中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1(MIH1)基因的cDNA片段克隆和Northern印迹分析

根据其他蟹类蜕皮抑制激素的氨基酸序列设计了简并引物,运用RT PCR和RACE技术,从中华绒螯蟹(E riocheirjaponicasinensis)成体的蜕皮间期眼柄中,克隆了1条长1145bp的cDNA。该cDNA编码60个氨基酸,包括942bp的3′端非翻译区。同源性分析结果表明,该cDNA编码的氨基酸序列和其他蟹类蜕皮抑制激素有较高的一致性,最高的一致性为64%,将获得的序列命名为中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因(GenBank检索号:AY309062)。用Northern印迹分析的方法对处于各个发育阶段的胚胎及状幼体期该基因的表达进行了研究,结果表明,处于胚胎发育早期的卵裂期几乎没有检测到杂交信号,而胚胎发育的其他时期和状幼体期都检测到蜕皮抑制激素1基因的mRNA。中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因部分cDNA序列的获得为进一步获得该基因的全长cDNA、研究其功能及阐明中华螯蟹蜕皮的分子机制奠定了基础。

分子印迹光子晶体传感器在样品分析检测中的应用

当下,秉承可持续发展和环境友好的绿色新发展理念,人们追求物质资源利用最大化、经济效益最大化、环境影响最小化。样品分析技术作为化学的一门分支,对于环境的绿色发展起着不可或缺的作用。作为化学的一门分支,样品分析技术功不可没。传统的样品分析法包括液相色谱-质谱法、荧光分光光度法、酶联免疫分析法和表面增强拉曼光谱(SERS)等,这些通过仪器分析的方法选择性高,特异性强,但也存在设备昂贵、耗时巨长、净化程序复杂、操作难度大和专业度要求高等缺点。而分子印迹光子晶体(MIPC)传感器,除了高灵敏度和高选择性外,还能够快速、方便、肉眼实时监测目标分子及其含量。重点介绍了分子印迹光子晶体传感器在各种样品分析检测中的重要应用。

配位印迹聚合物在分析化学中的应用进展

分子印迹聚合物(MIP)是一种对目标分子(模板分子)具有选择性结合能力的聚合物。配位印迹聚合物(CIP)是基于金属离子与功能单体、模板分子间配位作用的分子印迹聚合物,既沿袭了MIP的优点,又具有适用于极性环境等优点,在食品、环境、生物、医药等领域目标物的识别中有良好的应用潜力。本文介绍了CIP的原理和特点,综述了CIP在分析化学中的应用进展,展望了CIP的发展前景。

一种快速筛选阳性克隆的方法——反向Northern印迹杂交技术

本实验采用反向Northern印迹杂交 (reverseNorthernblot)技术 ,对经反转录差异显示PCR(differentialdisplayre versetranscriptionalPCR ,DDRT PCR)获得的 5 6个差异片段 (cDNA)进行阳性片段的初步筛选 ,获得 8个候选阳性片段 ,经Northern印迹杂交实验 ,确证 5个阳性片段。实验表明该方法是一种快速检测和筛选阳性克隆片段的方法 ,并具有简便、经济的优点。它不仅可用于各种分离差异片段的方法中差异片段的初步筛选 。

纳米结构分子印迹聚合物及其在药物分析中的应用进展

纳米材料是纳米技术发展的重要基础,它具有许多传统材料所不具备的独特的理化性质,因此有着广泛的应用前景。分子印迹技术是一种通过模拟抗体-抗原相互作用原理,制备具有分子识别功能的聚合物的技术。以纳米材料制备的分子印迹聚合物具有较高的结合容量,较大的选择性和较快的结合动力学特性,近年来备受关注。本文简单概述了零维、一维、二维纳米结构分子印迹聚合物的合成、表征方法及研究现状,并对其在手性药物分析、临床药物分析、传感器及药物残留检测中的应用进行了综述。

溶剂对分子印迹聚合物分子识别能力的影响:实验研究与计算量子化学分析

以茶碱为印迹分子,甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,以氯仿、二甲基亚砜和四氢呋喃为溶剂,合成了分子印迹聚合物并测定了其对茶碱分子的识别能力,实验结果显示,在氯仿中合成的MIPs的分子识别性能最佳.综合Scatchard分析吸附行为、1HNMR测定氢键以及量子化学中的密度泛函计算印迹分子和单体分子的溶剂化能等方法,研究聚合反应的溶剂体系对于印迹聚合物分子识别能力的影响及其作用机制.计算结果显示:采用与印迹分子和单体相互作用力较弱的溶剂体系所合成的印迹聚合物具有较高的分子识别性能.这与1HNMR分析结果和吸附测定实验结果具有一致性.上述结果表明,溶剂对于分子印迹聚合物的分子识别性能具有重要的影响,而计算量子化学分析对于分子印迹介质合成时的溶剂体系选取和优化具有很好的指导作用.

用于食品药品分析检测的新型分子印迹聚合物的研究进展

分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers,MIPs)具有构效预定性、特定识别性、化学稳定性和广泛适用性等优点,近年来在食品检验、化学分析、药物分离和检测等领域得到了广泛应用。本文系统介绍了分子印迹基础理论和表面分子印迹技术,对用于食品药品分析检测的新型MIPs做了详细综述,并对其发展趋势进行了展望。

分子印迹技术在食品安全检测分析中的应用

综述分子印迹技术的产生与发展、分子印迹的原理,常用的合成方法以及在固相萃取,膜分离,传感技术,免疫分析技术诸方面的应用,并对该技术的应用前景进行展望。

基于刹车印迹的典型碰撞事故再现分析

刹车印迹是事故现场勘测与责任分析的主要研究对象,传统的事故现场勘测以手工测量为主,本文讨论了利用摄影测量理论进行事故现场数字化测量的方法,使用该方法,将减少占道时间,快速恢复事故现场的交通.本文以一起典型碰撞事故为例,利用摄影测量理论对事故发生环境及刹车印迹进行计算机三维重建,得到刹车印迹长度与相对角度的精确数值.同时根据刹车印迹信息,利用动力学理论及优化计算方法进行事故发生时刻及刹车前车速求解.最后本文对轨迹法在事故再现研究中的适用范围进行了探讨.

分子印迹技术及其在痕量分析中的应用

分子印迹是近年来迅速发展起来的一种分子识别技术 ,以此为原理的分离和检测方法日益增多。重点对有关技术在痕量分析中的研究与应用进行了综述 ,包括分子印迹原理、分子印迹聚合物制备方法、应用。

水稻条叶枯病毒基因产物在水稻和昆虫体内的Western印迹分析

将AStV基因组组分3编码的NS3和NC蛋白基因以及组分4编码的NCP和NSvc4蛋白基因分别克隆于大肠杆菌表达载体pGEX3X在IPTG诱导下，表达出4种融合蛋白。这些表达产物用于免疫动物产生多克隆抗血清。以制备的多克隆抗血清为探针，Western印迹分析了宿主植物和介体昆虫体内NS3、NC、NCP和NSvc4种基因表达的产物。NC蛋白的抗体可在病株和病毒粒子制备物中以及NCP抗血清仅在病株中检测到相应大小的产物，其余的均与预期值相停。

分子印迹技术在食品痕量分析中的应用

分子印迹技术是一种制备对特定目标分子具有高度特异性和选择性分子识别材料的新兴仿生技术,该技术在近几年已得到了迅速的发展,并在许多领域被广泛关注。作者综述了分子印迹技术原理、制备方法及其在食品痕量分析中的应用,最新的进展及其存在的问题等。

分子印迹技术在食品药品分析检测中的应用

应用分子印迹技术制备的分子印迹聚合物具有高选择性和预定识别性,在食品检测、化学分析、药品分离和检测等领域具有良好的应用前景。本文简要介绍了分子印迹技术的发展、基本原理以及分子印迹聚合物的制备方法,综述了分子印迹技术在固相萃取、色谱分离、膜分离和传感器方面的最新研究进展,展望了分子印迹技术在未来的发展方向,为更好地将分子印迹技术应用于食品药品分析检测提供了参考。

分子印迹固相萃取技术在天然产物有效成分分离分析中的应用进展

天然产物体系复杂,尤其是一些活性成分含量较低,采用一般的方法对其进行分离富集难度较大。分子印迹聚合物具有良好的亲和性和专一的选择性,将分子印迹固相萃取技术应用于天然药物资源样品前处理过程,能够选择性地分离富集复杂基质中的目标成分。本文对近几年分子印迹固相萃取技术在天然产物有效成分分离分析中的应用进行了总结,分析物包括黄酮类、多元酚类、生物碱类、有机酸类、苯丙素类、萜类以及其他一些类型的生物活性成分。

类猪圆环病毒 P1转录的 Northern Blot 分析

为鉴定类猪圆环病毒P1的转录本,采用地高辛标记的RNA探针,通过Northern Blot方法,对转染PK15细胞的类猪圆环病毒P1进行了RNA转录分析。结果表明,Northern杂交可检测到2个RNA转录本,包括正链上ORF3的RNA和负链上ORF1的RNA。同时,ORF3 RNA表达时间比ORF1的短,且丰度也大大低于ORF1。类猪圆环病毒P1至少存在ORF1和ORF3 2个转录本。

分子印迹技术在食品样品安全分析中的应用

食品基质复杂多样,食品中相关物质检测的准确性很大程度上依赖于食品的前处理,如何通过食品的前处理提高方法的选择性和特异性是食品检测的关键。分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers,MIPs)是一种可特异性识别靶标物质的聚合物,由模板分子和功能单体形成的络合物与致孔剂共聚合,再去除模板,形成与目标物在形状、大小、官能团和空间排列上互补的空间结构和结合位点,由于其亲和力和选择性较强,目前已经广泛应用于食品样品的前处理过程中。本文介绍了MIPs的主要制备方法,综述了基于分子印迹技术的固相萃取、固相微萃取、搅拌棒吸附萃取和基质固相分散萃取在食品样品前处理中的最新应用进展,总结了目前MIPs在食品样品前处理过程中存在的问题以及未来的发展方向和趋势。

己烯雌酚印迹分子聚合物合成及其在残留分析中的应用

以己烯雌酚(D iethylstilbestrol,DES)为模板分子,α-甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,合成己烯雌酚分子印迹聚合物;以该聚合物为填料制成固相萃取小柱,应用于己烯雌酚残留分析的样品前处理,并比较了该固相萃取小柱与C18固相萃取小柱对DES保留行为的差异。通过选择不同浓度的甲醇水溶液,己烯雌酚达到理想的分离纯化效果;对加标鸡肉样进行了含量测定,回收率可达95%以上。

Western印迹法分析蓖麻毒素在正常小鼠血清和肝组织匀浆中的稳定性

以重组蓖麻毒素A链（rRTA）免疫家兔,制备的抗rRTA兔血清效价高,能达到1∶51200.以兔多抗血清为检测抗体,建立蓖麻毒素的Western印迹检测法,对蓖麻毒素检测灵敏度可达1 ng.含有蓖麻毒素的小鼠血清和肝组织匀浆（蓖麻毒素终浓度为0.67μg/mL）在37℃孵育0~4 h后,应用此法体外观察蓖麻毒素在正常小鼠组织样品中的稳定性,结果显示Western印迹可用于组织中蓖麻毒素的测定,蓖麻毒素可在小鼠血清和肝组织匀浆中稳定存在.

分子印迹技术及其在食品分析检测中的应用

分子印迹技术具有预定的选择性和专一的识别性等优点,因此成为近年来的研究热点。简述分子印迹技术的原理;介绍分子印迹聚合物的制备方法;总结分子印迹技术在固相萃取、色谱分离、仿生传感和膜分离等领域的应用研究进展;最后对分子印迹技术未来的发展进行展望。