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广州地区婴幼儿感染Noro病毒基因型的初步研究 被引量:2
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作者 钟家禹 周荣 +2 位作者 朱冰 区文玑 龚四堂 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2006年第4期273-278,共6页
目的 探讨广州地区婴幼儿腹泻中感染Noro病毒的基因型。方法 用Clustal W比对GⅡ组Noro病毒后,设计处于ORF1与ORF2连接点两旁两对简并引物,进行巢式RT—PCR扩增出目标片段,克隆于T载体上,测定序列,对ORF1与ORF2连接点两旁序列和衣... 目的 探讨广州地区婴幼儿腹泻中感染Noro病毒的基因型。方法 用Clustal W比对GⅡ组Noro病毒后,设计处于ORF1与ORF2连接点两旁两对简并引物,进行巢式RT—PCR扩增出目标片段,克隆于T载体上,测定序列,对ORF1与ORF2连接点两旁序列和衣壳蛋白N/S区用Clustal W进行同源性分析,用phylip 3.65软件、邻接法构建进化树。结果 标本NVgz100、NVgz10成功扩增出ORF1与ORF2连接点两旁1208bp片段(相对于Hawaii virus,U07611位置为4476—5683),包含ORF1的3’端RdRp的大部分基因和ORF2基因的5’端的S区。对标本NVgz100、NVgz10与另一实验NVgz01(DQ369797)的1208bp进行同源性分析发现,3份标本与GⅠ组同源性为58%~61%,与GⅡ组同源性为74%~92%;将这3份标本与GⅠ、GⅡ组构建进化树,可发现NVgz100、NVgz10和NVgz01与GⅡ组Bristol等病毒密切相关,将NVgz100、NVgz10和NVgz01的衣壳蛋白N/S区与GⅡ组各基酬型进行同源性比较,发现3份标本与GⅡ4基因型Camberwell、Bristolt Grimsby同源性较高(92%~96%),与其他基因型同源性为70%~73%,以N/S区构建进化树可发现3份标本与Camberwell、Bristol、Grimsby、Lordsdale处于同一簇中。结论 本实验结果表明Noro病毒株以GⅡ组为主,病毒流行的基因型为与Camberwell、Bristol、Grimsby和Lordsdale等密切相关的GⅡ-4基因型。 展开更多
关键词 Noro病毒 GⅡ-4基因型 同源性比较 进化树分析
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酶免疫吸附法检测北京地区婴幼儿腹泻标本中的Noro病毒 被引量:13
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作者 陈冬梅 张又 +2 位作者 邓莉 贾莉英 钱渊 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2006年第3期199-203,共5页
目的用酶免疫吸附试验(EIA)法检测北京地区婴幼儿腹泻标本中的Noro病毒,试图找到一种简便易行的检测方法,以期应用于临床检测。方法2003年10月至2004年12月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊的腹泻患儿粪便标本中抽取167份应用EIA进行N... 目的用酶免疫吸附试验(EIA)法检测北京地区婴幼儿腹泻标本中的Noro病毒,试图找到一种简便易行的检测方法,以期应用于临床检测。方法2003年10月至2004年12月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊的腹泻患儿粪便标本中抽取167份应用EIA进行Noro病毒抗原检测,其中有61份同时进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测轮状病毒。结果167份粪便标本中,Noro病毒阳性46份,阳性率为27.5%。其中,GⅠ型阳性标本20份,占阳性标本总数的43.5%(20/46);GⅡ型阳性标本19份,占阳性标本总数的41.3%(19/46);另有7份标本为GⅠ和GⅡ型同时阳性,提示为混合感染,占阳性标本总数的15.2%(7/46)。发病年龄以2岁以下患儿为主,占总感染人数的93.5%(43/46)。本组Noro病毒感染性腹泻未见明显的季节性规律。在检测轮状病毒的61份标本中,轮状病毒阳性29份,阳性率为47.5%。在29份轮状病毒阳性标本中,11份(11/61,18.0%)标本检出Noro病毒阳性,提示存在Noro病毒和轮状病毒的混合感染。结论Noro病毒感染在北京地区婴幼儿腹泻中占有重要地位,仅次于轮状病毒。EIA检测Noro病毒简便易行、利于推广。 展开更多
关键词 非细菌性腹泻 Nora病毒 轮状病毒 婴幼儿腹泻 酶免疫吸附法
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一起外轮聚集性诺如病毒感染事件的病原学检验 被引量:6
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作者 李小波 师永霞 +5 位作者 洪烨 黄吉城 相大鹏 郑夔 幸芦琴 郭波旋 《口岸卫生控制》 2008年第3期27-30,共4页
目的报告一起入境外籍船员聚集性非细菌性食物中毒事件的病原学检验。方法采集该外轮11名船员的样本,应用实时荧光RT-PCR方法对样本进行核酸检验,结果呈阳性的样本应用RT-PCR方法进行验证,PCR产物进行测序并做序列分析。结果从11份样本... 目的报告一起入境外籍船员聚集性非细菌性食物中毒事件的病原学检验。方法采集该外轮11名船员的样本,应用实时荧光RT-PCR方法对样本进行核酸检验,结果呈阳性的样本应用RT-PCR方法进行验证,PCR产物进行测序并做序列分析。结果从11份样本中检出5例诺如病毒GGⅡ-4群阳性。结论引起此次外籍船员腹泻爆发的病原体为GGⅡ-4群诺如病毒。Real-time RT-PCR方法检验诺如病毒快速、准确、特异性强。此次为中国检验检疫机构首次从国境口岸检出诺如病毒。 展开更多
关键词 诺如病毒 实时荧光RT—PCR
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神女与王权:论琉球祝女在国家政治宗教中的角色 被引量:1
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作者 林希 《沈阳大学学报(社会科学版)》 2017年第2期249-254,共6页
指出琉球祝女在琉球政治中扮演着十分重要的角色,她们直接为国王服务,采听民间信息报告国王;其首领由国王亲戚担任,实施与王权类似的承袭制度。认为每逢国之大事,必定由祝女为国家祭祀祝福;在父权制流行的古代,琉球女性在国家政权中的... 指出琉球祝女在琉球政治中扮演着十分重要的角色,她们直接为国王服务,采听民间信息报告国王;其首领由国王亲戚担任,实施与王权类似的承袭制度。认为每逢国之大事,必定由祝女为国家祭祀祝福;在父权制流行的古代,琉球女性在国家政权中的崇高地位,使其成为历史上罕见的范例。 展开更多
关键词 琉球 祝女 政治 宗教
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明清时期琉球祝女政治地位的变化历程 被引量:1
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作者 林希 《晋中学院学报》 2017年第1期66-70,共5页
琉球的祝女群体曾经政治地位崇高,但在中国的明清时期,由于多方面的原因,琉球祝女群体渐失其政治影响力。琉球祝女政治地位的变化,与琉球社会向封建社会进化的过程是同步的。
关键词 明清 琉球祝女 政治地位 变化
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儿科肿瘤病房Noro病毒大暴发
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作者 Simon A. Schildgen O. +1 位作者 Maria Eis-Hübinger A. 沙焕臣 《世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册)》 2006年第12期59-60,共2页
Objective.Norovirus(NV) is an etiologic agent of outstanding importance that can cause severe epidemic gastroenteritis in day-care centers,schools,nursing homes,and hospitals.Therefore NV requires foremost attention a... Objective.Norovirus(NV) is an etiologic agent of outstanding importance that can cause severe epidemic gastroenteritis in day-care centers,schools,nursing homes,and hospitals.Therefore NV requires foremost attention as a pathogen responsible for epidemics of gastroenteritis in immunocompromised inpatients.In this study,a NV outbreak in a pediatric oncology unit is described and the consequences for this high-risk population are discussed.Material and methods.Stool and vomitus samples from 11 patients were tested for NV and other relevant viruses during the outbreak by reverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR) and/or enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) (whenever an appropriate ELISA was available) .Norwalk virus PCR amplifications were sequenced and phylogenetic analysis was performed.Results.The index patient and the chain of infection were identified.Follow-up investigation surprisingly demonstrated viral shedding for a maximum of 140 days(median 23 days) .Three patients experienced severe or life-threatening symptoms,probably related to NV infection.Conclusions.In the event of an outbreak of gastroenteritis(involving two or more symptomatic patients) in a pediatric oncology unit,the search for NV in stool or vomitus specimens should be initiated in good time.As long as the data are limited regarding whether a detectable viral antigen or RNA in stools represents an infectious virus,patients have to be isolated as long as the diagnostic assays remain positive.During the acute phase of the illness,health-care workers should wear masks in addition to practicing meticulous hand hygiene with a disinfectant of proven activity against NV.Pediatric oncology patients must be closely monitored during follow-up investigations as they may shed the virus for months.There is some evidence from the outbreak described here that those patients face a greater risk of severe NV-related complications. 展开更多
关键词 Noro 肿瘤病房 免疫功能缺陷 基因多态性分析 随访调查 高危人群 急性期 暴发事件 卫生工作者
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北京市某医院院内感染Noro病毒胃肠炎的调查 被引量:5
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作者 陈美芳 高燕 +7 位作者 贾立平 张又 钱渊 武迎宏 张正 解基严 苗懿德 魏来 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期141-143,共3页
目的了解Noro病毒感染引起医院内暴发集体腹泻的临床特点。方法分析一起18例医院内暴发腹泻患者的流行病学和临床资料,同时对每例患者粪便标本进行细菌培养,随机选择7例粪便标本用抗原检测和聚丙烯酰胺凝胶电泳进行轮状病毒RNA检测;... 目的了解Noro病毒感染引起医院内暴发集体腹泻的临床特点。方法分析一起18例医院内暴发腹泻患者的流行病学和临床资料,同时对每例患者粪便标本进行细菌培养,随机选择7例粪便标本用抗原检测和聚丙烯酰胺凝胶电泳进行轮状病毒RNA检测;用逆转录-聚合酶链反应检测Noro病毒核酸以确定感染的病原,分析感染患者的临床特点和易感因素。结果发病者多为老年合并多种基础疾病;腹泻主要为稀水便(12/18,66.67%),个别为黏液稀便(3/18,16.67%);大部分粪便常规检测正常(10/18,55.56%),个别见少量白细胞(3/18,16.67%)和潜血弱阳性(4/18,22.22%);全部粪便标本细菌学培养阴性;轮状病毒RNA检测阴性;3份标本中检出Noro病毒核酸,阳性率为42.86%(3/7)。结论Noro病毒是此次医院内集体暴发腹泻的重要病原之一,尤其多见于有基础疾病、体弱的老年患者。 展开更多
关键词 Noro病毒 医院内感染 临床特征
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北京地区Noro病毒主要衣壳蛋白编码基因的序列分析 被引量:4
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作者 贾立平 钱渊 +3 位作者 张又 陈冬梅 赵林清 朱汝南 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期394-399,共6页
目的 确定从北京地区婴幼儿腹泻标本中检测到的3株Noro病毒的基因型别及主要衣壳蛋白(VP1)编码基因的特点。方法 从经酶免疫分析法筛选到的Noro病毒阳性的粪便标本中应用RT-PCR方法扩增Noro病毒VP1全基因,克隆到pBS-T载体中并测定核... 目的 确定从北京地区婴幼儿腹泻标本中检测到的3株Noro病毒的基因型别及主要衣壳蛋白(VP1)编码基因的特点。方法 从经酶免疫分析法筛选到的Noro病毒阳性的粪便标本中应用RT-PCR方法扩增Noro病毒VP1全基因,克隆到pBS-T载体中并测定核苷酸序列,与GenBank中的其他Noro病毒VP1基因序列进行比较和分析。结果 经过扩增和测序,标本CR2905、CR2932和CR2987的VP1基因全长分别为1620bp、1623bp和1647bp,编码不同大小的蛋白。CR2905和CR2932与GⅡ-4型的氨基酸同源性在80%以上,属于Noro病毒GⅡ基因组(Genogroup)的GⅡ-4型(Geno.type);CR2987与GⅡ-3型的氨基酸同源性在80%以上,属于Noro病毒GⅡ基因组的GⅡ-3型。CR2905、CR2932与其他GⅡ-4型的变异性在9.1%至12.5%之间,提示为新的变异株。结论 北京地区婴幼儿中存在不同基因型别的Noro病毒的感染,根据基因的同源性分析,CR2905、CR2932可能为GⅡ-4型的新的变异株。 展开更多
关键词 Noro病毒 VP1基因 序列分析
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广州地区儿童诺如病毒性腹泻的分子流行病学研究 被引量:16
9
作者 冯晓敏 钟家禹 +3 位作者 周荣 耿岚岚 区文玑 龚四堂 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期899-904,共6页
目的应用TaqMan实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-timeRT—PCR)法检测诺如病毒(norovirus,NV)的发病情况,为儿童NV腹泻的临床治疗或病毒爆发流行的预防、控制及疫苗的研制提供流行病学资料。方法随机收集2006年12月至2007年12月... 目的应用TaqMan实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-timeRT—PCR)法检测诺如病毒(norovirus,NV)的发病情况,为儿童NV腹泻的临床治疗或病毒爆发流行的预防、控制及疫苗的研制提供流行病学资料。方法随机收集2006年12月至2007年12月广州地区急性腹泻病患儿水样便或蛋花汤样便,应用针对病毒ORF1与ORF2连接区域设计的引物及TaqMan探针进行实时荧光RT—PCR检测标本。并将NV阳性标本进行克隆并测序,结合检测结果以确定此周期内NV的流行情况及优势毒株。结果本研究从1260份标本中检测出NV阳性257份(20.40%),其中GⅠ型87份(6.90%),GⅡ型214份(16.98%),GⅠ和GⅡ混合感染44份。测序分析后发现GI毒株检出率依次为GⅠ-3、GⅠ-2及GⅠ-4;GⅡ毒株检出率依次为GⅡ-4、GⅡ-3及GⅡ-7。NV主要感染年龄为2岁以内婴幼儿,发病高峰期在11至12月。结论NV已经成为广州地区婴幼儿腹泻的重要病原体之一,GⅡ-4型是2007年主要流行病毒株。 展开更多
关键词 诺罗病毒 腹泻 儿童 逆转录聚合酶链反应
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吉林省2012~2013年<5岁婴幼儿中检出诺如病毒GⅡ.4Sydney(悉尼)2012变异株 被引量:6
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作者 李响 杨显达 +5 位作者 许爽 吴东林 孙利炜 沈博 李静 柳鸿敏 《中国疫苗和免疫》 CAS 北大核心 2015年第3期283-288,共6页
目的了解吉林省2012~2013年诺如病毒(Norovirus,NV)流行型别及感染状况。方法收集长春市儿童医院2012~2013年〈5岁住院腹泻患儿的粪便标本,采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测... 目的了解吉林省2012~2013年诺如病毒(Norovirus,NV)流行型别及感染状况。方法收集长春市儿童医院2012~2013年〈5岁住院腹泻患儿的粪便标本,采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测粪便标本中的NV,阳性标本进行核苷酸序列测定,构建系统进化树进行分析。结果检测粪便标本共770份,NV阳性139份,总阳性率为18.1%,其中2012年总阳性率为18.6%(72/387),2013年总阳性率为17.5%(67/383),〈2岁婴幼儿感染占总标本数的97.1%,全部为基因Ⅱ组(GenogroupⅡ,GⅡ)。PCR产物进行序列测定,取得测序结果的共97份,其中GⅡ.4型53份,占54.6%;GⅡ.3型41份,占42.3%;GⅡ.13型2份,占2.1%;GⅡ.6型1份,占1.0%。2012年检出GⅡ.4 Sydney(悉尼)2012变异株2份,占2012年阳性总数的4.9%;2013年检出26份,占2013年阳性总数的46.4%。结论吉林省存在多种NV基因型的感染,2013年流行优势株为GⅡ.4 Sydney2012变异株。 展开更多
关键词 〈5岁婴幼儿 诺如病毒 基因型 GⅡ.4 Sydney(悉尼)2012变异株
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北京地区不同基因型Noro病毒的主要衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 贾立平 钱渊 +1 位作者 陈冬梅 张又 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期144-148,共5页
目的对北京地区的不同基因型Noro病毒的主要衣壳蛋白(VP1)进行表达,得到Noro病毒抗原,为对Noro病毒做进一步的深入研究打下基础。方法用PCR分别从先前研究得到的含北京Noro病毒主要衣壳蛋白VP1编码基因的重组质粒pBST-CR2987(GⅡ-... 目的对北京地区的不同基因型Noro病毒的主要衣壳蛋白(VP1)进行表达,得到Noro病毒抗原,为对Noro病毒做进一步的深入研究打下基础。方法用PCR分别从先前研究得到的含北京Noro病毒主要衣壳蛋白VP1编码基因的重组质粒pBST-CR2987(GⅡ-3)及pBST-CR2932(GⅡ4)中扩增得到VP1全基因,然后将目的基因亚克隆到表达载体pET-30a(+)中,得到重组质粒,转化BL21(DE3)感受态细胞,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。通过SDS-PAGE和Western blot检测蛋白的表达和抗原性,并对表达产物进行了纯化。结果(1)双酶切和测序证明得到了VP1的重组表达载体。CR2987 VP1基因全长1647 bp,含编码549个氨基酸的单一的开放读码框架(ORF);CR2932 VP1基因全长1623 bp,含编码541个氨基酸的单一的ORF。(2)重组表达的VP1主要以包涵体的形式存在,在诱导后4—6h表达量最高。(3)重组表达的VP1能够被豚鼠抗Noro病毒VP1的特异性免疫血清及鼠抗His标签的抗体所识别。(4)纯化后的蛋白能够为人血清所识别。结论GⅡ-3型及GⅡ-4型Noro病毒北京地方株的VP1在原核体系中获得表达,表达的VP1可以被特异性免疫血清及人血清所识别,说明其具有抗原活性。 展开更多
关键词 Noro病毒 VP1蛋白表达 原核表达 抗原性
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软件升级快报
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《大众软件》 2004年第19期52-52,共1页
关键词 MYIE2 Flash MX 2004 v7.2 PATCH 网页制作工具 补丁程序 noro6.3.1.20 刻录工具软件
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