UPLC指纹图谱结合化学计量学分析和多指标成分含量测定的羌活药材质量评价研究

目的建立羌活药材超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,并测定不同产地羌活药材阿魏酸、紫花前胡苷、异紫花前胡苷、羌活醇、异欧前胡素和挥发油的含量,为羌活药材的质量评价提供参考。方法采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7µm),以乙腈-0.02%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.25mL/min,柱温25℃,检测波长330nm,进样量2µL。建立25批羌活药材UPLC指纹图谱,进行相似度评价和化学计量学分析,同时测定阿魏酸、紫花前胡苷、异紫花前胡苷、羌活醇和异欧前胡素的含量,并采用水蒸气蒸馏法测定羌活药材挥发油的含量。结果指纹图谱共标定23个共有峰,指认出其中11个成分,聚类分析和主成分分析均将25批羌活药材大致分为3类,正交偏最小二乘-判别分析筛选出6种潜在差异性成分。含量测定结果显示,四川产地羌活药材的羌活醇和挥发油含量均高于甘肃和青海产地样品。结论本研究建立的方法准确、可靠,可为羌活药材的质量评价和控制提供依据和参考。

不同产地羌活药材中的重金属及砷盐含量研究

目的：对四川、青海和甘肃主产区羌活药材的重金属及砷盐含量进行分析评价,为制定羌活药材重金属含量质量标准提供参考依据.方法：对各主产区19个点57个样的羌活和宽叶羌活药材样品中铜、镉、铅、砷、铬含量（ICP-AES）及汞含量（冷原子吸收法）进行分析.结果：汞未检出;铅在羌活中含量极低,在宽叶羌活中仅个别产地检出较高;铜含量较高,在羌活中为21～73mg·kg-1,在宽叶羌活中为26～73mg·kg-1;砷在宽叶羌活中含量较高;镉在羌活中为0～0.29mg·kg-1,在宽叶羌活中为0～0.32 mg·kg-1;铬在羌活中为0.48～8.36mg·kg-1,在宽叶羌活中为1.44～8.02 mg·kg-1,不同产地间有较大差异.结论：羌活药材基本上达到了〈药用植物及制剂进出口绿色行业标准〉相应的重金属及砷盐限量标准,但铜的含量超标,故应选择土壤和环境中铜含量低的土地进行羌活的规范化种植.

羌活中挥发油和异欧前胡素的含量测定

目的:研究目前羌活药材的质量现状,为制订羌活合理的质量标准提供科学依据。方法:采用药典方法和HPLC分别对22个羌活主产地的29份商品药材样品进行挥发油和异欧前胡素含量的检测和统计学分析。结果:29份样品中仅3份的挥发油含量能达到2005年版药典的含量标准,产新药材中的不达标的比例达87.0%;统计结果显示,欲达到80%以上合格率的控制指标的挥发油含量应为1.63%,异欧前胡素为0.17%;样品的2种定量检测指标成分含量在采收年份间差异不显著,异欧前胡素在羌活和宽叶羌活间差异显著。结论:2005年版药典羌活挥发油含量标准过高,建议标准为不低于1.6%(mL.g-1);建议增加异欧前胡素为羌活药材质量的定量指标含量之一,标准为不低于0.2%(mg.g-1)。

羌活资源危机和保护

在前人工作基础上 ,结合从事羌活研究的实践 ,对羌活的资源现状、存在问题、导致资源危机的内外原因等进行剖析 ,为羌活资源的合理利用和保护提供参考。羌活资源面临严重危机 ;独特的生物学特性 ,分布区域狭窄 ,恶劣的气候环境和生态破坏 ,缺乏资源保护措施、过度采挖 ,可持续利用科研滞后等因素是导致资源危机根源。通过建立自然保护区和种质资源圃 ,加强资源保护立法和宣传 ,加强引种栽培技术研究、建立保护基地 ,强调产品开发与资源保护并重 。

原子吸收光谱法测定不同采收时间栽培与野生羌活药材中微量元素的含量

利用空气-乙炔火焰原子吸收光谱法测定了不同采收时间(5月、6月、7月、8月和9月)的野生与栽培宽叶羌活药材中微量元素Ca,Mg,Fe,Mn,Cu和Zn的含量,应用SPSS16.0分析软件对结果进行统计分析。结果发现:羌活药材含有丰富的微量元素,栽培与野生宽叶羌活药材中微量元素的含量均以Ca元素的含量最高,Cu元素含量最低,各微量元素的含量从高到低依次是Ca>Mg>Fe>Mn>Zn>Cu。栽培和野生羌活药材六种微量元素含量的季节动态具有明显的规律性。且野生宽叶羌活药材多数微量元素的含量高于人工栽培的含量,为野生羌活药材的人工引种栽培提供了参考。

野生羌活的生态环境与驯化栽培

在对天祝、肃南、民乐等祁连山区,榆中兴隆山区,甘南、临夏山区等地野生羌活产地多次野外实地调查的基础上,广泛查阅文献,较为系统全面地探讨了羌活的生态环境及其生长发育规律。结果表明自然条件下野生羌活以有性繁殖为主,种子自然繁殖率极低,仅为0.52%。同时,通过在天祝、兰州等不同生态条件下进行人工驯化和栽培试验,初步提出了野生羌活的驯化栽培途径。并指出提高野生羌活的繁殖率应以提高种子的发芽率为突破口。

羌活种胚后熟过程中内源激素的动态变化

目的阐述羌活种胚后熟过程中内源激素与种胚发育和休眠解除的关系。方法激素测定用HPLC法,外标法定量,质量分数以μg/100 g表示。结果羌活种胚后熟过程中,玉米素(Z)有2个高峰和2个低谷,第1个峰值出现在层积20 d时,第2个峰值出现在层积100 d时;第1个低谷出现在层积70 d时,第2个低谷出现在层积150 d时。吲哚乙酸(IAA)层积20 d时出现高峰,层积100 d和层积150 d时没能检测到。脱落酸(ABA)的变化和IAA相似,不同在于层积220 d未完成生理后熟和层积220 d发芽的种子中都不能检测到ABA的量。赤霉素(GA3)的量比其他激素高很多,出现2个峰值,第1个出现在层积20 d,第2个出现在层积150 d时;完成生理后熟种子中的GA3量比未完成生理后熟种子中的高。结论层积20 d后Z、IAA、ABA和GA3量的增加启动了羌活种胚的发育。Z能促进羌活种胚的发育和萌发。GA3可能对打破羌活种子休眠没有直接的作用,但是能促进种胚的生长。层积中后期没有检测到ABA的量,ABA可能不是羌活种子萌发的主要抑制物质。

中药羌活HPLC-荧光指纹谱研究

建立不同来源羌活的高效液相-荧光检测指纹谱,为提高羌活药材质量控制水平提供参考。色谱柱:MetachemODS-C18;流动相:乙腈-0.025mol/L磷酸水溶液(45:55),荧光检测条件:λEx=310nm、λEm=480nm;采用聚类分析法进行分析比较。得到20个共有指纹色谱峰,确定了基准样本色谱峰的相对保留时间和相对峰面积,各羌活样品与基准样本相似度值均在0.8以上,构建羌活的高效液相-荧光指纹图谱质控方法。本试验所确定HPLC-荧光光谱的指纹图谱质控方法灵敏度高,稳定性、重现性良好,可作为羌活药材的质量评价依据。

基于网络药理学的羌活-益智仁药对联合糖皮质激素治疗肾病综合征机制研究

目的利用网络药理学方法研究羌活-益智仁辅助糖皮质激素治疗肾病综合征(NS)的作用机制。方法通过TCMSP、TCMID、Stitch、Uniprot数据库收集羌活、益智仁的活性成分和靶点,应用GeneCards、OMIM、NCBI-gene、Malacard数据库检索NS靶点,利用GeneCards、NCBI-gene、OMIM数据库查找糖皮质激素治疗靶点,分析得到三者的异同靶点。将NS靶点输入String数据库获得蛋白相互作用网络,通过DAVID数据库进行KEGG通路富集分析,并利用Cytoscape3.7.2软件进行可视化,将羌活-益智仁药对与糖皮质激素的药理网络与NS疾病网络进行比对分析。结果筛选出羌活活性成分15种,益智仁活性成分4种,谷甾醇为两药共有成分。获得羌活靶点基因83个,益智仁靶点基因51个,NS疾病基因1229个,糖皮质激素靶点基因2695个,羌活-益智仁药对与糖皮质激素共同作用于NS的靶点有26个。基于NS疾病网络发现了20个疾病核心模块,羌活-益智仁药对涉及其中70%核心模块。KEGG通路富集分析得到羌活相关通路65条、益智仁相关通路26条、NS相关通路106条,羌活-益智仁药对与NS直接相关的通路共33条,糖皮质激素同样作用于这些通路。结论羌活-益智仁药对可能通过作用于REAL、TNF-α、CASP8等靶点,以及PI3K-Akt、HIF-1、雌激素等相关通路,增强糖皮质激素对NS的治疗作用,并通过调节NF-κB通路、脂肪的消化吸收和细胞色素P450通路减少糖皮质激素抵抗和股骨头坏死等不良反应。

甘肃羌活资源特征及开发利用

在多点、多次实地考察和查阅大量文献资料的基础上,对羌活Notopterygiumincisum生物学特性、品种分类以及在甘肃的资源分布状况作了较系统的介绍,并对其开发利用进行了探讨。

羌活挥发油对大黄藤素体外促透皮作用的研究

目的考察羌活挥发油对大黄藤素小鼠体外经皮渗透的影响,筛选中药透皮促进剂。方法用改良的Franz扩散池进行体外透皮实验,以氮酮为对照,观察不同浓度的羌活挥发油对大黄藤素的促透皮作用。以紫外分光光度法测定大黄藤素的含量。结果不同浓度的促透剂中5%羌活油,5%氮酮的促透效果最好,5 mg.mL-1大黄藤素24 h平均累积渗透量分别为6166.96、5068.87μg.cm-2;6 h平均透皮速率常数分别为277.53、221.44μg.cm-2.h-1;增渗倍数分别为1.1104、1.3217。结论5%羌活挥发油对大黄藤素有较强的促透皮作用。

中药材羌活质量控制的气相色谱指纹图谱

目的建立羌活挥发油指纹图谱测定方法 ,为含羌活中药制剂制定指纹图谱奠定基础。方法采用水蒸气蒸馏法提取不同产地羌活的挥发油 ;用毛细管气相色谱技术测定指纹图谱 (GC FPS) ;选用聚类法分析比较。结果该方法灵敏度高 ,稳定性、重现性的RSD <3%。

羌活粗提物减轻乙草胺对水稻的药害及对GSTs的诱导作用

采用室内生物活性测定法,研究了中药羌活粗提物减轻乙草胺对水稻幼苗伤害的效果和对水稻幼苗谷胱甘肽S转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:在乙草胺质量浓度为0.05 mg/L的条件下,当羌活粗提物质量浓度分别为0.050 0、0.125 0、0.250 0、1.250 0 g/L时,水稻幼苗的株高分别恢复到清水对照的77.9%、95.1%、96.1%、96.2%;株鲜重恢复到清水对照的80.9%、98.8%、94.0%、98.4%;GSTs活性检测表明,羌活粗提物能诱导水稻幼苗地上部GSTs活性增强,当羌活粗提物的质量浓度为0.150 0、0.200 0和0.250 0 g/L时,水稻幼苗地上部GSTs的活性分别为清水对照的1.5、2.0和2.1倍。

羌活水提物对迟发型变态反应及炎症反应的影响及其机制

目的 :探讨羌活水提物对迟发型变态反应及炎症反应的影响及其机理。方法 :考察羌活水提物对 2 ,4,6 三硝基氯苯 (PCl)致迟发型变态反应 (PCl DTH)机制诱导的肝损伤、二甲苯诱导的耳肿胀及酵母多糖诱导的腹腔炎症等的影响 ;考察羌活水提物对人JurkatT淋巴瘤细胞分泌基质金属蛋白酶及迁移功能的影响。结果 :羌活水提物诱导相和效应相给药均显著地抑制了PCl DTH诱导的肝损伤。对二甲苯诱导的耳肿胀无影响 ,但可显著抑制酵母多糖诱导腹腔白细胞游出。羌活水提物对胶原诱导的Jurkat细胞分泌基质金属蛋白酶及迁移功能亦有显著的抑制作用。结论

治感佳胶囊中羌活与穿心莲水溶性成分的薄层鉴别

目的 建立羌活与穿心莲水溶性成分鉴别方法。方法 采用薄层色谱法。结果 同一供试品、展开剂、薄层板 ,可同时检出羌活与穿心莲的水溶性成分。

羌活饮片挥发油化学成分GC-MS数字化指纹图谱研究

目的建立羌活饮片挥发油的气相色谱-质谱(GC-MS)数字化指纹图谱,以控制羌活饮片的质量。方法用水蒸气蒸馏法提取样品的挥发油后,采用GC-MS联用法测定挥发油的化学成分。色谱条件为采用HP-5毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm,0.1μm);载气为氦气;体积流量1.0 mL/min;分流比50∶1;进样温度270℃。程序升温方式为初始柱温70℃,维持3 min,以10℃/min升至250℃,维持5 min。结果建立了11批羌活饮片挥发油化学成分的GC-MS数字化指纹图谱,标定了40个共有峰,占总色谱峰面积的80.8%～90.6%。其中峰面积较大的化合物为1R-α-蒎烯,β-蒎烯,桉油醇,水菖蒲酮,D-柠檬烯,4-松油醇,对伞花烃,乙酸龙脑酯,α-松油醇,γ-松油烯,龙脑,布藜醇。结论所建立的GC-MS指纹图谱能用于羌活和宽叶羌活饮片的鉴定和质量控制。且方法灵敏度高,重复性良好。

气相色谱-质谱法分析羌活挥发油成分

目的定性、定量分析羌活挥发油成分。方法采用气相色谱-质谱检测,通过化学计量学解析法对二维色谱/质谱数据进行解析,得到各组分的纯色谱曲线和质谱,从而实现对羌活挥发油成分的定性、定量分析。结果鉴定了52个羌活挥发油成分,占挥发油成分总含量的80.79%。结论羌活挥发油主要成分是2,6,6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯(21.65%),6,6-二甲基-2-亚甲基-二环[3.1.1]庚烷(19.06%),D-柠檬烯(4.46%),1-甲基-4-异丙基-1,4-环己二烯(3.74%),4-甲基-1-异丙基-3-环己-1-醇(3.47%)。

羌活水提物预先给药对CCI大鼠神经病理性疼痛的预防作用及机制研究

目的探讨羌活水提物预先给药对神经慢性结扎损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的预防作用及机制研究。方法将50只SD大鼠按随机数字表分为假手术组、模型组、羌活低剂量组、羌活中剂量组和羌活高剂量组,制备CCI大鼠模型,假手术组只暴露神经不进行结扎。羌活各剂量组给予不同剂量羌活水提物,假手术组和模型组给予等量生理盐水。术后14 d,大鼠进行机械痛阈测定后处死,取脊髓腰膨大L4～L6节段,检测并比较不同组大鼠脊髓组织中三叉神经节嘌呤能P2X4受体(P2X4R)、转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果与假手术组比较,术后其余各组机械痛阈均降低,脊髓组织中P2X4R、NF-κB、IL-1β和TNF-α表达水平均增高,差异具有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,术后羌活各剂量组机械痛阈均增加,脊髓组织中P2X4R、NF-κB、IL-1β和TNF-α表达水平均降低,差异具有统计学意义(P <0.05);羌活各剂量组机械痛阈随羌活剂量的增加而增加,脊髓组织中P2X4R、NF-κB、IL-1β和TNF-α表达水平随羌活剂量的增加而均降低,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论羌活水提物能缓解大鼠神经病理性疼痛,其作用机制可能与抑制脊髓中P2X4R的表达,降低了NF-κB和促炎因子水平有关。

羌活提取物中异欧前胡素的药代动力学研究

目的:研究羌活提取物中异欧前胡素的药代动力学规律。方法:用HPLC-荧光检测法测定给药家犬血浆中异欧前胡素的含量,采用药代动力学软件DAS(ver2.0)处理,得到异欧前胡素的药代动力学参数。结果:家犬灌胃给药的异欧前胡素AUC0-9为1.827mg/(L.h),Cm ax为0.835mg/L,Tmax为20m in,t1/2近1.5h.结论:异欧前胡素在家犬体内的代谢过程符合一室模型,吸收、消除较快。

基于临床研究文献的含羌活方剂用药规律分析

目的:基于文献调查了近20年内羌活的临床应用情况,分析探讨羌活的用药特点,展示羌活的用药现状,为羌活的临床应用提供参考。方法:采用计算机检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据库中有关以羌活为主药的临床研究文献,检索时间范围1997年1月至2017年12月,筛选符合纳入标准的随机、半随机或有较好临床疗效的临床研究文献。从与配伍药物频次的多少、主要的主治疾病、主治证候等方面进行计量学分析、总结。结果:与羌活配伍应用的药物,出现频次前三位的是:川芎、防风、甘草;主治疾病前三位的是颈椎病、膝骨关节炎、偏头痛;主治证候前三位的是风寒湿邪、痹阻经脉、气血不畅。结论:羌活以配伍活血药和祛风止痛药为主,治疗各类颈椎病、膝骨关节炎、偏头痛等为主,多用于寒痹疼痛、气血瘀阻之证。