基于Notch1/NF-κB信号轴探讨败酱草总黄酮对大鼠脑缺血耐受模型炎症级联反应的影响

目的:研究败酱草总黄酮对大鼠脑缺血耐受模型炎症级联反应的影响。方法:采用阻断大鼠双侧颈总动脉(CCA)10 min作为缺血预处理,再灌注120 h后,线栓阻塞法阻断左侧大脑中动脉2 h,再复灌22 h,建立大鼠脑缺血耐受模型。于第1次缺血预处理开始,连续灌药7 d。末次给药后,取脑部中间位置,观察脑组织梗死面积;ELISA法测定脑组织匀浆白介素-1(IL-1)、IL-10、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、低氧诱导因子(HIF-1)和热休克蛋白70(HSP70)含量;免疫组化法检测皮质区Notch信号受体1(Notch1)和核转录因子κB-p65(NF-κB p65)的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组脑梗死面积,脑组织IL-1、TNF-α、MMP-2、MMP-9、TGF-β、HIF-1、HSP70含量及其脑皮质区Notch1、NF-κBp65蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,败酱草总黄酮200 mg/kg组能够明显降低脑梗死面积(P<0.05),败酱草总黄酮100、200 mg/kg组能明显降低IL-1、TNF-α、MMP-2、MMP-9含量(P<0.05),200 mg/kg组能显著升高TGF-β、IL-10、HIF-1、HSP70含量(P<0.05);败酱草总黄酮200 mg/kg组Notch1、NF-κBp65蛋白表达显著下调(P<0.01),败酱草总黄酮100 mg/kg组Notch1、NF-κBp65蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:败酱草总黄酮能调控脑缺血后体内促炎因子和抗炎因子的失衡状态,抑制炎症级联反应,减轻脑组织损伤,发挥脑保护作用。

穴位贴敷通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调节原发性痛经大鼠的免疫功能

目的:基于Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD)88/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路探讨石墨烯暖宫穴位贴对原发性痛经(PD)模型大鼠免疫功能的影响及对辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法:将SD雌性大鼠随机分成正常组、模型组和穴贴组,每组10只。股部皮下注射苯甲酸雌二醇制备PD模型。在造模的同时予穴贴组大鼠石墨烯暖宫穴位贴贴敷“关元”“子宫”(双侧)和“三阴交”(双侧)干预,连续10 d、1次/d、5 h/次。第11天腹腔注射缩宫素观察各组大鼠的扭体潜伏时间、30 min内的扭体次数,进行扭体评分;计算脾脏和胸腺的脏器指数;HE染色法观察大鼠脾脏和胸腺组织的病理变化;ELISA法检测血清免疫球蛋白(Ig)A、IgG、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-2、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4和IL-10含量;Western blot法和实时荧光定量PCR法分别检测大鼠子宫组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的蛋白及mRNA的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现扭体反应(P<0.01),30 min内扭体次数和扭体评分显著增加(P<0.001);脾脏指数和胸腺指数均显著降低(P<0.01,P<0.05);脾脏和胸腺均出现了明显的病理变化;血清IgA、IgG、TNF-α、IL-2、IFN-γ含量显著升高,IL-4和IL-10含量显著降低(P<0.001,P<0.01);子宫组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白及mRNA表达均显著升高(P<0.001)。与模型组比较,穴贴组大鼠扭体潜伏时间延长(P<0.001),其他指标均逆转(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论:石墨烯暖宫穴位贴可通过调控TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路,调节Th1/Th2的免疫平衡,修复免疫组织的病理损伤,改善免疫功能,从而有效缓解PD大鼠的疼痛症状。