紫草素通过上调 Nrf2途径及干预胞内氧化还原平衡稳态诱导A549细胞凋亡

目的：探讨活性氧和Nrf2途径在紫草素诱导A549细胞凋亡过程中的作用。方法 MTT法评价紫草素对 A549细胞的细胞毒活性。采用细胞形态学和生物化学方法检测细胞凋亡。通过荧光探针对细胞内活性氧、还原型谷胱甘肽的变化进行标示,并用 GSH/GSSG比率对氧化还原态的变化进行评价。通过活性氧的清除剂分析活性氧在凋亡过程中的决定因素。通过实时荧光定量PCR和ELISA分析来确定Nrf2途径在紫草素诱导A549细胞凋亡中的作用。结果紫草素对A549细胞的IC50为3．2 mg·L-1。0-24 h时间内,随紫草素处理时间增加A549细胞内氧化还原平衡明显向氧化方向切换。3．2 mg·L-1紫草素作用A549细胞8 h, Nrf2途径相关基因表达量上调,24 h时抗凋亡基因表达量下降,促凋亡基因表达上升。抑制细胞内活性氧的产生会减轻紫草素对A549细胞增殖的抑制作用。结论紫草素诱导A549细胞产生的活性氧超过了Nrf2途径抗氧化应激的临界阈值,进而引起A549细胞凋亡。

白藜芦醇通过Nrf2途径发挥抗冠状动脉粥样硬化及心肌细胞保护作用

目的:探讨白藜芦醇通过Nrf2途径发挥抗冠状动脉粥样硬化及心肌细胞保护作用。方法:将50小鼠按随机数字表法分为5组:空白对照组、模型组、白藜芦醇高(150 mg·kg^(-1)·d^(-1))、中(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))剂量组,每组10只。除空白对照组正常喂养外,其余各组均给予高脂饲料喂养。各给药组灌胃给药,体积为0. 4 ml,1次/d,空白对照组和模型组给予等体积生理盐水。每周测量体质量,13周后比较小鼠血脂水平、主动脉及心肌组织改变、Nrf2表达情况等。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠从第3周开始体质量较空白对照组显著增加(P <0. 05);血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平显著升高,高密度脂蛋白(HDL)水平显著降低(P <0. 05); Nrf2表达差异无统计学意义(P> 0. 05);小鼠动脉内膜斑块面积增多,厚度增大;心肌间隙扩大,细胞排列紊乱,心肌横纹消失。与模型组比较,白藜芦醇高(第3周开始)、中、低(第9周开始)剂量组小鼠的体质量显著降低(P <0. 05);白藜芦醇各剂量组小鼠血清中TC、TG、LDL水平均显著降低,HDL水平和Nrf2表达显著升高(P <0. 05);以上作用均呈剂量依赖性。白藜芦醇组小鼠的病理组织情况与模型组相比得到改善。结论:白藜芦醇能通过Nrf2途径有效发挥抗动脉粥样硬化及心肌保护作用。

异甘草酸镁对肝纤维化大鼠Nrf2-ARE途径相关指标的影响研究

目的观察异甘草酸镁对肝纤维化大鼠Nrf2-ARE途径相关指标的影响,探讨其抗纤维化的机制。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和异甘草酸镁组,每组16只。模型组和异甘草酸镁组采用四氯化碳建立肝纤维化模型,造模成功后,继续给予四氯化碳皮下注射,每2周1次,异甘草酸镁组同时给予异甘草酸镁30 mg/kg腹腔注射,每日1次,共8周。末次注射24 h后分别采用实时定量PCR、免疫印迹和免疫组织化学技术检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其抗氧化反应元件(ARE)诱导Ⅱ相解毒酶血红素加氧酶-1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)的表达情况。结果模型组大鼠肝组织中Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0.05),异甘草酸镁组Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),但仍低于正常组(P均<0.05)。结论异甘草酸镁组可通过激活Nrf2-ARE途径起到抗肝纤维化的作用。

法舒地尔通过Nrf2/ARE和NF-κB途径对糖尿病周围神经病变大鼠的作用

目的探究法舒地尔对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的作用及其可能的作用机制。方法将SPF级60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、法舒地尔低剂量组、法舒地尔高剂量组,每组12只。高脂饲料联合链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型。给药8周后,测定大鼠空腹血糖和体重;Eddy热板法检测热缩腿潜伏期(TWL);Von Frey实验检测压力-缩腿阈(PWT);Randall Selitto实验检测机械性痛觉超敏(MWT);双极针电极检测运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV);HE染色和甲苯胺蓝染色检测坐骨神经病理学变化;试剂盒检测MDA、GSH、SOD、IL-1β、IL-6和TNF-α含量变化;Western blot检测Nrf2、HO-1、p-p65和p65蛋白水平。结果与对照组相比,模型组大鼠体重、坐骨神经轴突数量、TWL、MWT、PWT、MNCV和SNCV显著降低(P<0.05),血糖、MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α含量以及p-p65/p65蛋白水平显著升高(P<0.05),GSH、SOD含量以及Nrf2和HO-1蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组、法舒地尔低剂量组和法舒地尔高剂量组大鼠体重、血糖水平差异无统计学意义(均P>0.05),坐骨神经轴突数量、TWL、MWT、PWT、MNCV和SNCV显著升高(P<0.05),MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α含量以及p-p65/p65蛋白表达显著降低(P<0.05),GSH、SOD含量以及Nrf2和HO-1蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论法舒地尔可能通过激活Nrf2/ARE途径和抑制NF-κB途径在DPN大鼠中发挥保护作用。

防己诺林碱通过Nrf2/NLRP3途径对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构和成骨细胞凋亡的影响

目的探讨防己诺林碱通过Nrf2/NLRP3途径对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构和成骨细胞凋亡的影响及机制研究。方法SD大鼠分为假手术组(sham组)、骨质疏松症组(OP组)、防己诺林碱低剂量组(OP+FAN-L组)和防己诺林碱高剂量组(OP+FAN-H组)。μCT检测各组大鼠骨组织的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁分离距离(Tb.Sp);ELISA检测各组大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)的表达水平;ELISA检测各组大鼠骨组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;HE染色检测各组大鼠骨组织病理损伤;TUNEL染色检测各组大鼠成骨细胞的凋亡;Western blot检测各组大鼠骨组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白的表达。结果防己诺林碱使OP大鼠的BV/TV和Tb.Th指数上升(P<0.05),Tb.Sp指数下降(P<0.05);与OP组相比,OP+FAN-L组和OP+FAN-H组大鼠血清中ALP的表达水平下调(P<0.05),OC的表达水平上调(P<0.05),骨组织中IL-6和TNF-α的表达水平下调(P<0.05);防己诺林碱使OP大鼠骨组织中骨小梁面积增加(P<0.05);与OP组相比,OP+FAN-L组和OP+FAN-H组TUNEL阳性细胞数量减少(P<0.05),骨组织中Nrf2蛋白表达水平上调(P<0.05),NLRP3蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论防己诺林碱减少了炎症因子的表达和成骨细胞凋亡,增加了骨组织中骨小梁面积,其可能与上调Nrf2的表达和抑制NLRP3的表达有关。

miRNA-494对脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征大鼠急性肺损伤及Nrf2信号途径的影响

目的探讨miRNA-494对脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征大鼠急性肺损伤及Nrf2信号途径的影响。方法通过脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞损伤模型模拟急性肺损伤,将大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为3组-对照组、LPS组与miRNA-494组。LPS组培养基中加入终浓度1μg/mL LPS建立脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征大鼠细胞模型,对照组培养基中加入与LPS溶液等体积的磷酸盐缓冲液,miRNA-494组在LPS处理前转染miRNA-494模拟物。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR检测miRNA-494表达,蛋白质印迹法检测Keap-1和Nrf2蛋白表达。结果细胞处理后12、24 h,miRNA-494组的miRNA-494相对表达量显著高于LPS组与对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),而LPS组与对照组miRNA-494相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞处理后12、24 h,LPS组与miRNA-494组的细胞增殖指数显著低于对照组,miRNA-494组细胞增殖指数显著高于LPS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞处理后12、24 h,LPS组与miRNA-494组的细胞凋亡指数显著高于对照组,miRNA-494组细胞凋亡指数显著低于LPS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞处理后12、24 h,LPS组与miRNA-494组的Keap-1和Nrf2相对表达量显著高于对照组,miRNA-494组Keap-1和Nrf2相对表达量显著低于LPS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-494能抑制LPS诱导的脓毒症急性肺损伤合并急性呼吸窘迫综合征的大鼠细胞中Nrf2信号途径的激活,并抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。

姜黄素通过抑制KIM-1/NGAL,Nrf2和iNOs途径改善新生大鼠维生素A缺乏症引起的尿石症

目的研究姜黄素对维生素A缺乏症(VAD)所致新生大鼠尿路结石的影响。方法对断奶后的新生雄性Wistar大鼠进行维生素A缺乏饮食喂养12周造模,而后分组用姜黄素(20、40和80 mg/kg)治疗,以正常大鼠和肾石通冲剂治疗分别作为对照。检测各组大鼠血清和尿液中的BUN、LDH、尿酸、肌酐、钠、钙、白蛋白、柠檬酸盐、草酸盐和糖胺聚糖水平。检测大鼠肾脏组织中内源性抗氧化酶的水平。使用逆转录PCR方法分析肾脏组织中KIM-1、NGAL、Nrf2和iNOs mRNA的表达。进行各组间的比较。结果VAD导致尿路结石病与正常对照大鼠尿液中的BUN、LDH、尿酸、肌酐、钠、钙、白蛋白、柠檬酸盐、草酸盐和糖胺聚糖水平发生显著变化,而姜黄素治疗组(40和80 mg/kg)和肾石通冲剂治疗组均显著减弱了这些变化(均P<0.05)。姜黄素治疗显著抑制了VAD诱导的氧化亚硝基水平升高,KIM-1、NGAL、iNOs mRNA表达下调和Nrf2 mRNA表达上调(均P<0.01)。结论姜黄素抑制氧化亚硝基应激和调节肾脏KIM-1、NGAL、Nrf2和iNOs mRNA表达发挥其肾脏保护作用。姜黄素可能为VAD引起的尿路结石症提供替代治疗选择。

Keap1/Nrf2/ARE途径通过抗氧化对大鼠脑缺血再灌注神经元损伤的作用机制

目的探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap)1/核因子E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对大鼠脑缺血再灌注神经元损伤的调控作用。方法SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组(中脑动脉栓塞模型)、Nrf2过表达组(中脑动脉栓塞模型+注射Nrf2过表达相关腺病毒)及Nrf2抑制剂组(中脑动脉栓塞模型+鸦胆子苦醇)。模型建成24 h后,评估大鼠Longa评分,检测脑组织含水量、脑梗死体积及脑组织神经元凋亡情况。同时检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血红素加氧酶(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)1、Keap1及Nrf2表达水平。结果Nrf2过表达组Longa评分、脑组织含水量、脑梗死体积及脑组织神经元凋亡率均低于模型组及Nrf2抑制剂组,而Nrf2抑制剂组各指标均显著高于模型组(P<0.05)。Nrf2过表达组脑组织的SOD、HO-1、NQO1、Keap1、Nrf2表达水平明显高于模型组及Nrf2抑制剂组,MDA明显低于模型组及Nrf2抑制剂组(P<0.05);而Nrf2抑制剂组的SOD、HO-1、NQO1、Keap1、Nrf2表达水平明显低于模型组,MDA明显高于模型组(P<0.05)。结论Keap1/Nrf2/ARE途径是脑缺血再灌注损伤的保护信号通路,上调该信号通路可抑制氧化应激状态,减轻神经元损伤,改善神经功能状态,其保护机制可能与抗氧化有关。

基于网络药理学和实验验证的病炎清抗流感作用机制研究

目的明确病炎清的抗流感病毒活性,基于网络药理学和实验验证探究病炎清治疗流感的潜在机制。方法检测病炎清对流感模型小鼠死亡率、肺指数、肺病毒量的影响。检索TCMSP、Swiss Target Prediction等数据库及文献,收集病炎清处方成分及靶点;通过Cytoscape软件构建病炎清抗流感“成分-共有靶点”网络;通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作(Protein-Protein Interaction,PPI)网络,筛选核心靶点;对共有靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。在体内水平探究病炎清减轻流感所致氧化损伤的作用,以及对抗氧化和促氧化酶表达、P65蛋白磷酸化、核因子E2相关因子2(Nuclear Factor Erythroid-Derived 2-Related Factor 2,Nrf2)核易位的影响。结果病炎清可明显降低流感模型小鼠死亡率,降低肺指数和肺病毒量,减轻肺损伤。检索得到病炎清193个活性成分,对应338个靶点,其中与流感相关的靶点180个,IκBα激酶α(CHUK)、IκBα激酶γ(IKBKG)、NF-κB p65(RELA)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素6(IL6)等9个靶点为潜在核心靶点。GO分析提示病炎清具有抗菌、抗氧化应激等多种生物功能。KEGG分析表明病炎清涉及多条病毒及免疫通路,如疱疹病毒、甲型流感病毒、肿瘤坏死因子和Toll样受体途径。动物实验表明,相较于磷酸奥司他韦,病炎清高剂量组可更明显地降低流感模型小鼠肺丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量(P<0.01)、提升肺总超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性(P<0.001)。相较于磷酸奥司他韦,病炎清&磷酸奥司他韦联合给药组肺部具有更低的NADPH氧化酶2(NADPH Oxidase Type 2,NOX2)、4(NOX4)水平(P<0.001)和更高的过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)水平(P<0.001)。另外,联合给药组显示出更强的Nrf2核易位(P<0.05)。但联合给药组P65蛋白磷酸化水平与磷酸奥司他韦组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均低于模型组(P<0.05)。结论病炎清具有明显的抗流感病毒活性,可发挥抑制促氧化酶合成和促进抗氧化系统的双重作用,减轻流感引发的氧化应激损伤。

营养与鱼类免疫研究进展

鱼类生长发育与疾病抵抗力密切相关,而营养物质在鱼类疾病抵抗力及其免疫调控中发挥着重要作用。已有研究表明部分营养物质可通过雷帕霉素靶蛋白(TOR)和核因子E2相关因子2(Nrf2)信号途径调控鱼类免疫器官细胞因子产生,降低鱼类免疫器官氧化损伤,从而保证其结构完整性和功能正常,进而提高鱼类非特异性和特异性免疫力,增强鱼类疾病抵抗力。本文就部分氨基酸(蛋氨酸和异亮氨酸)、脂溶性维生素(维生素A)、水溶性维生素(维生素B1、吡哆醇、泛酸、胆碱和肌醇)以及营养性添加物(蛋氨酸羟基类似物)等营养物质与鱼类疾病抵抗力、非特异和特异性免疫防御、免疫器官生长发育、结构完整性和抗氧化防御、细胞因子及其相关信号途径之间关系的研究进展作一综述。

臭氧暴露诱发小鼠急性肺部损伤及抗氧化剂的拮抗作用

为了研究臭氧(ozone,O_(3))诱发小鼠肺损伤的作用以及褪黑素(melatonin,MT)的保护机制,本研究以雄性Balb/c小鼠为受试动物,进行连续7 d、每天3 h的急性O_(3)暴露,在保护组每天口服暴露5 mg·kg^(-1)MT。实验小鼠随机分为4组:(1)生理盐水对照组(Control);(2)褪黑素对照组(MT);(3)臭氧暴露组(2.14 mg·m^(-3)O_(3));(4)臭氧暴露+褪黑素保护组(2.14 mg·m^(-3)O_(3)+MT)。最后一次臭氧暴露后,制备小鼠肺泡灌洗液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中IL-1β、IL-33、IL-4和IL-17A的含量;取部分肺组织制作肺匀浆并提取总mRNA,用于检测肺组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,以及核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、NADPH:醌氧化还原酶1(NQO-1)mRNA的表达。此外,采用苏木精-伊红染色(H&E stain)观察小鼠肺组织病理学改变。结果表明,与对照组相比,2.14 mg·m^(-3)O_(3)暴露组小鼠肺组织MDA含量上升,IL-1β、IL-33、IL-4和IL-17A表达增加;GSH含量以及Nrf2、HO-1、NQO-1的mRNA相对表达量下降,且差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与O_(3)暴露组相比,MT保护组小鼠肺组织MDA含量下降,IL-1β、IL-33、IL-4和IL-17A表达下降,且GSH含量以及Nrf2、HO-1和NQO-1的mRNA相对表达量相应上升。此外,小鼠肺组织病理切片观察结果表明,O_(3)暴露组小鼠肺组织出现炎细胞浸润和气道重塑现象,使用抗氧化剂MT处理后可减轻相应病理学改变。综上所述,2.14 mg·m^(-3)O_(3)暴露可造成小鼠肺组织氧化损伤,诱发炎症,导致肺组织病理学改变;抗氧化剂的使用可增加Nrf2及其下游抗氧化酶的表达,缓解氧化应激,降低炎症因子水平,这验证了O_(3)暴露引起的肺部损伤是通过氧化性损伤机制介导的。

芸香苷对小鼠创伤性脊髓损伤的神经保护作用及机制研究

目的:探讨芸香苷对创伤性脊髓损伤(SCI)小鼠的影响及作用机制。方法:将40只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、芸香苷组和强的松组,每组10只。除假手术组外,其他4组均复制创伤性SCI模型。建模后2 h,芸香苷组和强的松组小鼠分别腹腔注射芸香苷(100 mg/kg)、强的松(50 mg/kg),连续7 d,假手术组和模型组注射等量生理盐水。术后第1、第3、第7天,采用Basso Beattie&Bresnahan(BBB)评分观察小鼠SCI后后肢运动功能变化,苏木精-伊红(HE)染色法观察脊髓组织病理学变化,尼氏染色和TUNEL染色分别检测脊髓神经细胞表达与凋亡情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,免疫荧光染色法检测激活转录因子核因子E2相关因子2(Nrf2)表达,Western blotting法分析Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果:术后第3天和第7天,芸香苷组和强的松组BBB评分较模型组明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组小鼠脊髓组织结构出现明显损伤,IL-1β、TNF-α、IL-6含量升高,尼氏体数目明显减少,神经细胞凋亡数目增加,Nrf2绿色荧光强度增加,Nrf2、HO-1蛋白表达增加;而芸香苷组和强的松组小鼠脊髓组织病变明显改善,并抑制了IL-1β、TNF-α、IL-6含量的增加,而尼氏体数目明显增加,同时减少了神经细胞的凋亡,Nrf2绿色荧光强度更强,脊髓组织中Nrf2、HO-1蛋白表达进一步增加(P<0.05);芸香苷组与强的松组作用情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:芸香苷对创伤性SCI小鼠损伤脊髓有保护作用,其机制可能抑制炎症反应、激活Nrf2/HO-1途径相关。

黄芩素-7-甲醚对高原缺氧小鼠脑组织保护作用研究

研究黄芩素-7-甲醚对高原缺氧小鼠脑组织的保护作用及机制。用50只小鼠进行常压耐缺氧实验,测定黄芩素-7-甲醚的有效剂量。然后将88只小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,连续灌胃给药5天,最后一个给药60 min后,置于模拟海拔8000 m氧舱内停留12 h,检测脑组织中含水量、过氧化氢(H2O2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、抗氧化酶以及Nrf2和HO-1蛋白的表达情况。结果发现:低压低氧能够诱导小鼠脑含水量、脑组织中H_2O_2、NO和MDA含量以及LDH活性显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性显著减低,Nrf2和HO-1蛋白表达增强。经黄芩素-7-甲醚预处理后能够显著降低高原缺氧小鼠脑组织中H_2O_2、MDA和NO含量以及LDH活性,提高抗氧化酶的活性,同时进一步增加Nrf2和HO-1蛋白的表达。以上结果表明:黄芩素-7-甲醚能够缓解高原缺氧导致脑组织氧化应激损伤,作用机制可能与清除自由基,激活Nrf2/ARE/HO-1信号途径,提高抗氧化酶活性有关。

4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶基-N-氧化物对高原缺氧小鼠心肌组织损伤的保护作用及机制研究

目的研究4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶基-N-氧化物(tempol)对高原缺氧小鼠心肌组织的保护作用及机制。方法将110只小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺组和tempol组,单次腹腔注射给药30 min后,在模拟海拔8 000 m环境停留12 h,眼眶取血后,测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性,然后处死小鼠,检测心肌组织中过氧化氢(H_2O_2)和丙二醛(MDA)含量以及ATP酶和抗氧化酶的活性,蛋白印迹法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达水平。结果与正常对照组相比,缺氧模型组血清中CK和LDH的活性显著增加,心肌组织中H_2O_2和MDA含量显著升高,ATP酶和抗氧化酶的活性显著降低,HIF-1α、VEGF、Nrf2和HO-1蛋白表达增强。经tempol预处理后能够显著降低高原缺氧小鼠血清中CK和LDH的活性,减少心肌组织中H_2O_2和MDA含量,提高ATP酶和抗氧化酶的活性,降低HIF-1α、VEGF蛋白表达,显著提高Nrf2和HO-1蛋白表达。结论 Tempol对高原缺氧诱导的心肌组织损伤具有保护作用,该作用与改善能量代谢,清除自由基,激活Nrf2/HO-1信号途径,提高抗氧化酶活性,降低机体氧化应激有关。

木犀草苷对运动性疲劳大鼠的心肌氧化应激及抗氧化基因表达的影响

木犀草苷(cynaroside,CYN)是一种存在与多种植物中的黄酮类化合物,具有显著的抗氧化活性。本研究旨在揭示木犀草苷对运动性疲劳诱导的大鼠心肌氧化应激的影响。本研究通过递增负荷游泳建立了运动性疲劳大鼠模型,游泳当天对大鼠分别灌胃2 mL 5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg的木犀草苷,连续9周。末次游泳24 h后,检测各组大鼠的心功能参数、血清心肌损伤指标和心肌组织氧化应激指标。通过HE染色观察心肌组织学组织形态。通过RT-qPCR检测心肌组织中Nrf2、Keap1、HO-1和NQO-1的m RNA水平。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2的核转位。结果表明,木犀草苷降低了运动性疲劳大鼠的LVPWd、LVPWs和LVIDs,升高了EF和FS(P<0.05)。木犀草苷降低了运动性疲劳大鼠血清LDH、CK和cTnI水平,减轻了心肌组织学病变(P<0.05)。木犀草苷升高了运动性疲劳大鼠心肌组织SOD、GSH-Px和CAT活性,降低了MDA含量(P<0.05)。木犀草苷升高了运动性疲劳大鼠心肌组织Nrf2、HO-1和NQO-1 m RNA相对表达量,降低了Keap1 m RNA相对表达量(P<0.05)。木犀草苷促进了运动性疲劳大鼠心肌组织Nrf2的核转位(P<0.05)。本研究表明木犀草苷可能通过激活Nrf2途径减轻了运动性疲劳大鼠的心肌损伤和氧化应激反应。木犀草苷在预防运动性疲劳或运动性心肌损伤方面具有潜在的应用价值。

山茱萸新苷对力竭训练大鼠心肌损伤的保护作用

山茱萸新苷(cornuside,CNS)是山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)中的一种环烯醚萜苷化合物,具有心脏保护作用。为考察山茱萸新苷对力竭训练诱导的大鼠心肌损伤的保护作用,本研究通过力竭游泳建立了力竭训练大鼠模型,训练当天对大鼠分别灌胃3个剂量(10,20和40 mg/kg)的山茱萸新苷,共给药4周。然后检测了大鼠的力竭时间、能量代谢指标、心肌损伤指标、心肌炎症和氧化应激指标。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2和NF-κB信号转导途径相关蛋白的表达。结果表明,3种剂量的山茱萸新苷均提高了大鼠的力竭时间,升高了肝糖原、肌糖原和NEFA水平,降低了LA和BUN水平,降低了血清LDH、CK和cTnI水平,降低了心肌组织IL-1β、IL-6和TNF-α水平,升高了心肌组织SOD和CAT水平,降低了MDA水平,升高了心肌组织细胞核Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白相对表达量,降低了Keap1和p-NF-κB p65蛋白相对表达量(P<0.05)。山茱萸新苷对上述指标的影响具有剂量依赖性(P<0.05)。本研究表明山茱萸新苷可减轻力竭训练诱导的大鼠心肌损伤,其机制与改善能量代谢、激活Nrf2信号转导途径和失活NF-κB信号转导途径有关。