异氟醚抑制Notch-1通路诱导小鼠神经干细胞凋亡

目的:探讨异氟醚对小鼠神经干细胞的影响及其可能的机制。方法:分离小鼠神经干细胞并培养,分为对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组和异氟醚组。对照组无任何干预,异氟醚组给予异氟醚,PBS组给予等量的PBS,培养24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖率;实时定量–聚合酶链反应法检测凋亡相关基因的mRNA水平;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡。结果:与对照组和PBS组比较,异氟醚组细胞增殖率明显降低,同时Notch-1、CBF-1、Hes-1基因的mRNA及相应蛋白表达水平也显著下降。异氟醚组细胞凋亡数目与对照组、PBS组比较,差异有统计学意义。结论:异氟醚能够诱导小鼠神经干细胞的凋亡,此作用与Notch-1信号通路的抑制密切相关。

miR-138调控Notch-1信号通路对脑胶质瘤细胞增殖与分化作用及其机制研究

目的探讨miR-138调控Notch-1信号通路对脑胶质瘤细胞增殖及分化的作用及其机制。方法收集18例鉴定为脑胶质瘤患者的脑组织活检标本和5例神经外科脑外伤手术患者的正常脑组织活检标本。培养人脑胶质瘤细胞株U-87 MG分别转染miR-138 mimics、miR-138 inhibitor为Mimics组和Inhibitor组,设立空白对照Blank组。采用qRT-PCR检测组织和细胞miR-138表达水平,采用Western Blot法检测组织和细胞Notch-1和Hes-1水平,采用半定量PCR检测组织和细胞Notch1 mRNA和Hes1 mRNA水平。采用CKK 8实验检测细胞增殖情况,WST-8法检测细胞分化情况。结果与WHO分级Ⅰ级比较,脑胶质瘤组织WHO分级Ⅱ级和Ⅲ级miR-138相对表达量下降;与正常脑组织比较,病理类型为星形细胞瘤、间变少突胶质细胞瘤和间变星形细胞瘤的脑胶质瘤组织miR-138相对表达量均下降,Notch-1蛋白、Hes-1蛋白、Notch1 mRNA和Hes1 mRNA相对表达量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。脑胶质瘤细胞株U-87 MG Blank组、Mimics组、Inhibitor组的miR-138相对表达量分别为0.63±0.02、0.92±0.05、0.46±0.05,差异具有统计学意义(F=101.966,P <0.001);3组间Notch-1蛋白、Hes-1蛋白、Notch1 mRNA和Hes1 mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中Mimics组相对表达量最低,Inhibitor组相对表达量最高。CCK8实验结果显示,与Blank组比较,Mimics组24、48、72 h时细胞增殖均下降,Inhibitor组24、48、72 h时细胞增殖均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。WST-8检测结果显示,在3、5、7 d与Blank组的活细胞数比较,Mimics组均降低,Inhibitor组均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论不同WHO分级与病理类型分型的脑胶质瘤患者的miR-138水平存在差异,miR-138可能通过负向调控Notch-1信号通路抑制脑胶质瘤细胞U-87 MG增殖和分化。

芍药苷通过抑制Notch-1信号通路影响肝癌细胞增殖、侵袭和凋亡的机制研究

目的探讨芍药苷对肝癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法使用不同浓度(0、25、50、75、100、150μmol/L)芍药苷处理人肝癌细胞系HepG2,采用CCK-8法检测细胞增殖活性。根据芍药苷浓度将HepG2细胞株分为四组:空白对照组(0μmol/L)、芍药苷低剂量组(25μmol/L)、芍药苷中剂量组(50μmol/L)和芍药苷高剂量组(75μmol/L)。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell法细胞侵袭迁移能力,Western blot法测定Notch-1和Hes-1蛋白水平。结果使用不同浓度(0、25、50、75、100、150μmol/L)芍药苷处理HepG2细胞24 h后,细胞增殖活性呈剂量依赖性降低[(83.34±8.06)%、(74.46±7.34)%、(63.59±2.51)%、(55.93±4.05)%、(39.99±6.06)%比100%,P<0.05]。当不同浓度(0、25、50、75μmol/L)芍药苷处理HepG2细胞24 h后,细胞穿膜数逐渐降低[(64.33±5.13)个、(49.67±3.51)个、(30.00±2.00)个比(85.33±5.51)个,P<0.05],细胞凋亡率逐渐升高[(13.37±2.57)%、(22.64±2.19)%、(28.53±1.37)%比(2.43±0.93)%,P<0.05],Notch-1蛋白表达水平逐渐降低[(0.75±0.05)、(0.55±0.06)、(0.39±0.04)比(1.13±0.15),P<0.05],Hes-1蛋白表达水平也逐渐降低[(0.55±0.07)、(0.38±0.04)、(0.17±0.03)比(0.80±0.07),P<0.05]。结论芍药苷呈剂量依赖性抑制肝癌细胞HepG2增殖、侵袭,并可促进细胞凋亡,其机制可能与抑制Notch-1信号通路相关。

NOTCH-1信号通路对人脑胶质瘤干细胞增殖和分化作用的研究

目的分析NOTCH-1信号通路对人脑胶质瘤干细胞增殖和分化作用。方法选取医院2015年1月-2017年1月收治的人脑胶质瘤患者50例,从人脑胶质瘤组织标本和细胞株中提出胶质瘤干细胞体外培养,对胶质瘤干细胞增殖和分化作用中NOTCH-1信号通路基因和蛋白表达情况进行分析。结果高度恶性胶质瘤光密度值(IOD)高于低度恶性胶质瘤(P<0.05);在胶质瘤干细胞增殖过程中,NOTCH-1、CBF-1、HES-1在CD133+中表达较强,干细胞分化时,表达减弱。结论 NOTCH-1信号通路参与了人脑胶质瘤干细胞增殖和分化过程,在人脑胶质瘤中高表达,为疾病治疗提供了重要依据。

鼠李素下调Notch-1的表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的调节作用

目的探索鼠李素对乳腺癌MCF-7细胞增殖,侵袭和迁移的影响及其分子机制。方法MCF-7细胞分为4组:MCF-7(对照组)、鼠李素(1、2.5、5μM)组。CCK-8检测细胞增殖。Transwell检测细胞侵袭。划痕实验分析细胞迁移。蛋白印记检测Notch-1、CSL、Hes1、Ki67和VEGF表达。结果低浓度的(<5μM)的鼠李素不会影响MCF-7细胞活力;高浓度的(>5μM)的鼠李素对MCF-7有显著毒性。2.5和5μM鼠李素组细胞增殖倍数明显低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,鼠李素(1、2.5、5μM)组细胞侵袭和迁移明显降低(P<0.05)。另外,鼠李素(1、2.5、5μM)组Notch-1、CSL和Hes1相对蛋白表达量都明显少于对照组(P<0.05)。而且,Notch-1通路激活剂Jagged1(10μM)还可明显抑制鼠李素(5μM)诱导的Notch-1、CSL、Hes1、Ki67和VEGF表达的下降(P<0.05)。结论鼠李素通过下调Notch-1的表达抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,侵袭和迁移。

肿瘤细胞间相互作用：Notch-1信号转导与调控机制

Notch-1信号通路在细胞分化、发育以及增殖、凋亡方面起重要作用,并参与肿瘤的发生发展,与肿瘤的侵袭、运动和转移过程密切相关。活化的Notch-1信号通路能够直接或间接调控细胞的增殖和迁移,促进肿瘤细胞发生上皮细胞间充质转换,并维持其间充质特性,增强肿瘤细胞的黏附能力。同时,Notch信号通路与PI3K/Akt、NF-κB等途径交互作用,将信号级联放大,从而加强调控肿瘤细胞的恶性行为。多种实体瘤中存在异常活化的Notch-1信号通路。从Notch的结构和功能、Notch-1信号通路与肿瘤发生和转移的关系、Notch-1调控肿瘤转移的分子机制与调控网络和以Notch为靶点的肿瘤治疗5个方面进行综述。阐明Notch-1信号通路在肿瘤转移过程中的作用与调控机制以及目前针对Notch-1信号通路的治疗策略,能够为肿瘤的病理机制和临床治疗研究提供参考信息。

运动可能通过下调肾脏Notch-1信号改善Ⅱ型糖尿病大鼠肾功能

目的:观察有氧游泳运动对Ⅱ型糖尿病大鼠肾脏损伤的改善效果,并探讨其可能的机制。方法:45只4周龄健康雄性SD大鼠,随机抽取10只为正常对照组,基础饲料喂养;其余35只经高糖高脂喂养5周后,配合腹腔注射STZ(35 mg/kg.bw)诱导建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型;7周后,将成模大鼠随机分为糖尿病安静组和糖尿病运动组,每组14只。3组大鼠均采用基础饲料喂养;糖尿病运动组大鼠进行8周有氧游泳运动;正常对照组、糖尿病安静组2组大鼠均自由活动,不施加任何干预。结果:(1)8周有氧游泳运动后,糖尿病运动组肾脏在电镜下的形态表现为肾小球三层结构较清晰,基底膜增厚不明显,足突融合减少,溶酶体增多现象等均有一定程度减少,较糖尿病安静组有明显改善;(2)糖尿病运动组血糖浓度和24 h UA排泄量较糖尿病安静组显著降低(分别为P<0.05或P<0.01);(3)糖尿病运动组肾皮质Jagged-1、Val1744NICD和Hes-1蛋白的表达较糖尿病安静组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:运动可提高Ⅱ型糖尿病大鼠肾功能,改善大鼠肾脏损伤,可能与其下调Ⅱ型糖尿病状态下激活的Notch-1信号通路有关。

miR-155对兔鼻窦炎骨质重塑和Notch-1及DLL4的影响

目的探讨miR-155对鼻窦炎模型兔Notch-1信号通路及鼻窦骨质重塑的影响。方法将32只兔随机分为假手术组、模型组、miR-155 antagomir组、miR-155 antagomir阴性对照组,除假手术组外,其余各组构建鼻窦炎模型。建模同时,药物处理组兔尾静脉注射miR-155 antagomir、miR-155 antagomir阴性对照,假手术组和模型组兔尾静脉注射等量生理盐水,给药结束24 h后对兔鼻部症状进行评分,然后处死,苏木精-伊红(HE)染色法检测各组兔鼻窦黏膜病理变化情况,并进行炎症评分,CT扫描及碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测兔鼻窦骨壁结构骨质重塑活性并进行评分;酶联免疫吸附法(ELISA)检测兔血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、骨保护素(OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)水平;实时荧光定量PCR检测鼻窦组织中miR-155及Notch信号通路相关因子mRNA水平;采用免疫印迹法检测鼻窦组织中Notch信号通路相关因子蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组兔鼻部症状评分、鼻窦黏膜炎症评分,鼻窦骨壁结构骨质重塑活性评分,血清TNF-α、IL-6、OPG及RANKL水平,鼻窦组织miR-155表达水平,Notch-1和DLL4 mRNA及蛋白表达水平均升高(P均<0.05)。与模型组比较,miR-155 antagomir组兔鼻部症状评分,鼻窦黏膜炎症评分,鼻窦骨壁结构骨质重塑活性评分,血清TNF-α、IL-6、OPG及RANKL水平,鼻窦组织miR-155表达水平,Notch-1和DLL4 mRNA及蛋白表达水平均降低(P均<0.05);miR-155antagomir阴性对照组各指标均无明显变化(P均>0.05)。结论下调miR-155表达可抑制Notch-1信号通路激活,降低炎性因子及OPG、RANKL表达,减轻炎性反应,减弱鼻窦骨质重塑,改善鼻窦炎症状。

lncRNA FOXC2-AS1逆转骨肉瘤细胞对阿霉素耐药性的影响

目的探讨沉默长链非编码RNA FOXC2-AS1(lncRNA FOXC2-AS1)对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADM)耐药性的影响及可能作用机制。方法采用ADM长期浓度梯度递增法体外建立ADM耐药细胞株MG-63/ADR,利用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测MG-63和MG-63/ADR细胞中FOXC2-AS1的表达水平,采用阴性对照序列和si-FOXC2-AS1序列转染MG-63/ADR细胞作为si-NC组和si-FOXC2-AS1组,另设空白对照组。MTT实验和平板克隆形成实验检测各组细胞对ADM的敏感性,并计算半数抑制浓度(IC50)。Western blotting法检测各组细胞中Notch-1及下游靶因子Hes-1、Hey-1、Hey-2蛋白水平。结果体外成功建立MG-63/ADR耐药细胞株,1、5、25、125、625、3125、15 625 ng/ml ADM对MG-63/ADR细胞的增殖抑制率分别为(5.90±0.48)%、(9.86±0.85)%、(16.75±2.21)%、(29.84±2.98)%、(50.45±4.96)%、(54.82±5.33)%和(57.69±5.76)%,明显低于MG-63细胞。ADM对MG-63和MG-63/ADR的IC50分别为106.55 ng/ml和685.47 ng/ml。MG-63/ADR耐药指数为6.43。si-FOXC2-AS1组FOXC2-AS1的相对表达量为0.44±0.12,低于空白对照组(1.43±0.22)和si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。1、5、25、125、625、3125和15 625 ng/ml ADM对si-FOXC2-AS1组MG-63/ADR细胞的增殖抑制率分别为(6.36±0.40)%、(13.41±1.05)%、(32.45±2.69)%、(49.73±4.14)%、(64.82±4.67)%、(77.56±5.79)%和(79.50±5.62)%,明显高于空白对照组。转染si-FOXC2-AS1后MG-63/ADR细胞对ADM的敏感性增加了4.25倍。si-FOXC2-AS1组经ADM(100 ng/ml)作用96 h后,MG-63/ADR细胞克隆形成率为(27.64±7.28)%,低于空白对照组的(76.07±17.91)%和si-NC组的(69.83±15.71)%,差异有统计学意义(P<0.05)。si-FOXC2-AS1组MG-63/ADR细胞中Notch-1及其下游分子Hes-1、Hey-1、Hey-2蛋白的表达水平分别为0.67±0.15、0.52±0.10、0.45±0.12和0.38±0.11,均低于空白对照组和si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默lncRNA FOXC2-AS1表达通过抑制Notch-1信号通路的活化,进而增加MG-63/ADR细胞对ADM的敏感性。

Notch-1信号通路与甲状腺乳头状癌的关系

研究Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc与人甲状腺乳头状癌的关系,探讨Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌中的分子机制。对照人甲状腺乳头状癌及正常甲状腺组织标本各35例,采用Real Time PCR检测Notch-1、Hes1、c-Myc的mRNA表达情况,采用免疫组织化学、Western blot方法检测组织标本中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc蛋白的表达情况。Notch-1、Hes1在甲状腺乳头状癌中的mRNA表达水平明显降低,c-Myc mRNA的表达在甲状腺乳头状癌中升高,Notch-1、NICD、Hes1蛋白在人甲状腺乳头状癌中的表达低于正常甲状腺组织(P<0.05),c-Myc蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达高于正常甲状腺组织(P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织标本中,Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1在基因转录和蛋白质表达水平上均明显下调,而c-Myc的基因转录和蛋白质表达水平均升高,提示Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌的发生发展中起抑癌作用,c-Myc基因表达升高与Notch-1信号通路可能无关。

芦荟大黄素调控Notch-1/Akt/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响

目的:观察芦荟大黄素调控Notch-1/AKT/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。方法:实验分为对照组(正常培养SGC-7901细胞)、芦荟大黄素低剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素10 mg·L^-1)、芦荟大黄素中剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素30 mg·L^-1)及芦荟大黄素高剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素50 mg·L^-1)。噻唑蓝比色法检测各组细胞培养后的增殖抑制率;Transwell小室检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V-APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Notch-1/AKT/NF-κB信号通路蛋白及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达。结果:与对照组比较,芦荟大黄素低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞穿膜个数和划痕闭合率明显降低(P<0.05),G0/G1期肿瘤细胞比例增加(P<0.05),细胞凋亡AI值升高(P<0.05),Notch-1、p-Akt、P65、Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值降低,Bax表达升高(P<0.05)。结论:芦荟大黄素可能通过阻滞SGC-7901细胞在G0/G1期,抑制其增殖能力,降低迁移和侵袭能力,并通过抑制Notch-1/AKT/NF-κB信号通路起到诱导细胞凋亡作用。

Notch-1和微小RNA-200家族在胰腺癌上皮-间充质转化中的作用

目的观察Noteh-1和微小RNA（miRNA，miR）-200家族在吉西他滨（Gem）诱导的人胰腺癌PANC-1细胞上皮-间充质转化（EMT）中的作用。方法体外培养PANC-1细胞并诱导细胞EMT，Western blot实验和反转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测Notch—1、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、相关转录因子及miR-200家族成员的表达；Transwell小室检测具有EMT改变的PANC-1细胞迁移和侵袭能力。结果Gem诱导PANC-1细胞EMT最适药物浓度为10nmol／L，最适时间为9d。Western blot灰度分析显示未经Gem处理的亲代细胞（parental）组Noteh-1、E—cadherin、Vimentin、slug、snail、twist、E盒结合锌指蛋白1（ZEBl）的表达分别为0．840±0．002、0．995±0．008、1．158±0．001、0．253±0．004、0．528±0．003、0．346±0．002，0．29l±0．006，Gem（＋）组分另0为1．599±0．00l、0．483±0．001、1．821±0．003、0．719±0．004、0．919±0．005、0．762±0．002、0．70l±0．004，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。RT—PCR检测parental组Notch-1、E—cadherin、Vimentin、slug、snail、twist、ZEB1 mRNA的表达分别为（2．200±0．010）×10-3、（1．540±0．002）×10-4、1．003±0．004、（8．580±0．003）×10-4、（5．040±0．007）×10-3、（6．930±0．001）×10-5、（2．010±0．001）×10-4，Gem（＋）组分别为（5．870±0．004）×10-5、（1．430±0．001）×10-5、1．660±0．007、（4．030±0．002）×10-3、（8．980±0．005）×10-3、（3．300±0．020）×10-6、（1．120±0．003）×10-3，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。RT—PCR法检测parental组miR-200a、miR-200b、miR-200e、miR-141和miR-429的表达水平分别为（2．340±0．002）×10-5、（4．280±0．001）×10-6、（3．250±0．003）×10-5、（2．470±0．004）×10-5、（6．230±0．005）×10-4，Cem（＋）组分别为（0．801±0．000）×10-5、（2．030±0．004）×10-6、（5．000±0．050）×10-6、（3．670±0．003）×10-6、（1．310±0．002）×10-4，两组问比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PANC-1细胞EMT改变后侵袭能力明显增强，parental组迁移和侵袭实验细胞计数分别为（25．70±3．67）个和（16．30±2．21）个，Gem（＋）组分别为（77．40±3．01）个和（68．00±8．76）个，两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Gem可诱导PANC-1细胞EMT，Noteh-1可能是该过程的重要信号通路，并参与miR-200家族的调控。

沉默FOXC1基因调控Notch通路对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡影响

目的脑胶质瘤具有高发病率和高度恶性,目前的治疗方法效果不理想,且易复发。近年来,基因治疗逐渐被认识及广泛研究,但具体耙点及作用机制尚无定论。本研究探讨了siRNA靶向沉默FOXC1基因调控Notch通路对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法根据前期实验,选择靶向沉默FOXC1基因效率最高的siRNA序列(FOXC1-siRNA-1707,实验组)和阴性对照序列(FOXCl-siRNA-NC,阴性对照组),用Lipofectamine^TM 2000DNA转染试剂转染U251和TJ9052种人胶质瘤细胞。MTT法分析6.12.24和48h不同时间点细胞增殖变化。流式细胞术检测脑胶质瘤细胞凋亡率(亚凋亡峰值)。蛋白质印迹法检测沉默FOXC1基因后Notch-1和DH4蛋白水平的变化。结果MTT分析表明,在脑胶质瘤U251细胞中,实验组细胞增殖率与对照组、阴性对照组相比降低,且具有时间依赖性,差异均有统计学意义,F处理组=80169.8,F时间=115031.3,F处理组×时间=5604.1,均P<0.05;与对照组相比,阴性对照组细胞增殖率降低,但差异无统计学意义,P>0.05。在脑胶质瘤TJ905细胞中,实验组细胞增殖率与对照组、阴性对照组相比降低,且具有时间依赖性,差异均有统计学意义,F处理组=111037.1,F时间=153277.7,F处理组×时间=5208.2,均P<0.05;与对照组相比,阴性对照组细胞增殖率降低,但差异无统计学意义,P>0.05。流式细胞仪检测结果表明,U251细胞中FOXC1基因沉默后,脑胶质瘤细胞凋亡率增加,差异有统计学意义,F=155.9,P<0.01;TJ905细胞中FOXC1基因沉默后,脑胶质瘤细胞凋亡率增加,差异有统计学意义,F=243.1,P<0.01.蛋白质印迹法结果显示,U251细胞中靶向沉默FOXC1基因后,Notch1和D114蛋白的表达水平下降,差异有统计学意义,F值分别为7.4.12.3,均P<0.05;TJ905细胞中靶向沉默FOXC1基因后,Notch1和D114蛋白的表达水平亦下降,差异有统计学意义,F值分别为8.7、19.2,均P<0.05。结论沉默FOXC1基因可以抑制脑胶质瘤细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控Notch通路相关。

白藜芦醇对绝经后骨质疏松症大鼠的促细胞增殖作用

目的构建绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠模型,探讨白藜芦醇(RES)在PMOP中的促细胞增殖作用。方法将80只清洁级SD大鼠随机分为对照组、PMOP组、RES低剂量组(60 mg/kg)、RES中剂量组(80 mg/kg)、RES高剂量组(100 mg/kg),每组16只。大鼠行双侧卵巢摘除术,术后1周给予RES预防性治疗,每月称重体质量。24周后心脏采血处死,取双侧股骨,采用骨密度仪测量骨密度变化,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测骨组织中p53和Cyclin-D1水平的变化,Western blot检测各组大鼠Notch-1蛋白表达情况。结果PMOP组大鼠股骨和椎骨的骨密度降低,RES不同剂量组大鼠股骨和椎骨的骨密度较PMOP组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,PMOP组p53和Cyclin-D1的m RNA转录水平显著增高,RES不同剂量组的Cyclin-D1的m RNA转录水平较PMOP组升高,而p53的m RNA转录水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,PMOP组的Notch-1表达水平显著抑制,RES不同剂量组Notch-1蛋白表达较PMOP组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论RES调控Notch-1信号通路来促进骨组织中的细胞增殖,发挥拮抗骨质疏松症的作用。

飞燕草素抑制大鼠乳腺癌发生的机制探索

目的:本课题组前期研究发现飞燕草素能显著抑制甲基亚硝基脲(1-methyl-1-nitrosourea,MNU)诱导的大鼠乳腺癌发生,本研究初步探讨飞燕草素抑制乳腺癌发生的机制。方法:免疫组化染色检测致癌物诱导大鼠乳腺组织的雌激素受体-α(estrogen receptor-α,ER-α)水平;Western blot检测飞燕草素对乳腺癌MCF-7细胞的ER-α、G蛋白偶联雌激素受体(G protein coupled estrogen receptor,GPER)、Notch-1和10号染色体缺失的磷酸酶(phosphataseand tensin homologue deleted on chromosome,PTEN)表达情况的影响。结果:飞燕草素干预能明显降低MNU诱导大鼠乳腺组织ER-α的表达,体外实验发现飞燕草素能够抑制MCF-7细胞ER-α、GPER蛋白及Notch-1蛋白表达水平,同时还能够提高PTEN蛋白表达水平。结论:飞燕草素能通过抑制ER-α、GPER蛋白表达及调节Notch-1/PTEN信号通路发挥抑制乳腺癌的作用。