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Cloning and Expression of the vp39 Gene of Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus in E.coli 被引量:1
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作者 Liu Dell, Sun Xiaojie, Qi Yipeng, Zhu Ying, Jin Tianquan(Institute of Virology, Wuhan University,Wuhan 430072, China) 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 EI CAS 1998年第1期108-112,共5页
The nuclear capsid protein gene (vp39) ofBombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) was amplified successfully by PCR technique and inserted into pGEM 3zf(+). The 5′ and 3′ terminal area of the amplified vp39 ge... The nuclear capsid protein gene (vp39) ofBombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) was amplified successfully by PCR technique and inserted into pGEM 3zf(+). The 5′ and 3′ terminal area of the amplified vp39 gene were sequenced with silver-staining dideoxy method. Bmvp39 gene was sub-cloned into the expression vector pRSET-A, and transformed intoE. coli BL21. This gene was highly expressed by IPTG induction. SDS-PAGE analysis showed that the expressed protein is about 38 kd, and the expressed amount reached maxium in 4 h with IPTG induction. 展开更多
关键词 nuclear capsid protein gene (vp39) PCR amplification gene cloning expression BMNPV
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甜菜夜蛾核型多角体病毒vp39基因重组真核表达质粒的构建及鉴定 被引量:1
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作者 段媛媛 杨成丽 +4 位作者 周建刚 范文韬 彭建新 江月 刘德立 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期345-347,352,共4页
利用DNA重组技术 ,将杆状病毒极早期基因ie1启动子基因克隆至重组质粒pGEM Se39中 ,成功地构建了重组真核表达质粒pGEM IE1 Se39.
关键词 甜菜夜蛾 核型多角体病毒 vp39 基因重组 真核表达质粒 iel启动子 核衣壳蛋白基因 基因克隆 pGEM-IE1-Se39
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甜菜夜蛾多核壳型核型多角体病毒vp39基因的克隆与表达(英文) 被引量:1
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作者 段媛媛 杨成丽 +1 位作者 刘德立 范文韬 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期214-218,共5页
参照苜宿银纹夜蛾核型多角体病毒 ( Ac MNPV)衣壳蛋白基因 vp3 9的序列设计引物 ,采用PCR技术扩增了甜菜夜蛾核型多角体病毒的约 1 .3 kb片段。通过将该片段亚克隆至原核表达载体p ET-2 8构建出重组表达质粒 p ET-Se3 9.以 p ET-Se3 9转... 参照苜宿银纹夜蛾核型多角体病毒 ( Ac MNPV)衣壳蛋白基因 vp3 9的序列设计引物 ,采用PCR技术扩增了甜菜夜蛾核型多角体病毒的约 1 .3 kb片段。通过将该片段亚克隆至原核表达载体p ET-2 8构建出重组表达质粒 p ET-Se3 9.以 p ET-Se3 9转化 E.coli BL2 1 .经 IPTG诱导后 ,Se MNPVvp3 9基因高效表达 .SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量为 3 9KD,并且表达量在 IPTG诱导 4 h达到最高水平 . 展开更多
关键词 核衣壳蛋白基因 基因克隆 基因表达 SeMNPV 甜菜夜蛾多核壳型核型多角体病毒 表质载体
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家蚕核型多角体病毒中国株和日本株vp39基因的比较研究 被引量:6
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作者 齐义鹏 刘德立 孙晓洁 《中国病毒学》 CSCD 2000年第1期52-58,共7页
以苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (AcNPV)的核衣壳蛋白基因vp39设计引物 ,用PCR技术扩增了家蚕核型多角体病毒中国株 (BmNPV Ch)~ 1.3kb片段 ,并测定了其全序列长 12 30bp。推导的氨基酸 351个 ,其与BmNPV日本株 (BmNPV Ja)vp39基因核苷... 以苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (AcNPV)的核衣壳蛋白基因vp39设计引物 ,用PCR技术扩增了家蚕核型多角体病毒中国株 (BmNPV Ch)~ 1.3kb片段 ,并测定了其全序列长 12 30bp。推导的氨基酸 351个 ,其与BmNPV日本株 (BmNPV Ja)vp39基因核苷酸序列同源性达 97.5% ,氨基酸同源性达 97.1%。该片段在E .coliBL2 1中诱导表达能产生分子量约为 38kD的特征性蛋白带 ,证明所扩增片段为BmNPV Ch的vp39基因。经与BmNPV Ja比较 ,其 6 2 5位有 3个核苷酸(CGA) ,985~ 910位有 6个核苷酸 (GTCGGC)的插入 ,未造成码组移动。有 17处点突变 ,但取代突变 (replacementmutation)仅 7处 ,对两株病毒VP39蛋白的亲疏水性和酸碱性质未产生显著影响。由于点突变带来氨基酸改变 ,使BmNPV Ch的vp39蛋白的α 螺旋由 13.2 %增加到 15.4 % ,无规卷曲由 7.2 %减少到 5.8% ,β 折叠和β 转角维持不变 ,约为 79.6 % ,仍保持以β 折叠为主要二级结构单元的片层状折叠结构。 展开更多
关键词 核衣壳蛋白基因 家蚕 核型多角体病毒 点突变
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苜宿银纹夜蛾核型多角体病毒vp39基因的克隆及其对S_f9细胞形态的影响
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作者 刘德立 孙晓洁 +2 位作者 齐义鹏 李小峰 朱应 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期340-343,共4页
最近的研究发现:AcNPV的vp39基因与侵染密切相关[1].在侵染过程中,VP39蛋白与宿主的肌动蛋白结合,使其重排形成缆索(cable).导致细胞骨架发生变化有利于病毒编码的蛋白酶的水解.最后,子代病毒颗粒大量形... 最近的研究发现:AcNPV的vp39基因与侵染密切相关[1].在侵染过程中,VP39蛋白与宿主的肌动蛋白结合,使其重排形成缆索(cable).导致细胞骨架发生变化有利于病毒编码的蛋白酶的水解.最后,子代病毒颗粒大量形成,宿主昆虫体全部液化成为脓水.可... 展开更多
关键词 苜蓿银纹夜蛾 核型多角体病毒 基因克隆 细胞
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不同来源家蚕核型多角体病毒的致病力及其vp 39基因的遗传进化分析
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作者 王霞 王平阳 +4 位作者 崔秋英 蒋满贵 张雨丽 黄旭华 宋宪军 《蚕学通讯》 2023年第1期36-40,共5页
家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是养蚕生产中的主要病原微生物之一。收集广西壮族自治区9个蚕区的BmNPV分离株,纯化后分别给家蚕品种两广二号的2龄起蚕添食感染,调查9个BmNPV分离株对2龄起蚕的LC_(50)在1.55×10^(6)~4.19×10^(6)mL... 家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是养蚕生产中的主要病原微生物之一。收集广西壮族自治区9个蚕区的BmNPV分离株,纯化后分别给家蚕品种两广二号的2龄起蚕添食感染,调查9个BmNPV分离株对2龄起蚕的LC_(50)在1.55×10^(6)~4.19×10^(6)mL^(-1)之间,各分离株间的致病力差异不显著。选择BmNPV的感染相关基因vp 39设计合成序列引物进行PCR,对各分离株的扩增产物测序并进行遗传进化分析,结果表明不同来源分离株的vp 39基因在进化树上归于一个分支上的几个层次分支,序列间的相似度大部分>98%,相互间的遗传距离也较小,部分<1.0,提示vp 39基因相对比较保守。研究结果为解析家蚕抗病毒机制提供了一些新的参考信息。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 分离株 致病力 vp 39基因 序列同源性
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