Notch2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨Notch2在喉癌组织及体外培养的喉鳞癌细胞Hep-2中的表达及与喉癌患者临床病理资料之间的关系。方法应用量子点超敏免疫荧光染色法检测95例喉癌组织标本中Notch2蛋白的表达,同时选取31例声带息肉标本作为对照组,结合患者临床病理资料进行分析;制作细胞爬片并进行量子点(QDs)免疫荧光染色检测Notch2蛋白在喉鳞癌细胞Hep-2中的表达。结果 95例喉癌组织中Notch2阳性表达率为92.6%(88/95),其阳性率与声带息肉中的阳性率(32.3%)相比差异均有统计学意义(P<0.01),其表达主要定位于细胞核。Notch2在喉癌组织中的表达与临床分期显著相关(P<0.05):临床分期越高,表达率越高。Notch2在喉癌组织细胞核中表达阳性与T分级、临床分期、病理分级和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。喉癌细胞Hep-2中Notch2表达阳性,其表达主要定位于细胞质和胞膜中。结论 Notch2在喉癌的发生发展中起着重要作用,其可能成为治疗喉癌的分子靶点。

Notch2高表达可使人主动脉平滑肌细胞骨形态发生蛋白4表达增加促进钙化

目的观察并验证人主动脉平滑肌细胞(HASMC)Notch2蛋白表达的变化对其细胞钙化的影响,并探讨其机制。方法体外培养HASMC,将其分为两组,分别为正常对照组与诱导钙化组。前者常规培养,后者在常规培养的基础上加用钙化诱导剂β-甘油磷酸(5 mmol/L)、抗坏血酸(50μg/mL)和地塞米松(100 nmol/L),两组细胞均培养7 d。另取上述方法诱导钙化的HASMC为钙化对照组,再设钙化抑制组,即在钙化对照组的基础上加入Notch特异性抑制剂γ-内分泌酶抑制剂(50μmol/L),两组细胞均培养7 d。四组均用白介素-6诱导细胞的炎症反应。采用免疫印迹法检测各组细胞内Notch2、磷酸化核转录因子STAT3(p-STAT3)和骨形态发生蛋白4(BMP-4)的蛋白表达水平;酶联免疫法测定各组细胞培养上清液中BMP-4蛋白的含量;逆转录-聚合酶链反应检测诱导钙化组和正常对照组中HASMC Notch2 mRNA的表达;免疫荧光染色法观察钙化对照组与钙化抑制组中HASMC BMP-4蛋白的表达。结果(1)诱导钙化组中HASMC Notch2、p-STAT3和BMP-4蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);诱导钙化组的培养液上清中BMP-4蛋白含量为(66.42±2.89)pg/mL,明显高于正常对照组的(22.35±2.68)pg/mL(P<0.05);诱导钙化组中HASMC Notch2 mRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.05)。(2)钙化抑制组中HASMC Notch2、p-STAT3和BMP-4蛋白的表达水平明显低于钙化对照组(P<0.05);钙化抑制组培养液上清中BMP-4蛋白的含量为(22.34±3.82)pg/mL,明显低于钙化对照组的(62.89±3.26)pg/mL(P<0.05)。免疫荧光染色显示钙化抑制组中HASMC BMP-4蛋白表达明显低于钙化对照组。结论钙化的HASMC Notch2蛋白表达增高,促进了BMP-4蛋白表达增加,从而使HASMC发生成骨样改变,使血管发生钙化,这一机制可能与JAK-STAT3的活化有关。

微小RNA-151a-3p及Notch2在结肠癌的表达及临床意义

背景据统计,全球每年约有100万人被诊断为结肠癌,探究结肠癌的发病机制,寻找新的诊断指标及治疗方法是其治疗关键.RNA在其发生发展中具有重要调控作用,Notch2表达与结直肠癌密切相关,抑制其表达可能在肿瘤抑制中发挥作用.目的探究微小RNA-151a-3p(miR-151a-3p)及Notch2在结肠癌(colonic cancer,CC)的表达情况及临床意义.方法选取2018-01/2020-06我院92例CC患者作为研究对象,均取术中切除的癌组织与癌旁组织(距癌边缘>2.0 cm,且病理结果显示无癌细胞)标本,检测比较癌组织与癌旁组织中miR-151a-3p、Notch2蛋白表达量,分析癌组织中miR-151a-3p与Notch2蛋白表达量的相关性,并比较不同临床特征(性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、病理类型、肿瘤分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移)患者癌组织中miR-151a-3p、Notch2蛋白表达量,分析miR-151a-3p、Notch2蛋白表达量与CC临床特征的关系.结果癌组织中miR-151a-3p、Notch2蛋白表达量均高于癌旁组织(P<0.001);癌组织中miR-151a-3p表达量与Notch2蛋白表达量呈正相关(P<0.001);随着CC患者肿瘤分期和浸润深度增加、分化程度降低、发生淋巴结转移,癌组织中miR-151a-3p、Notch2蛋白表达量逐渐升高(P<0.05);癌组织中miR-151a-3p、Notch2蛋白表达量与CC患者肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05).结论miR-151a-3p、Notch2蛋白在CC癌组织中表达明显增加,且二者之间的表达呈正相关关系,其过表达可参与了结肠癌疾病的发生发展.

刺山柑总生物碱抑制系统性硬皮病小鼠皮肤纤维化的作用机制探讨

目的探讨刺山柑总生物碱抑制系统性硬皮病(SSc)小鼠皮肤纤维化的作用机制。方法将60只BALB/c小鼠随机分为4组各15只。刺山柑总生物碱给药组、模型组和阳性对照组均制备SSc模型,背部皮下注射博莱霉素造模(30μg/d,30 d);空白对照组不制备SSc模型,仅背部皮下注射生理盐水。造模结束后,背部注射部位外敷450 mg/kg的刺山柑总生物碱乳膏,阳性对照组灌胃给予125 mg/kg的青霉胺片,模型组、空白对照组背部注射部位外敷不含药基质,1次/天,共60 d。采用Western blotting法检验各组小鼠背部注射部位皮肤组织Notch2、Jagged1、MAML1蛋白,免疫组化法检测Hes1蛋白。结果与空白对照组比较,模型组Notch2、Jagged1、MAML1、Hes1蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与模型组比较,刺山柑总生物碱组、阳性对照组Notch2、Jagged1、Hes1蛋白相对表达量降低,刺山柑总生物碱组MAML1蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论刺山柑总生物碱可调控SSc小鼠受损皮肤Notch通路,具体作用机制为抑制Notch2、Jagged1、Hes1蛋白表达。

基于Midkine/Notch2/Hey1信号通路探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠的抗炎作用

目的:探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中肝素结合因子(Midkine)/跨膜受体蛋白(Notch2)/Hey1信号通路中的影响及其抗炎的分子机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg^(-1)·d^(-1))和γ-分泌酶抑制剂组(Notch1通路抑制剂,DAPT),每组10只。以烟熏联合脂多糖(LPS)法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃(ig)给药;DAPT组ig DAPT(0.02 g·kg^(-1));正常组及模型组ig等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中Midkine、中性粒细胞趋化因子-1(CINC-1)、大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)、大鼠CXC趋化因子5(CXCL5)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和核转录因子-κB(NF-κB)p65的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达;免疫组化(IHC)检测大鼠肺组织中Midkine、Notch2和Hey1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组BALF中Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5、NE和NF-κB p65含量均显著升高(P<0.01);肺组织Midkine、Notch2和Hey1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量组和DAPT组BALF中Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5和NF-κB p65含量均显著减少(P<0.01);Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达显著下降(P<0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能是通过下调Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达,抑制Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5释放有关。

A Novel Mutation of Notch homolog protein 2 gene in a Chinese Family with Hajdu-Cheney Syndrome

Hajdu-Cheney syndrome （HCS） is a rare disorder which is characterized by developmental delay, craniofacial anomalies, congenital heart defects, hearing deficit, polycystic kidneys, and bone abnormalities, including progressive osteoporosis, acroosteolysis, wormian bones, and abnormal bonefractures.