诺瓦克样病毒胃肠炎集体性爆发的证实与思考

目的通过对诺瓦克样病毒胃肠炎集体爆发的调查和证实,总结处理不明原因疾病的经验。方法运用流行病学方法对3所幼儿园和1所小学发生的急性胃肠炎集体爆发进行调查,对病人粪便样本进行诺瓦克样病毒核酸检验。结果4起集体爆发的胃肠炎均以恶心呕吐为主要表现,有2个发病高峰,病程较短,有自愈倾向,没有明显的年龄、班级、楼层分布的集中趋势。对第4起爆发的22份病人粪便样本进行诺瓦克病毒的PCR检测,其中19份阳性,同时有4份经DNA测序证实与诺瓦克样病毒同源。结论此一系列不明原因的胃肠炎是由诺瓦克样病毒引起的。这是我国证实由诺瓦克样病毒感染而引起的集体性急性胃肠炎的爆发。

北京地区人群诺瓦克样病毒血清抗体水平调查

为了解诺瓦克样病毒在我国人群中的流行情况，采用间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），分别以重组杆状病毒表达的Ｎｏｒｗａｌｋ（ｒＮＶ）和Ｍｅｘｉｃｏ（ｒＭＸ）病毒样颗粒为抗原，检测了北京地区１１０９份不同年龄人群血清标本中的特异性ＩｇＧ抗体。总检出率为ｒＮＶ８８．８％，ｒＭＸ９０．６％。两种型别抗原的抗体分布形式类似：７－１１个月的阳性率最低，分别为ＮＶ４１．４％，ＭＸ３６．２％；１岁时达到ＮＶ６５．２％，ＭＸ６９．６％；３岁时达到ＮＶ８４．６％，ＭＸ８９．７％；８、９岁后均接近１００％。结果提示。

东莞市一起社区诺如病毒腹泻爆发调查分析

目的对东莞市某社区发生的一起腹泻爆发疫情进行调查和分析。方法采用现场流行病学调查方法了解病例发生情况及可疑传播因素;采用ELISA、RT-PCR等方法对人体和外环境标本进行检测。结果本次疫情从2007年2月11日开始至18日结束,共发生腹泻病例173例,罹患率2.40%。从4份病人粪便标本中均检测出诺如病毒核酸片段。疫情特点符合经水传播传染病特征。结论本次疫情为一起由诺如病毒引起的社区腹泻爆发,可疑传播因素为被污染的水。

90例非轮状病毒腹泻患儿粪便中诺瓦克样病毒的检测

目的了解90份婴幼儿腹泻病人轮状病毒分子生物学方法检测阴性的粪便标本中诺瓦克样病毒感染状况。方法应用酶联免疫吸附实验方法(ELISA)进行诺瓦克样病毒抗原检测。结果90份粪便标本中诺瓦克样病毒I型(G1)和Ⅱ型(G2)阳性分别检出6例和19例,阳性率分别为6.67%和21.11%,两者差异有显著性。结论诺瓦克样病毒感染可能是武汉地区婴幼儿腹泻的重要病因之一,其中基因Ⅱ型为主要流行株。

诺瓦克样病毒抗体水平及其相关因素研究

目的 了解某军校学员诺瓦克样病毒抗体水平 ,同时调查分析与血型、入学前家庭所在地等的关系。方法 利用酶联免疫吸附试验检测血清中的诺瓦克样病毒rNV、rMX和r387特异性IgG抗体水平。结果 rNV、rMX和r387IgG抗体总检出率分别为 88 9% ,5 4 1%和 90 0 %。其中rMX抗体阳性率不同血型之间存在显著性差异 (P<0 0 5 ) ,以O型抗体阳性率最高 6 2 5 % (115 / 184 ) ,B型最低 4 9 1% (16 0 / 2 16 ) ,而rNV和r387抗体阳性率未见显著性差异。不同入学前家庭所在地 3种抗体阳性率均有显著性差异 ,其中以农村籍学员抗体阳性率最高 ,城市最低。结论 该军校人群中诺瓦克样病毒感染普遍 。

RT-PCR方法检测贝类中诺沃克样病毒的研究

目的:本研究从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒(NLVs)的方法。方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化了甘氨酸缓冲液-聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较了异硫氰酸胍法、SDS-蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法四种RNA提取方法;对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证。结果:本研究采用的pH9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%,利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×102RT-PCR50/5g贝肉,实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基因测序结果亦证实为阳性。结论:本研究建立了一个灵敏度较高、较为有效的RT-PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒的方法。

实时荧光定量PCR检测GI型诺瓦克样病毒方法的建立

目的建立临床粪便中GI型诺瓦克样病毒的实时荧光定量PCR检测方法。方法针对诺瓦克样病毒GI型保守序列,用序列比对软件设计特异性引物与探针,建立诺瓦克样病毒实时荧光定量PCR检测方法。并用常规RT-PCR和本文建立的实时荧光定量PCR对137份临床腹泻标本进行检测。结果该方法对诺瓦克样病毒检测准确,重复性好,标准曲线的线性范围为102～107拷贝,相关系数为0.9991。并且对临床标本的检出率显著高于普通RT-PCR。结论本研究建立的实时荧光定量PCR方法可用于检测临床腹泻粪便标本中的GI型诺瓦克样病毒,从而有效预防和控制该病毒的传染。

诺瓦克病毒感染的护理干预

目的观察诺瓦克病毒71例感染病例的护理效果。方法回顾性分析2005年12月14日在北京市房山区第一医院住院接受治疗的71例诺瓦克病毒患者进行研究,均采取护理干预,分析所有患者的预后情况。结果71例患者中,所有患者均病情痊愈后出院,无1例感染死亡者,平均住院为(8.38±1.28)d,出院生命体征稳定,胃肠道症状均消失,后期医院未出现新病例。结论针对诺瓦克病毒感染患者,实施护理干预后,患者相关症状有效好转,预后较为良好,感染得到有效控制,值得应用。

2001年广州市婴幼儿杯状病毒腹泻病的基因研究

目的 了解广州地区婴幼儿腹泻病杯状病毒感染的特点及病毒的基因型。方法 收集 2 0 0 1年 11～ 12月因非细菌性腹泻病而来我院门诊或住院的患儿粪便共 2 2例。使用RT PCR方法对大便标本进行杯状病毒检测。杯状病毒RT PCR阳性的标本分别克隆到PMD18 T载体中后 ,转化进入大肠杆菌DH5a感受态细胞 ,通过蓝、白斑挑选克隆 ,用限制性内切酶EcoRI和BamHI筛选克隆 ,用PCR鉴定阳性克隆。序列测定由宝生物工程 (大连 )公司完成。结果 2 2例标本中杯状病毒RT PCR阳性 2例 ,杯状病毒阳性率 9% (2 / 2 2 )。测序位置为RNA多聚酶片段。序列分析结果为诺沃克样病毒基因 2型 ,与北京CR84 0共享序列非常接近。结论 杯状病毒是广州地区婴幼儿腹泻病的病原之一。基因分析为诺沃克样病毒基因 2型。

反转录PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒的研究

目的:从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒(NLVs)的方法。方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化甘氨酸缓冲液-聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较异硫氰酸胍法、SDS-蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法4种RNA提取方法;对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证。结果:采用pH9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%;利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×102RT-PCR50/5g贝肉;实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基因测序结果亦证实为阳性。结论:建立了一个灵敏度较高的RT-PCR检测贝类中诺瓦克样病毒的方法。

诺瓦克样病毒实时荧光定量PCR检测方法研究

目的建立贝类中GⅡ型诺瓦克样病毒的实时荧光定量PCR检测方法。方法针对GⅡ型诺瓦克样病毒保守序列，设计出简并引物与探针，建立GⅡ型诺瓦克样病毒实时荧光定量PCR检测方法。并用该方法和常规PCR法对127份贝类标本进行检测。结果研究方法对GⅡ型诺瓦克样病毒检测准确和重复性好，灵敏度为10拷贝。标准曲线的线性范围为10^1～10^5拷贝，相关系数为0．9986，并且对贝类标本的检出率显著高于常规PCR。结论本研究建立了GⅡ型诺瓦克样病毒的实时荧光定量PCR检测方法，可用于贝类中GⅡ型诺瓦克样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测。