HPLC法同时测定血浆地西泮及其代谢物浓度

目的 :建立同时测定血浆中地西泮及其代谢物浓度的方法。方法 :选用ZORBAXRP C18柱 (15 0mm× 4 6mm ,5 μm) ;甲醇 - 2 5mmol·L-1醋酸铵溶液 (6 0∶4 0 ,V/V)作流动相 ;流速 0 8mL·min-1;检测波长 2 30nm。取血浆样品 0 5mL ,在碱性条件下用二氯甲烷 -正己烷提取 ,HPLC检测。结果 :本法对替马西泮、去甲地西泮和地西泮 3种物质的最低检测限均为 2 μg·L-1,线性范围为 10～ 15 0 0 μg·L-1;奥沙西泮的最低检测限为 5 μg·L-1,线性范围为 2 0～ 15 0 0 μg·L-1。回收率均接近 10 0 % ,日内、日间RSD <5 %。结论 :本法能同时测定血浆中地西泮及其代谢物浓度 ,具有重现性好 ,灵敏、可靠 。

GC-ECD法检测血浆中地西泮及去甲西泮

目的用GC-ECD法分析血浆中地西泮及其主要代谢物去甲西泮。方法血浆中加入内标去烃基氟西泮,调pH至10.8,用二氯甲烷-正己烷(7∶3)提取地西泮及去甲西泮,用GC-ECD法进行分析。结果检材中分析物的回收率80%以上,检出限5μg·L-1以下。结论该方法灵敏度高,可用于口服地西泮10mg人体24h内血浆的分析。

甲状腺功能对地西泮及其代谢产物在大鼠体内代谢的影响

目的 :研究甲状腺功能对地西泮及其代谢物的药代动力学影响。方法 :采用HPLC技术 ,测定不同甲状腺功能状态时 ,大鼠血液中地西泮及其体内主要代谢产物去甲基地西泮的浓度。结果 :甲亢组大鼠地西泮在体内消除加速 ,峰浓度下降 ,AUC减少 ,消除T1 2 缩短。甲减组大鼠则消除减慢 ,峰浓度增高 ,AUC增大 ,消除T1 2 延长。而其主要代谢产物去甲地西泮的药动学参数则相反。结论 :甲状腺功能提高时 ,大鼠对地西泮的代谢能力明显增加 ,消除加速 ;

Effects of Diazepam,Phenobarbital,Propranolol,and Cimetidine on Diazepam Oxidizing Isoenzymes in Rat Liver Microsomes

研究地西泮、苯巴比妥、普萘洛尔和西咪替丁对地西泮氧化代谢的影响及其药酶蛋白的初步分析，应用ＨＰＬＣ，ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳和薄层扫描测定地西泮及其代谢物，并对大鼠肝微粒体和酶蛋白进行分离和含量测定。结果表明地西泮、普萘洛尔和西咪替丁使肝微粒体中Ｐ４５０含量明显降低。地西泮和普萘洛尔明显抑制地西泮Ｃ３羟化活性，大剂量普萘洛尔尚能抑制地西泮Ｎ脱甲基。苯巴比妥明显诱导Ｐ４５０生成，增强地西泮Ｎ脱甲基和Ｃ３羟化酶活性及分子量为５１，０００和５９，０００的电泳蛋白带，而地西泮、普萘洛尔则呈抑制作用。并发现，地西泮Ｎ脱甲基酶活性和分子量为５９，０００蛋白含量呈线性相关（Ｐ＜０．０５），而Ｃ３羟化酶活性则与５１，０００蛋白含量呈线性相关（Ｐ＜０．０１）。因此地西泮Ｃ３羟化代谢可能与５１，０００的Ｐ４５０酶蛋白有关，而Ｎ脱甲基代谢则可能与５９，０００的Ｐ４５０酶蛋白有关。

HPLC法同时测定毛发样本中地西泮、去甲西泮和奥沙西泮

目的:建立测定毛发样本中地西泮、去甲西泮和奥沙西泮的HPLC分析方法。方法:采用超声法结合液液萃取法作为前处理方法。采用Athena C18-WP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(磷酸调pH 3.4)-乙腈(30∶43∶27)为流动相;柱温50℃;流速0.7 mL·min^(-1);检测波长254 nm。内标为氯硝西泮。结果:本方法在0.1~25 ng·mg^(-1)范围内具良好的线性关系,定量限为0.1 ng·mg^(-1),检测限为0.05 ng·mg^(-1),批内准确度(n=6)在88.2%~103.9%,批间准确度(n=24)在88.5%~106.2%,精密度小于或等于9.19%,提取回收率稳定,符合方法学要求。将该方法应用于实际病人的毛发样本,测得地西泮及其代谢物去甲西泮、奥沙西泮浓度分别是(0.307±0.016)ng·mg^(-1)、(0.244±0.012)ng·mg^(-1)和(0.478±0.053)ng·mg^(-1),其中C去甲西泮/C地西泮为0.795,与文献中报道相符。结论:优化后的方法操作快捷简便,重现性好,具适用性和可靠性。

HPLC-MS/MS法同时测定肝微粒体孵育体系中地西泮及其代谢产物的浓度

目的：建立同时测定地西泮及其代谢产物质量浓度的HPLC－MS／MS方法。方法色谱柱：Kromasil C18，流动相：乙腈－2 mmol· L－1乙酸铵水溶液（70∶30），流速：0．3 mL· min－1，柱温：40℃，用正离子扫描，多反应监测方式测定样品中药物的质量浓度。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、基质效应及稳定性。结果肝微粒体孵育样品中，地西泮在20～1000 ng· mL－1线性关系良好（ r＞0．99），定量下限为20 ng· mL－1。去甲地西泮、替马西泮和奥沙西泮在2～100 ng· mL－1线性关系良好（ r＞0．99），定量下限为2 ng· mL－1。地西泮、去甲地西泮、替马西泮和奥沙西泮绝度回收率分别在55．47％～68．76％，64．84％～79．11％，68．32％～78．27％和72．66％～83．82％，日内与日间精密度均小于15％。结论本研究方法简便、快速、准确，适用于测定肝微粒体孵育样品中地西泮及其代谢产物的浓度。

地西泮及去甲地西泮在大鼠体内的死后再分布研究

目的观察地西泮及其主要代谢物去甲地西泮在大鼠体内的死后再分布特点。方法大鼠24只,随机分成8组,以安定90 mg/kg灌胃,2 h后脱颈椎处死,左侧卧位,分别置于室温(10℃)条件下,于死后不同时间(0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h、96h)取心、肝、脾、肺、肾、大脑、肌肉,固相萃取、高效液相色谱法检测其中地西泮及其主要代谢物去甲地西泮的含量。结果地西泮及其主要代谢物去甲地西泮在染毒处死大鼠内各时间点、各脏器都有分布并呈现出一定的规律性。结论地西泮及其主要代谢物去甲地西泮在染毒处死大鼠内可发生死后再分布。