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题名‘云香’水仙NtWRKYY2基因的克隆及功能分析
被引量:1
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作者
温秀萍
孙申申
杨菲颖
陈晓静
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机构
福建农林大学园艺学院
福建农林大学园艺植物遗传育种研究所
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出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期1255-1262,共8页
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基金
福建省种业创新与产业化工程项目(K8114001B)
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文摘
以‘云香’水仙为材料,采用PCR技术分离中国水仙WRKY转录因子家族成员NtWRKYY2(GenBank登录号为KX056496),其开放阅读框(ORF)长度为867bp,编码289个氨基酸。氨基酸序列比对及系统进化树分析显示,NtWRKYY2编码蛋白含1个WRKY结构域和C2H2锌指结构(Csx4Cx23HxH),属于第Ⅱd类WRKY转录因子。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示,NtWRKYY2在‘云香’水仙应对盐胁迫中显著上调表达。利用InFusion克隆技术成功构建过表达载体pMDC140-NtWRKYY2,并采用农杆菌介导叶盘法转化烟草,获得11株卡那霉素抗性植株,转化子进一步PCR检测结果显示,其中有8株目的基因已成功导入烟草基因组中,转化率为72%。盐胁迫处理和叶绿素荧光参数分析显示,盐胁迫处理后NtWRKYY2过表达的转基因烟草萎蔫和黄化程度小于野生型植株,Fv/Fm值下降幅度小于野生型植株。研究表明,NtWRKYY2过表达的转基因烟草具有抵抗盐胁迫的能力。该研究为水仙抗盐转基因育种提供备选目的基因。
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关键词
'云香’水仙
WRKY
ntwrkyy2
基因表达
盐胁迫
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Keywords
WRKY‘Yunxiang’narcissus
WRKY
ntwrkyy2
gene expression
salt stress
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
Q786
[生物学—分子生物学]
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