活性 ,分析其耐药特点 ,为临床合理用药提供可靠依据。方法 :对本实验室分离的 316株革兰阴性杆菌进行了体外药敏分析 ,并测定其产 β 内酰胺酶及超广谱 β 内酰胺酶的百分率。结果 :头孢哌酮 /舒巴坦 (舒普深CFS)的MIC90 为 8mg/L ;依米配能 /西司他丁 (泰能IPM)的MIC90 为 4mg/L ,耐药率分别为 8%和 16 % ;而其他抗生素的MIC90 为 12 8mg/L或 2 5 6mg/L ,耐药率均大于 30 %。细菌 β 内酰胺酶总检出率为 5 4 1% ,超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)检出率为 12 1%。结论 :CFS和IPM对临床常见革兰阴性杆菌耐药率较低。由于持续高产量 β 内酰胺酶及超广谱β 内酰胺酶的产生 ,不仅使得三代头孢菌素的耐药率较高 ,也使得庆大霉素、阿米卡星和环丙沙星等抗生素出现较为严重的交叉耐药现象。建议临床医生在三代头孢菌素的使用上应参考实验室报告 ,合理选择 ,避免耐药菌株的产生。

2016—2020年医院碳青霉烯类抗菌药物与常见碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌调查分析

目的调查分析2016—2020年医院碳青霉烯类抗菌药物与常见碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌(CRGNB)检出情况,为规范碳青霉烯类抗菌药物临床应用管理和耐药菌防控提供参考。方法对2016—2020年重庆医科大学附属永川医院碳青霉烯类抗菌药物使用与碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)、碳青霉烯耐药大肠埃希菌(CREC)、碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)、碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌(CRPA)的检出情况进行回顾性分析,并采用Spearman相关系数考察相关性。结果2016—2019年碳青霉烯类抗菌药物消耗量、使用强度均呈增加趋势,2020年有所下降;2016—2020年4种常见碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌检出中CRAB最高、CRPA次之、CREC最低;CRPA、CREC的检出与部分碳青霉烯类抗菌药物使用呈负相关性(r=-0.900,P<0.05)。结论医院碳青霉烯类抗菌药物使用呈上升趋势,CRGNB中鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药性较严重;目前仍需重视碳青霉烯类抗菌药物的临床应用管理,继续加强细菌耐药监测。

非发酵革兰阴性杆菌的临床调查与耐药性监测分析

目的了解我院2000-2004年非发酵革兰阴性杆菌的分布及耐药谱的变迁,以便于临床对非发酵细菌感染的监控与治疗。方法采用VITEK-32型微生物全自动分析仪进行菌种鉴定及药敏测试, 部分菌株药敏测试采用KB法。结果 5年间从临床标本中共分离出非发酵革兰阴性杆菌1 407株,占临床分离菌的34．13％。其中假单胞菌属的分离占绝对优势。对各类常见抗生素的药敏监测结果显示:醋酸钙-鲍曼复合不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和铜绿假单胞菌的耐药率及多重耐药率均呈明显上升趋势。所监测的各类抗生素以喹诺酮类抗生素环丙沙星对三种病原菌的敏感率下降最为明显。非发酵革兰阴性杆菌中嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性最强,只有复方新诺明和阿米卡星的敏感率在50％以上。醋酸钙-鲍曼复合不动杆菌对碳氢霉希类抗生素亚胺培南敏感率最高,始终位居首位。铜绿假单胞菌则是对亚胺培南和头孢他啶的敏感率较高。结论非发酵革兰阴性杆菌已成为医院感染的重要病原菌之一。日常工作中应加强对非发酵革兰阴性杆菌感染的预防,对于感染的治疗要合理选用抗生素以提高治愈率。

基层医院革兰阴性杆菌1309株的耐药性变迁

目的:分析革兰阴性杆菌的耐药变迁,避免临床抗生素的滥用。方法:回顾分析临床分离的1 309株革兰阴性杆菌的分布及耐药性变迁。结果:革兰阴性杆菌主要来源于伤口分泌物、中段尿液和呼吸道的痰液,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为主,细菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星耐药率低,对氨苄青霉素、哌拉西林和一、二代头孢菌素类耐药率高,细菌耐药率呈逐年上升趋势。结论:革兰阴性杆菌对常用抗生素的耐药性呈上升趋势,医院应加强对其耐药性的监测,减少耐药菌株的产生。

214株非发酵菌的临床分布和耐药性分析

目的 了解非发酵菌感染情况及耐药性特点,延缓和减少医院感染的耐药菌株产生,为临床正确选用抗菌药物提供科学依据。方法 对本院1999年1月～12月各类临床标本培养分离出的214株非发酵菌进行回顾性分析。结果 检出的942株细菌中214株为非发酵菌,占22.72％,其在痰液、脓液和分泌液标本中分别占检出菌株数的39.40％、21.69％和19.77％。药敏结果显示,非发酵菌对头孢一代的耐药率为95.79％,对阿莫西林和氨曲南的耐药率分别为75.70％、66.82％。结论 非发酵菌占临床检出菌株的比例较高,从分布来看,以痰液中所占比较较高,其次为脓液。非发酵菌对临床常用的抗生素有极高的耐药性,临床医师应注意合理使用抗生素。

2005—2014年CHINET儿童患者分离革兰阴性菌耐药性监测

目的了解2005-2014年中国主要地区儿童患者中革兰阴性分离菌对常用抗菌药物的耐药性。方法中国主要地区19所教学医院（17所综合医院和2所儿童医院）分离自儿童患者的革兰阴性菌，采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药物敏感试验。按CLSI2014版标准判断结果。结果2005-2014年收集各医院儿童患者革兰阴性菌63294株，其中肠杆菌科细菌43109株，占68．1％，不发酵糖革兰阴性杆菌13994株，占22．1％。儿童患者分离革兰阴性菌的检出率呈下降趋势：2006年为14．4％，2014年为12．1％。肠杆菌科细菌对头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶及头孢吡肟平均耐药率较高，对碳青霉烯类、氨基糖苷类和酶抑制剂复合制剂平均耐药率均〈10％。大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）平均产ESBL率分别为68．4％和62．2％。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素、两种酶抑制剂复合制剂及头孢菌素类耐药率明显上升。变形杆菌属、枸橼酸杆菌属及沙雷菌属对碳青霉烯类耐药率有下降趋势。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南耐药率也呈上升趋势。铜绿假单胞菌对所测试的抗菌药物耐药率有下降趋势。嗜麦芽窄食单胞菌及伯克霍尔德菌属检出率不断增多但对所测试抗菌药物的耐药率变化不大。流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率及产β内酰胺酶率均在30％～45％。2014年碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌检出率为15．9％。2005-2014年均有广泛耐药（XDR）菌检出，XDR铜绿假单胞菌检出率在0．2％～2．0％；XDR鲍曼不动杆菌和XDR肺炎克雷伯菌检出率分别在0．9％-24．6％和0～4．2％。结论分离于儿童患者革兰阴性菌的耐药性总体呈上升趋势，碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌和XDR的检出率不断增多是抗感染治疗的一大挑战，应引起临床关注。

病区呼吸道革兰阴性杆菌耐药性检测

目的 对呼吸监护病区分离的 4 0 6株革兰阴性杆菌进行耐药性监测。方法 药敏试验采用Kirby Bauer琼脂扩散法 ,数据输入WHONET4软件并进行分析。结果 绿脓杆菌 (45 % )、不动杆菌属 (18% )、克雷伯氏菌属 (14 % )、肠杆菌属 (8% )和大肠杆菌 (7% )。 10种抗生素的总耐药率较低的是头孢哌酮 /舒巴坦 (2 4 2 % )、头孢吡肟 (43 5 % )。结论 头孢哌酮 /舒巴坦和头孢吡肟对革兰阴性杆菌的耐药率较低。