NONO蛋白的生物学功能及其与人类疾病的关系

无POU结构域八聚体核苷酸结合蛋白(non-POU domain-containing octamer-binding protein,NONO),又称为p54 nrb,属于高度保守的果蝇行为/人类剪接(drosophila behaviour/human splicing,DBHS)蛋白家族[1]。DBHS家族在哺乳动物中包含3个成员:NONO/p54 nrb、旁粒蛋白组分1(paraspeckle protein component 1,PSPC1)和富含脯氨酸/谷氨酰胺的剪接因子(splicing factor proline/glutamine rich,SFPQ/PSF)。p54 nrb和SFPQ可单独作用,但通常作为异源二聚体或更大的复合物发挥作用[1]。

NonO蛋白在丁酸钠诱导小鼠红白血病细胞分化过程中的表达

目的探讨NonO蛋白在丁酸钠诱导小鼠红白血病(MEL)细胞向红细胞系分化过程中的表达变化。方法利用联苯胺染色观察丁酸钠诱导MEL细胞红细胞系分化情况,通过Western blotting、免疫细胞化学检测NonO蛋白在丁酸钠诱导MEL细胞分化的过程中表达量的变化,PCR技术检测NonO基因在RNA水平上的表达变化,免疫细胞化学技术检测NonO蛋白在MEL细胞中的定位。结果发现NonO在丁酸钠诱导MEL细胞向红细胞系分化过程中在基因水平和蛋白水平上均上调表达,NonO蛋白在MEL细胞中定位于细胞质和细胞核。结论NonO蛋白与丁酸钠诱导MEL细胞分化密切相关。

NONO蛋白与肿瘤的关系研究进展

无POU域八聚体结合蛋白(NONO)是一种能与DNA、RNA和其他蛋白质相互作用的多功能核蛋白,参与了mRNA的剪切、DNA的损伤修复、DNA解螺旋配对等多种细胞生物活动。目前有多项研究已表明,NONO蛋白与多种恶性肿瘤的发生发展过程密切相关,如前列腺癌、大肠癌、膀胱癌、黑色素瘤、肾细胞癌等。基于此,本文就NONO蛋白的结构、生化功能及其与恶性肿瘤的关系进行综述。

小鼠海马NONO基因沉默对焦虑样行为的影响

目的:探索小鼠海马区不含POU结构的八聚核苷酸结合蛋白(NONO)基因沉默后突触相关基因的表达及行为学变化。方法:构建并包装表达NONO基因靶向shRNA的重组慢病毒(LV-NONO),海马区显微注射重组慢病毒干扰NONO基因的表达,实验小鼠分为对照组(control),对照病毒组(LV-Con)和NONO慢病毒干扰组(LV-NONO)。慢病毒感染5 d检测海马NONO的表达,14 d检测海马γ-氨基丁酸A型受体α2亚基(GABA)和桥尾蛋白(gephyrin)的表达,旷场实验和O迷宫实验检测实验小鼠的行为学变化。结果:LV-NONO组小鼠海马区NONO、GABA和gephyrin的表达显著低于对照组小鼠。旷场实验和O迷宫实验结果显示,LV-NONO组小鼠进入开放臂的次数和中央区(开放臂)停留时间显著低于对照组小鼠。结论:海马区注射NONO干扰病毒抑制NONO基因的表达可以下调GABA和gephyrin的表达,进而增强小鼠焦虑样行为。

创伤性脑损伤小鼠海马和皮层NONO表达变化

目的:探索创伤性脑损伤(TBI)后小鼠海马和皮层区不含POU结构的八聚体结合蛋白(NONO)表达变化。方法:重物打击法制作TBI小鼠模型,分为假手术组和TBI组,根据创伤后的时间TBI组又分为伤后6 h、24 h、3 d和7 d。Real time RT-PCR检测脑组织NONO mRNA表达,Western Blot和免疫组化检测脑组织NONO蛋白表达。结果:NONO在小鼠大脑皮层和海马区有较强表达,TBI后海马区NONO表达水平显著降低。结论:NONO在皮层和海马区均有表达,但是TBI后只有海马区NONO表达发生显著变化,实验结果为进一步研究NONO在TBI中的作用机制提供了基础。

羊传染性脓疱病毒ORF120蛋白以剂量依赖性方式抑制宿主细胞非POU结构域八聚体结合蛋白(NONO)的表达

羊传染性脓疱病毒(ORFV)是重要的人兽共患病病原,能够通过劫持宿主蛋白等多种策略逃避机体的抗病毒免疫反应,导致重复感染的发生。非POU结构域八聚体结合蛋白(NONO)是一种多功能核蛋白,参与mRNA剪切、DNA损伤修复、肿瘤发生以及炎症反应等多种生物学过程。本研究首先利用酵母双杂交、免疫共沉淀(Co-IP)等技术证实ORF120蛋白与宿主蛋白NONO存在相互作用。借助于激光共聚焦显微镜观察病毒ORF120蛋白和宿主NONO蛋白的定位分布,发现ORF120蛋白与NONO蛋白在细胞核内存在共定位,进一步证实ORF120蛋白和NONO蛋白存在互作。此外,利用Western blot方法证实ORF120蛋白和NONO蛋白之间存在相互抑制作用,且呈剂量依赖性。上述结果表明,ORF120蛋白与宿主NONO蛋白存在剂量依赖性的相互抑制作用,该结果将为更好地理解ORFV免疫逃逸分子机制及开发新的抗病毒手段提供重要依据。