结核分枝杆菌耐多药相关蛋白筛选及诊断价值研究

目的筛选耐多药结核分枝杆菌菌体差异表达蛋白并分析其诊断耐药结核病的价值。方法采用比较蛋白质组学技术,将临床分离的耐多药结核分枝杆菌菌体蛋白与标准株H37Rv进行比较,通过质谱分析和数据库鉴定差异表达蛋白点,在大肠杆菌中克隆、表达和纯化其中的NuoB (NADH脱氢酶I B链),采用ELISA法测定NuoB抗原在耐多药结核分枝杆菌感染患者、敏感结核分枝杆菌感染患者和正常对照者血清Ig G抗体水平。结果共发现重复性较好的耐多药结核分枝杆菌菌株差异蛋白点11个,经质谱分析鉴定出8个蛋白,其中NuoB在耐多药结核分枝杆菌中表达上调,并具有B细胞强结合表位,免疫原性较强。纯化获得的NuoB抗原在耐多药结核分枝杆菌感染患者血清中Ig G阳性率为43.86%(25/57),在药物敏感结核分枝杆菌感染患者中为15.62%(5/32),在正常对照者中为10.00%(3/30),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NuoB抗原对耐多药结核病患者具有一定的区分度,具有耐多药结核病血清学鉴别诊断价值。