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IBV HH06株N基因原核表达及间接ELISA方法的建立
被引量:
3
1
作者
李广兴
王新
+5 位作者
潘龙
杜威威
黄小丹
孙刚
杨贵君
任晓峰
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期75-82,共8页
鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。试验根据NCBI发表的IBV基因序列设计引物,利用RT-PCR方法扩增病毒的N基因,并将其导入pE...
鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。试验根据NCBI发表的IBV基因序列设计引物,利用RT-PCR方法扩增病毒的N基因,并将其导入pET-30a(+)载体中,构建原核表达质粒。SDS-PAGE及Western-blot检测结果表明,重组蛋白得到表达并能与IBV阳性血清有很好的反应性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,在包被量为2.5μg·mL-1、血清1??40倍稀释条件下,建立并优化间接ELISA检测方法。临床样品检测表明,该方法可高效检测出IBV抗体,并与IBV病毒作为包被抗原ELISA检测结果一致,为IB的快速诊断及流行病学研究奠定基础。
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关键词
鸡传染性支气管炎病毒
N基因
原核表达
间接ELISA
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职称材料
题名
IBV HH06株N基因原核表达及间接ELISA方法的建立
被引量:
3
1
作者
李广兴
王新
潘龙
杜威威
黄小丹
孙刚
杨贵君
任晓峰
机构
东北农业大学动物医学学院
黑龙江职业学院
黑龙江省动物卫生监督所
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期75-82,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31172295
31272569)
文摘
鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。试验根据NCBI发表的IBV基因序列设计引物,利用RT-PCR方法扩增病毒的N基因,并将其导入pET-30a(+)载体中,构建原核表达质粒。SDS-PAGE及Western-blot检测结果表明,重组蛋白得到表达并能与IBV阳性血清有很好的反应性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,在包被量为2.5μg·mL-1、血清1??40倍稀释条件下,建立并优化间接ELISA检测方法。临床样品检测表明,该方法可高效检测出IBV抗体,并与IBV病毒作为包被抗原ELISA检测结果一致,为IB的快速诊断及流行病学研究奠定基础。
关键词
鸡传染性支气管炎病毒
N基因
原核表达
间接ELISA
Keywords
Infectious bronchitis virus
nprotein
prokaryotic expression
indirect ELISA
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
R526.21 [医药卫生—内科学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
IBV HH06株N基因原核表达及间接ELISA方法的建立
李广兴
王新
潘龙
杜威威
黄小丹
孙刚
杨贵君
任晓峰
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
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