Cytotoxicities of alkaloids from processed and unprocessed seeds of Strychnos nux-vomica

目的：测定６种中药马钱子生品及不同炮制品的总生物碱以及１３个单体生物碱的细胞毒性．方法：采用细胞培养法观察马钱子生物碱对Ｖｅｒｏ细胞增殖抑制和［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷酸参入法对宿主细胞内ＤＮＡ合成的影响．结果：砂炒炮制品的ＩＣ５０值分别是生品的１５５％和２１２％．１３个化合物的ＩＣ５０值分别是０．４５－０．８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１和０．５０－１２ｍｍｏｌ·Ｌ－１．马钱子中异型生物碱及氮氧化合物在砂炒炮制品中含量最高，但这些生物碱显示出较小的细胞毒性．其中异马钱子碱氮氧化物毒性最低．砂炒炮制品与其它传统炮制品及生品比较具有更宽的安全范围．结论：马钱子的炮制对其毒性起关键性作用．

基于PI3K/Akt/mTOR通路探究马钱子总生物碱对类风湿性关节炎大鼠的作用及机制

目的:分析马钱子总生物碱对类风湿性关节炎(RA)大鼠的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)通路的影响。方法:50只Wistar大鼠随机分为对照组、RA组、RA+马钱子总生物碱组(100 mg·kg^(-1))、RA+PI3K抑制剂组(20 mg·mL^(-1)LY294002)、RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组[100 mg·kg^(-1)马钱子总生物碱+20μg·kg^(-1)胰岛素样生长因子1(IGF-1)],除对照组外,其余各组均构建RA模型并根据剂量给药,计算每只大鼠关节评分,测定大鼠血清抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)、丙二醛(MDA)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察评估大鼠膝关节滑膜组织病理,比较各组Mankin评分、炎细胞浸润数、软骨厚度;测定滑膜组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)水平;蛋白免疫印迹(Western blot)测定大鼠滑膜组织PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达。结果:1)对照组大鼠关节软骨组织结构正常,表面光滑完整,腔隙内组织有良好的完整软骨细胞;RA组关节表面广泛侵蚀,形态无规则,软骨细胞明显丢失,炎性细胞大量浸润,关节软骨厚度低,细胞间基质显著丢失,滑膜中单核炎性细胞浸润可见;RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组呈现保护性体征,关节表面侵蚀降低,炎性细胞浸润减轻,关节软骨厚度增加;与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组关节软骨损伤加重。2)与对照组相比,RA组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL升高(P<0.05),软骨厚度降低(P<0.05);与RA组相比,RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL降低(P<0.05),软骨厚度升高(P<0.05);与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL升高(P<0.05),软骨厚度降低(P<0.05)。3)与对照组相比,RA组大鼠滑膜组织磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05);与RA组相比,RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组大鼠滑膜组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR降低(P<0.05);与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组大鼠滑膜组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05)。结论:马钱子总生物碱可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路缓解RA大鼠炎症。

马钱子生物碱在大鼠体内的组织分布

目的 研究马钱子生物碱在大鼠体内的组织分布。方法 大鼠静脉注射马钱子总碱后 ,定时用高效液相色谱法测定各组织中士的宁 (strychnine ,S)、马钱子碱 (brucine,B)、士的宁氮氧化物 (strychnineN oxide ,SNO)和马钱子碱氮氧化物(brucineN oxide ,BNO)的含量。结果 S、B、SNO和BNO在脑和脊髓中均有较多的分布。结论 S、B、SNO和BNO均可穿透血脑屏障 ,到达脑和脊髓 。

马钱子不同炮制品中总生物碱的测定及急性毒性试验的比较

通过对中药马钱子不同炮制品中总生物碱的提取、含量测定、生物碱种类鉴别及小鼠急性毒性试验的比较，就炮制方法与毒性大小之间的关系进行了探讨。

马钱子生物碱成分的研究

从马钱子的种子中分得13种生物碱,其中异马钱于碱、异马钱子碱N-氧化物、异士的宁N-氧化物为首次从该植物中鉴定。

马钱子总生物碱脂质体的含量与包封率测定

目的建立测定马钱子总生物碱脂质体含量和包封率的方法,用于处方与工艺评价。方法采用氨性氯仿法提取马钱子总生物碱并分析其成分,采用硫酸铵梯度法制备马钱子总生物碱脂质体。以士的宁为对照品,采用紫外分光光度法,在254nm测定用破膜剂溶解的马钱子总生物碱脂质体的吸光度确定其含量。采用葡聚糖凝胶柱分离脂质体和游离药物,分别测定含量后计算包封率。结果马钱子总生物碱提取物平均得率为3.49%,在总生物碱提取物中士的宁和马钱子碱分别占46.76%和26.51%。士的宁标准曲线的范围是2.4～20μg/mL,加样回收率在96.66～102.62%范围内。葡聚糖凝胶柱层析的回收率为100.85±0.79%(n=3)。结论所建立的方法简便快捷稳定,可以满足马钱子总生物碱脂质体质量控制的需要。

马钱子生物碱成分的体外抗肿瘤活性筛选

目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法应用人鼻咽癌细胞株KB、人白血病细胞株HL-60、人胃癌细胞株BGC和人肝癌细胞株BEL-7402筛选6种马钱子生物碱类成分对其生长的抑制作用。结果士的宁对人鼻咽癌细胞株KB、人白血病细胞株HL-60和人胃癌细胞株BGC等细胞的生长有一定的抑制作用;伪士的宁对人鼻咽癌细胞株KB、人胃癌细胞株BGC和人肝癌细胞株BEL-7402等细胞的生长有一定的抑制作用;依卡金对人鼻咽癌细胞株KB和人胃癌细胞株BGC等细胞的生长有一定的抑制作用。结论士的宁、伪士的宁和依卡金对人鼻咽癌细胞株KB和人胃癌细胞株BGC等细胞的生长皆有抑制作用,呈现浓度-效应关系。

马钱子中16个生物碱类化合物13CNMR谱的数据分析

从炮制前后的马钱子中，提取分离和鉴定了１６个生物碱，其中异马钱子碱、异马钱子碱氮氧化物、异番木鳖碱、氮氧化物、２－羟基，３－甲氧基番木鳖碱为新生物碱。经光谱（１３ＣＮＭＲ，１ＨＮＭＲ，ＩＲ，ＵＶ和ＭＳ）解析，确定其结构。通过实验发现，用１３ＣＮＭＲ谱测定马钱子中生物碱的结构，具有简便、快速等优点，且各化合物及其衍生物的共振峰呈现一定的规律。

磷脂组成对马钱子总生物碱隐形脂质体抗肿瘤作用的影响

目的比较3种不同磷脂组成大豆磷脂、氢化大豆磷脂、复合磷脂氢化(氢化大豆磷脂∶大豆磷脂=1∶3,w/w)的隐形脂质体载药后对马钱子总生物碱抗肿瘤作用的影响。方法采用硫酸铵梯度法制备了马钱子总生物碱隐形脂质体。ICR小鼠接种S180瘤株造成移植性荷瘤小鼠模型,比较马钱子总生物碱溶液和3种不同磷脂组成隐形脂质体给药后荷瘤小鼠的抑瘤效果,比较给药后各组荷瘤小鼠的体质量、免疫器官(脾和胸腺)指数和肝、肾功能指数。结果磷脂组成对马钱子总生物碱隐形脂质体的抗肿瘤效果具有显著影响。1 mg/kg剂量下的马钱子总生物碱溶液、大豆磷脂隐形脂质体、氢化大豆磷脂隐形脂质体和复合磷脂隐形脂质体的抑瘤率分别为17.84%、28.00%、32.84%和47.09%。马钱子总生物碱复合磷脂与氢化大豆磷脂隐形脂质体给药后未发现对免疫器官存在明显的抑制作用;不同磷脂组成的马钱子总生物碱隐形脂质体对肝肾功能的影响以大豆磷脂隐形脂质体最大,其次为复合磷脂隐形脂质体,而氢化大豆磷脂隐形脂质体的影响最低。结论基于药效与安全性考虑,复合磷脂脂质体是抗肿瘤中药有效部位马钱子总生物碱具有开发前景的新型载体。

油炸马钱子的生物碱成分研究

从中药油炸马钱子(Strychnos nux-vomica L.)中分离得到10个生物碱类化合物.通过波谱分析,分别鉴定为士的宁(1)、士的宁氮氧化物(2)、马钱子碱(3)、马钱子碱氮氧化物(4)、诺弗新(5)、依卡精(6)、异士的宁(7)、异马钱子碱(8)、异马钱子碱氮氧化物(9)、异士的宁氮氧化物(10).为其潜在的药理活性研究提供物质基础.

马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定方法研究

目的：建立马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定方法。方法：采用酸性染料比色法，溴百里香酚蓝为酸性染料，分别以马钱子碱和士的宁为对照品，测定马钱子散中马钱子总生物碱含量。结果：士的宁、马钱子碱在0．0200～0．0802mg／mL浓度范围内与吸光度均呈良好的线性关系，士的宁、马钱子碱的回收率分别为：95．30％-101．48％（RSD为2．28％），97．14％～105．30％（（RSD为2．95％）；以马钱子碱计，马钱子散中马钱子总生物碱含量为3．16％。结论：所建立的总生物碱测定方法准确、稳定、重复性好，可用于马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定。

爆压法对马钱子总生物碱的影响及急性毒性试验研究

目的 :观察爆压法对马钱子的总生物碱含量和急性毒性的影响。方法 :采用溶剂提取法提取总生物碱并测定其含量 ,用薄层层析对总生物碱中士的宁和马钱子碱进行定性分析 ,并通过小白鼠灌胃给药测定爆压品和生品的LD50 。结果 :马钱子经爆压法和砂烫法炮制后 ,总生物碱的含量下降甚微 ,与生品比较仍达 92 %～ 95 .6 % ,而爆压法与生品急性毒性比较下降了 38.3% (P <0 .0 1)。结论 :爆压法既能显著降低马钱子毒性 ,又能保证其效价不会明显下降。

马钱子总生物碱隐形脂质体的制备及急性毒性研究

目的:制备马钱子总生物碱隐形脂质体并与普通脂质体比较急性毒性。方法:采用酸性染料法测定马钱子总生物碱的含量。采用氨性氯仿法从制马钱子中提取了马钱子总生物碱并测定了纯度。以士的宁为模型药物,考察马钱子总生物碱隐形脂质体的制备工艺。采用硫酸铵梯度法制备了马钱子总生物碱隐形脂质体及普通脂质体,比较了两者的包封率、粒径等药剂学性质以及急性毒性。结果:采用优化后的处方与工艺,士的宁隐形脂质体的包封率为90.64%,产率为98.82%,并应用于马钱子总生物碱隐形脂质体的制备。马钱子总生物碱隐形脂质体和普通脂质体的包封率分别为80.97%和73.01%,粒径分别为106.5 nm和163.4 nm。马钱子总生物碱溶液、普通脂质体及隐形脂质体的LD50分别为1.85、2.56和3.42 mg/kg。结论:士的宁隐形脂质体的制备工艺可用于马钱子总生物碱隐形脂质体制备。与普通脂质体相比,隐形脂质体作为马钱子总生物碱的载体性质更加理想。

马钱子总生物碱复合磷脂脂质体包封率的测定

目的：建立测定马钱子总生物碱复合磷脂脂质体包封率的方法。方法：采用浸渍法提取马钱子总生物碱并进行了纯化,采用硫酸铵梯度法制备了马钱子总生物碱复合磷脂脂质体。以士的宁为对照品,采用紫外分光光度法在254nm测定用破膜剂溶解的马钱子总生物碱脂质体的吸光度测定其含量。采用葡聚糖凝胶柱分离脂质体和游离药物,分别测定含量后计算包封率。结果：马钱子总生物碱平均得率为3.49%。士的宁标准曲线的范围是2.4-20μg/mL,加样回收率98.04%±1.31%。葡聚糖凝胶柱层析的回收率为102.93%±2.04%。结论：所建立的方法简便快捷稳定,可以满足马钱子总生物碱复合磷脂脂质体质量控制的需要。

基于5种生物碱定量分析的马钱子总碱提取工艺优化

首先以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温35℃,检测波长260 nm,建立同时测定5种马钱子生物碱（士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物与番木鳖次碱）含量的反相HPLC法;然后以上述5种生物碱的总量为指标,采用L9（33）正交实验法,对马钱子总碱的回流提取工艺条件（溶剂用量、质量浓度和提取次数）进行优化.结果表明,上述5种马钱子生物碱质量浓度线性范围依次为14.64～468.48、11.625～372.0、0.555～17.76、0.891～28.512μg/mL与2.5～80.0 μg/mL,回收率分别为100.3％、101.7％、97.7％、98.8％与99.6％.优化后马钱子总碱的回流提取工艺条件为：加入20倍量体积分数70％的酸性乙醇,回流提取4次,每次1h.在此提取条件下,马钱子提取物中5种生物碱总质量分数达3.633％.反相HPLC法同时测定5种马钱子生物碱含量的方法简便、准确;以此作为马钱子总碱提取工艺优化的指标更为全面、可靠.

爆压法炮制马钱子的可行性分析

目的 :比较爆压法炮制与不同炮制方法炮制的马钱子主要成分之间的关系。方法 :采用溶剂提取法提取总生物碱 ,用理化方法 ,TL C,UV,IR对提取物进行鉴定。结果 :马钱子经爆压法、砂烫法和烘烤法炮制后 ,总生物碱的含量下降甚微 ,与生品比较仍达 92 %～ 95 %以上 ;三种炮制品中主要成分士的宁和马钱子碱定性鉴别结果差异不大。结论 :爆压法与砂烫法和烘烤法对马钱子生物碱主要成分的含量分布影响差异不大 ,爆压法可替代砂烫法和烘烤法。

马钱子优化总生物碱的制备与评价

目的通过简单工艺除去大部分士的宁制备马钱子优化总生物碱以实现减毒增效。方法利用马钱子碱与士的宁在50%乙醇中的溶解度相差悬殊的原理除去马钱子总生物碱中的大部分士的宁制备马钱子优化总生物碱。酸性染料法测定纯度,HPLC法测定其中马钱子碱和士的宁的含量变化,比较优化前后马钱子总生物碱的急性毒性以及对小鼠耳肿胀的抑制作用。结果制得的马钱子优化总生物碱以马钱子碱计,纯度为(100.66±1.84)%(n=3),优化前后马钱子碱与士的宁的含量比例从1∶1.8上升到2.7∶1。优化后马钱子总生物碱的毒性显著下降,LD50比优化前提高了4.8倍。马钱子优化总生物碱的抑制耳肿胀活性显著优于马钱子总生物碱。结论马钱子优化总生物碱可以实现减毒增效,提高治疗指数。

不同载药形式的肉桂油对马钱子总碱中马钱子碱和士的宁体外透皮吸收的影响

目的:研究不同载药形式的肉桂油对马钱子总碱中马钱子碱和士的宁体外透皮吸收的影响。方法:以大鼠离体皮肤为实验材料,采用Franz扩散池法,以高效液相色谱法(HPLC)测定马钱子总碱中马钱子碱和士的宁48 h的累积渗透量(Q_(48 h))、稳态渗透速率常数(Jss)、增渗倍数(ER)和累积透过率(T),考察不同载药形式(溶液、微乳、脂质体、传递体、醇传递体)的肉桂油对马钱子总碱中马钱子碱和士的宁体外透皮吸收的影响,并以不加肉桂油的马钱子总碱为对照进行比较。结果:肉桂油以溶液、微乳、脂质体、传递体和醇传递体不同载药形式入药后马钱子碱的Q_(48 h)分别为(334.44±7.65)、(265.33±7.54)、(249.12±6.60)、(202.24±24.55)、(274.30±17.12)μg/cm^2;Jss分别为25.07、21.62、19.73、17.31、24.86μg/(cm^2·h),ER分别为5.2、4.5、4.1、3.6、5.1,T分别为55.12%、43.73%、41.06%、33.33%、45.22%;士的宁的Q_(48 h)分别为(395.37±2.90)、(285.13±6.69)、(298.26±12.54)、(272.26±13.32)、(338.70±9.41)μg/cm2;Jss分别为32.91、23.80、26.04、22.76、29.26μg/(cm2·h),ER分别为2.0、1.5、1.6、1.4、1.8,T分别为25.54%、18.42%、19.27%、17.59%、21.88%。与不加肉桂油比较,加入肉桂油能明显增加马钱子总碱中士的宁和马钱子碱的Q_(48 h)(P<0.05)。结论:不同载药形式的肉桂油均能促进马钱子总碱中士的宁和马钱子碱的透皮吸收,其中以溶液形式最明显。

马钱子优化总生物碱复合磷脂传递体的制备与性质研究

目的应用复合磷脂传递体技术以改善马钱子优化总生物碱的药剂学性质和透皮吸收效果。方法通过除去总生物碱中的大部分士的宁得到马钱子优化总生物碱。采用硫酸铵梯度法制备了马钱子优化总生物碱复合磷脂传递体,以包封率为指标确定了其最优磷脂组成。以相应的单一磷脂传递体为对照,比较了马钱子总生物碱复合磷脂传递体药剂学性质以及体外透皮吸收性质。采用DSC和分子模拟研究考察了复合磷脂的相互作用规律。结果优化后,马钱子总生物碱中马钱子碱与士的宁的比值从1:1.8改变为2.7:1,LD50比优化前提高了4.8倍。通过包封率考察确定SPC:DPPC=4:6为最佳复合磷脂组成。与单一磷脂传递体相比,马钱子优化总生物碱复合磷脂传递体的药剂学性质和体外透皮吸收效果显著提高。结论马钱子优化总生物碱复合磷脂传递体的药剂学性质与透皮吸收性能优于单一磷脂传递体。

中药马钱子中十个单萜吲哚类生物碱-1H NMR谱综述

目的总结马钱子单萜吲哚类生物碱不同结构系列的1H NMR谱规律。方法通过查阅前人对马钱子中生物碱类成分的研究文献,并综述有文献报道的马钱子中生物碱类成分的1H NMR谱。结果根据其生物碱都是以士的宁为母核的特性,同一系列的1H NMR谱生物碱具有相似的规律。结论根据这些规律可以简便、快速的鉴别马钱子中的生物碱。