碱液和木瓜蛋白酶预处理对葛仙米多糖提取效果的影响

多糖的保健功能日益得到学术界的重视与证实。葛仙米中含有丰富的多糖。以碱液和木瓜蛋白酶对葛仙米进行预处理,正交试验确定最佳预处理工艺。多糖提取条件为料水比1:300,于90℃水浴提取2次,2h/次。结果说明,以木瓜蛋白酶预处理葛仙米,按100mg葛仙米加入10ml水充分吸胀后,加入含1.5mg木瓜蛋白酶的缓冲液,在50℃的水浴条件下,经过10h预处理后,葛仙米多糖得率最高,为29.53%。以NaOH溶液预处理葛仙米,最佳的条件是0.4mol/L的浓度,于40℃处理2h,多糖得率可高达35.15%。将碱与酶结合使用,则多糖的得率可以高达47.56%,比对照高出25.12%。

葛仙米水溶性多糖含量测定方法的研究

为建立葛仙米中水溶性多糖含量的测定方法,对葛仙米水溶性多糖的预处理方法进行优化,并对苯酚-硫酸法测其多糖含量的方法学进行考察。结果表明:葛仙米水溶性多糖含量最佳的提取条件为水浴100℃、加热时间6 h、料液比1∶500,提取的多糖含量达32. 65%。葡萄糖标准溶液浓度(y)在0-0. 1 mg/mL范围内与吸光度值有较好的线性关系,线性方程y=0. 1202x-0. 0054,R2=0. 9997;苯酚-硫酸法测定葛仙米水溶性多糖的精密度、重现性和显色稳定性的相对标准偏差(RSD)分别为0、1. 289%和0. 584%,说明测定结果精密度高、重现性好、显色稳定;平均加样回收率为100. 13%、RSD为1. 18%,表明加样回收率高、结果可靠。

葛仙米多糖中单糖定性定量分析方法研究

建立了柱前PMP衍生高效液相色谱法分离检测6种中性糖、2种糖醛酸及1种糖胺的方法;考察了三氟乙酸(TFA)水解多糖的时间、温度以及三氟乙酸浓度对多糖水解的影响;采用液相色谱法分析葛仙米多糖提取物中的单糖组成。结果表明:甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖等9种单糖平均回收率为81. 08%~102. 10%。相较于化学法,该方法准确可靠,线性关系良好,重复性和专属性好,可以很好地完成葛仙米多糖提取物中单糖的定性定量分析。

单因素法考察葛仙米多糖提取工艺

为开发利用葛仙米多糖资源,基于多糖和单糖含量考察其提取工艺。通过单因素法,对工艺中提取方法、提取时间、提取温度、提取次数以及液料比进行考察。最佳提取方式为水浴提取,提取温度100℃,提取时间1.5 h,液料比200︰1 mL/g,提取3次,此条件下测得不同批次的样品中粗多糖平均得率为51.51%,水解衍生后其组成为葡萄糖醛酸、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,单糖总量平均得率为28.72%。研究结果准确可靠,可为后续葛仙米地方质量标准中多糖提取、纯化、水解和含量测定等研究奠定基础,为规范葛仙米相关产品质量提供依据。