中国水仙NtPLATZ1抗血清的制备及效价分析

将本试验前期成功表达的中国水仙锌指蛋白Nt PLATZ1基因融合蛋白免疫大白兔,收集抗血清,制备多克隆抗体。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测其效价,通过免疫印迹检测(western-blot)分析该血清的特异性。ELISA检测得出多克隆抗体的效价为l∶6 400,Western blotting结果表明,制备的抗血清能与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应。免疫大白兔获得的血清特异性强,效价高,可用于Nt PLATZ1蛋白功能的研究。

中国水仙NtPLATZ1正、反义植物表达载体构建及转化烟草的研究

通过构建中国水仙锌指蛋白基因NtPLATZ1正义和反义两种植物表达载体,并用冻融法将其导入农杆菌EHA105菌株,介导遗传转化烟草,对遗传转化的烟草再生植株进行PCR-Southernblot和RT-PCR检测,研究NtPLATZ1的功能。结果表明成功将NtPLATZ1转化烟草,获得5株阳性转基因植株。NtPLATZ1在转基因烟草中过表达能抑制烟草的生长,抑制表达可促进烟草生长。