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人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用 被引量:1
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作者 薛斯亮 王晓珊 +1 位作者 李东川 张珏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第2期296-300,共5页
背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目... 背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目的:探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。方法:在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-timePCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA表达量。结果与结论:覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组(P<0.01),只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。 展开更多
关键词 组织构建 组织构建细胞学实验 转化生长因子Β 受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa 人角质形成细胞 notch nicd
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主动脉瓣膜钙化中胰高血糖素样肽-1对Notch1-Sox9信号通路的调控作用 被引量:1
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作者 查晴 肖凡 +5 位作者 张倩茹 叶佳雯 张煜 杨玲 杨克 刘艳 《国际心血管病杂志》 2021年第6期370-375,379,共7页
目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及GLP-1受体(GLP-1R)下游信号通路对主动脉瓣膜间质细胞钙化的调控作用。方法:收集16例因主动脉瓣病变行置换术患者(瓣膜钙化组)和20例因其他原因行心脏移植但瓣膜正常患者(对照组)的主动脉瓣。苏木精... 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及GLP-1受体(GLP-1R)下游信号通路对主动脉瓣膜间质细胞钙化的调控作用。方法:收集16例因主动脉瓣病变行置换术患者(瓣膜钙化组)和20例因其他原因行心脏移植但瓣膜正常患者(对照组)的主动脉瓣。苏木精-伊红染色(HE染色)和茜素红染色法检测瓣膜结构变化及钙化情况,免疫组织化学染色检测GLP-1R表达情况。培养原代小鼠瓣膜间质细胞,分为正常培养组、钙化培养组和钙化培养+GLP-1组,茜素红染色检测钙化情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Sox9 mRNA表达水平,Western blot检测GLP-1R、Sox9、Notch胞内结构域(NICD)的蛋白表达水平,免疫荧光法检测Sox9细胞定位及NICD入核情况。结果:与对照组比较,瓣膜钙化组人主动脉瓣组织茜素红染色显示阳性区增加,免疫组织化学染色显示GLP-1R表达水平下降。体外培养小鼠主动脉瓣膜间质原代细胞,与正常培养组比较,钙化培养组光镜下发现细胞出现形态改变,茜素红染色阳性区域增加,GLP-1R蛋白表达水平明显下降(P<0.05),NICD入核量减少,NICD蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。与钙化培养组比较,钙化培养+GLP-1组光镜下细胞形态基本正常,茜素红染色阳性区域减少,GLP-1R蛋白表达水平明显升高,Sox 9的mRNA及蛋白表达水平明显升高,NICD入核量增加,NICD蛋白表达水平明显升高(P均<0.05)。结论:GLP-1通过激活其受体GLP-1R调控主动脉瓣膜间质细胞中NICD入核,诱导Sox9表达升高,抑制主动脉瓣膜钙化。 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽-1受体 瓣膜间质细胞 钙化 SOX9 notch胞内肽段
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Notch家族4个蛋白质对人胰腺癌细胞HPAC中YY1和EGFR表达的影响 被引量:1
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作者 陈佳 李炳秋 张玉祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期599-607,共9页
Notch信号通路是肿瘤形成过程中一种重要的信号通路,其中心分子为Notch受体.Notch受体为细胞膜上的单次跨膜蛋白,介导细胞间信号转导,哺乳动物细胞内包括Notch1、Notch2、Notch3和Notch4的4个成员.Notch家族4个蛋白质在结构和功能上存... Notch信号通路是肿瘤形成过程中一种重要的信号通路,其中心分子为Notch受体.Notch受体为细胞膜上的单次跨膜蛋白,介导细胞间信号转导,哺乳动物细胞内包括Notch1、Notch2、Notch3和Notch4的4个成员.Notch家族4个蛋白质在结构和功能上存在差异.前期研究显示,Notch1信号通路与转录因子YY1(YING-YANG 1)、表皮生长因子受体(EGFR)间存在调控作用.本研究在人胰腺癌细胞HPAC中,采用RNA干扰技术,分别降低细胞中Notch家族4个蛋白质的表达,检测YY1和EGFR在m RNA和蛋白质水平上的表达;并构建相应的激活形式的Notch受体——Notch胞内结构域(Notch intracellular domain,NICD)真核表达质粒,在HPAC细胞中分别过表达4种NICD,检测其对YY1和EGFR表达水平的影响.结果显示,降低细胞中Notch1或Notch3的表达,均使HPAC细胞中EGFR m RNA和蛋白质水平升高(P<0.05),而降低Notch2和Notch4后,EGFR m RNA和蛋白质水平没有改变(P>0.05).分别降低4个Notch的表达,对YY1的蛋白质和m RNA表达水平均没有改变(P>0.05).在HPAC细胞中过表达N1ICD和N3ICD后,YY1和EGFR的蛋白质水平降低(P<0.05),而过表达N2ICD和N4ICD后,YY1和EGFR蛋白质水平没有改变(P>0.05).分别过表达4种NICD均没有改变YY1和EGFR的m RNA表达水平(P>0.05).初步得出结论是,在HPAC细胞中,Notch信号通路经Notch1和Notch3影响EGFR的表达.Notch1和Notch3对EGFR的表达可能具有负调控作用.在Notch1和Notch3过度激活时,这种调控作用通过YY1介导.本文可为深入研究Notch信号通路对胰腺癌发生发展的作用机制提供有意义的参考. 展开更多
关键词 胰腺癌 notch信号通路 notch胞内结构域 YY1(YING-YANG1) 表皮生长因子受体
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黄芪多糖干预对骨关节炎模型小鼠关节软骨损伤的修复 被引量:15
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作者 史桂荣 任博文 +3 位作者 张仲博 王莉莎 张啟威 史栋梁 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第20期3236-3242,共7页
背景:黄芪多糖对骨关节炎有确切疗效,但其作用机制还不清楚。目的:探讨黄芪多糖调控包含WW域的E3泛素蛋白连接酶2(WW domain containing E3 ubiquitin protein ligase 2,WWP2)介导的Notch受体1泛素化对骨关节炎的影响。方法:①体内实验... 背景:黄芪多糖对骨关节炎有确切疗效,但其作用机制还不清楚。目的:探讨黄芪多糖调控包含WW域的E3泛素蛋白连接酶2(WW domain containing E3 ubiquitin protein ligase 2,WWP2)介导的Notch受体1泛素化对骨关节炎的影响。方法:①体内实验:30只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪多糖组,每组10只。除假手术组外,构建小鼠骨关节炎模型,黄芪多糖组给予黄芪多糖干预,干预4周后麻醉小鼠取膝关节组织,番红O染色法、国际骨关节炎研究协会评分评估小鼠关节软骨损伤情况。②体外实验:采用5μg/L白细胞介素1β培养C28/12细胞24 h建立骨关节炎细胞模型,分为对照组、白细胞介素1β组、50 mg/L黄芪多糖处理组、黄芪多糖联合Notch受体1过表达或WWP2干扰组。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术测凋亡,蛋白质免疫共沉淀实验用于验证WWP2和Notch受体1的结合,泛素化实验分析黄芪多糖对WWP2介导的Notch受体1泛素化水平的影响,酶联免疫吸附法检测小鼠膝关节组织和C28/12细胞中蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13水平,免疫印迹法检测小鼠膝关节组织和C28/12细胞中WWP2、Notch受体1、锯齿状Notch配体1和Notch胞内域1蛋白的表达。结果与结论:①体内实验结果证实,黄芪多糖干预缓解了小鼠软骨损伤,抑制了膝关节组织基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13水平,增加了蛋白聚糖和Ⅱ型胶原表达水平;②体外实验结果证实,黄芪多糖干预促进了细胞增殖、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原及WWP2的表达,抑制了细胞凋亡、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13水平、Notch受体1、锯齿状Notch配体1和Notch胞内域1蛋白的表达,Notch受体1过表达和WWP2干扰逆转了黄芪多糖的作用;③黄芪多糖促进了WWP2介导的Notch受体1的泛素化水平;④结果表明,黄芪多糖通过提高WWP2介导的Notch受体1泛素化水平,抑制Notch信号通路,对小鼠骨关节炎起到一定的治疗作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 WWP2 泛素化 notch受体1 骨关节炎
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The contribution of oligodendrocytes and oligodendrocyte progenitor cells to central nervous system repair in multiple sclerosis: perspectives for remyelination therapeutic strategies 被引量:9
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作者 Adriana Octaviana Dulamea 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第12期1939-1944,共6页
Oligodencrocytes(OLs) are the main glial cells of the central nervous system involved in myelination of axons. In multiple sclerosis(MS), there is an imbalance between demyelination and remyelination processes, th... Oligodencrocytes(OLs) are the main glial cells of the central nervous system involved in myelination of axons. In multiple sclerosis(MS), there is an imbalance between demyelination and remyelination processes, the last one performed by oligodendrocyte progenitor cells(OPCs) and OLs, resulting into a permanent demyelination, axonal damage and neuronal loss. In MS lesions, astrocytes and microglias play an important part in permeabilization of blood-brain barrier and initiation of OPCs proliferation. Migration and differentiation of OPCs are influenced by various factors and the process is finalized by insufficient acummulation of OLs into the MS lesion. In relation to all these processes, the author will discuss the potential targets for remyelination strategies. 展开更多
关键词 multiple sclerosis oligodencrocytes oligodendrocyte progenitor cells DEMYELINATION REMYELINATION semaphorin basic helix-loop-helix transcription factor oligodendrocyte transcription factor 2 leucin-rich repeatand immunoglobulin-like-domain-containing nogo receptor-interacting protein I canonical notch signaling endocrine receptors
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高渗盐水对脑缺血大鼠Notch信号通路的影响
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作者 韩永丽 朱高峰 +7 位作者 黄林强 邓医宇 王桥生 江稳强 温妙云 陈胜龙 胡北 曾红科 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期444-449,共6页
目的:探讨高渗盐水( hypertonic saline, HS)对大鼠脑缺血后小胶质细胞Notch信号通路的影响。方法 SPF级-雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为假手术组,脑缺血组,生理盐水( NS)组,10%高渗盐水(10%HS)组。除假手术组外,其他... 目的:探讨高渗盐水( hypertonic saline, HS)对大鼠脑缺血后小胶质细胞Notch信号通路的影响。方法 SPF级-雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为假手术组,脑缺血组,生理盐水( NS)组,10%高渗盐水(10%HS)组。除假手术组外,其他各组采用线栓法复制右侧大脑中动脉栓塞脑缺血模型,缺血2 h后实施再灌注24 h, NS组和10%HS组按0.3 mL/h经尾静脉分别匀速泵入NS和10%HS治疗24 h。然后采用免疫荧光法、 RT-PCR、 Western blot检测各组大鼠脑缺血灶周围Notch1及Notch受体的胞内片段NICD的表达。数据采用单因素方差分析,用LSD法进行组间两两比较,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果免疫荧光表明与假手术组比较,脑缺组和NS组缺血灶周围小胶质细胞Notch1与NICD的表达明显增加;10%HS组与脑缺血组及NS组比较,缺血灶周围小胶质细胞Notch1与NICD的表达明显减少。 RT-PCR表明脑缺血组及NS组与对照组比较, Notch1 mRNA的表达明显增加(对照组:1.000±0.076;脑缺血组:2.203±0.283; NS组:1.616±0.185; P<0.01);10%HS组与脑缺血组及NS组比较, Notch1 mRNA的表达均明显减少(脑缺血组:2.203±0.283; NS 组:1.616±0.185; HS 组:1.202±0.177; P <0.05)。 Western blot表明脑缺血组和 NS 组与对照组相比,脑缺血灶周围 Notch1蛋白表达明显增加(对照组:0.290±0.079;脑缺血组:0.750±0.029; NS 组:0.765±0.182; P <0.01);10%HS 治疗后, Notch1蛋白表达较脑缺血组和NS组明显减少(脑缺血组:0.750±0.029; NS组:0.765±0.182;HS组:0.390±0.195; P<0.05)。脑缺血组和NS组与对照组比较,大鼠脑缺血灶周围NICD蛋白表达明显增加(对照组:0.401±0.196;脑缺血组:0.906±0.359; NS组:0.847±0.153; P<0.01);10%HS治疗后, NICD蛋白表达较脑缺血组和NS组明显减少(脑缺血组:0.906±0.359;NS组:0.847±0.153; HS组:0.561±0.165; P<0.05)。结论 HS可抑制大鼠脑缺血后小胶质细胞上Notch信号通路的激活。 展开更多
关键词 高渗盐水 生理盐水 脑缺血 大脑中动脉栓塞 小胶质细胞 notch信号通路 notch1 nicd
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基于Notch通路探讨缺氧对小胶质细胞IL-1β表达的影响
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作者 韩永丽 黎春常 +4 位作者 丁洪光 黄林强 刘新强 陈胜龙 曾红科 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1584-1589,共6页
目的探讨缺氧后小胶质细胞Notch信号通路是否激活,及其对IL-1β表达的影响。方法将BV-2小胶质细胞分为对照组、缺氧无糖培养组(oxygen glucose deprivation,OGD组)、及缺氧无糖培养+10μmol/L DAPT组(DAPT组);对照组细胞正常培养,OGD组... 目的探讨缺氧后小胶质细胞Notch信号通路是否激活,及其对IL-1β表达的影响。方法将BV-2小胶质细胞分为对照组、缺氧无糖培养组(oxygen glucose deprivation,OGD组)、及缺氧无糖培养+10μmol/L DAPT组(DAPT组);对照组细胞正常培养,OGD组、DAPT组缺氧培养4 h(含3%O2,5%CO2,92%N2培养箱中培养)后在正常培养箱中复氧24 h。先用CCK8分析10μmol/L DAPT对BV-2小胶质细胞活性的影响;Western blot检测各组BV-2小胶质细胞中活化的Notch信号通路下游蛋白NICD的表达,以及免疫荧光法、RT-PCR、Western blot检测各组BV-2小胶质细胞IL-1β的表达。数据采用单因素方差分析,用LSD-t法进行组间两两比较,P<0.05为差异有统计学意义。结果CCK8检测OGD组及DAPT组的OD值分别为:0.269±0.013、0.265±0.025(P>0.05);表明10μmol/L DAPT对BV-2小胶质细胞活性无影响。Western blot提示:与对照组比较,OGD组与DAPT组BV-2小胶质细胞NICD蛋白表达明显增加;与OGD组比较,DAPT抑制Notch信号通路后BV-2小胶质细胞NICD蛋白表达明显减少(对照组:0.632±0.065,OGD组:1.276±0.049,DAPT组:0.938±0.049,P<0.05)。免疫荧光提示:对照组BV-2小胶质细胞少量表达IL-1β;OGD组与DAPT组BV-2小胶质细胞IL-1β的表达明显增加;与OGD组比较,DAPT组BV-2小胶质细胞IL-1β的表达明显减少。RT-PCR提示:与对照组比较,OGD组与DAPT组BV-2小胶质细胞IL-1βmRNA表达明显增加;与OGD组比较,DAPT组BV-2小胶质细胞IL-1βmRNA表达明显减少(对照组:1.000±0.173,OGD组:2.741±0.207,DAPT组:1.762±0.177,P<0.05)。Western blot提示:与对照组比较,OGD组与DAPT组BV-2小胶质细胞IL-1β蛋白表达明显增加;与OGD组比较,DAPT组BV-2小胶质细胞IL-1β蛋白表达明显减少(对照组:0.422±0.030,OGD组:1.236±0.143,DAPT组:0.730±0.047,P<0.05)。结论缺氧可激活小胶质细胞Notch信号通路,抑制Notch信号通路可减少缺氧小胶质细胞IL-1β的表达。 展开更多
关键词 缺氧 小胶质细胞 notch信号通路 OGD DAPT nicd IL-1Β 脑缺血-再灌注损伤
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