非小细胞肺癌患者组织MutS同种组织蛋白2、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织MutS同种组织蛋白2(MSH2)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达情况及与临床病理参数、预后的关系。方法2021年7月至2022年7月我院收治的96例NSCLC患者,取其手术切除的NSCLC组织标本(NSCLC组)及距癌边缘3 cm处的癌旁正常组织(对照组)。检测两组MSH2和MGMT的表达水平,分析MSH2和MGMT表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。结果与对照组比较,NSCLC组MSH2和MGMT阳性率更低(P<0.05);MSH2阳性与患者分化程度有关(P<0.05);MGMT阳性与患者吸烟史和分化程度有关(P<0.05);与MSH2和MGMT阴性患者比较,阳性患者1年生存率均更高(P<0.05)。结论MSH2和MGMT均在NSCLC组织中存在较低表达,其表达水平与临床病理参数、预后密切相关。

p53、O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在老年脑胶质瘤患者中的表达及其与预后的相关性分析

目的探究p53、O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在老年脑胶质瘤患者中的表达及其与预后的相关性。方法选取2019年8月至2022年6月新疆喀什地区第二人民医院收治的49例老年脑胶质瘤患者的组织标本为试验组,另选取新疆喀什地区第二人民医院同期收治的35例高血压性脑出血患者的正常脑组织标本为对照组。根据WHO分级将老年脑胶质瘤患者分为Ⅰ/Ⅱ级老年脑胶质瘤组(21例)和Ⅲ/Ⅳ级老年脑胶质瘤组(28例)。根据预后不同将老年脑胶质瘤患者分为预后不良组(27例)和预后良好组(22例)。比较分析对照组与试验组患者的p53、MGMT阳性表达率,不同级别老年脑胶质瘤患者的p53、MGMT阳性表达率,不同预后老年脑胶质瘤患者的p53、MGMT阳性表达率。分析p53、MGMT阳性表达率与老年脑胶质瘤患者临床病理特征的关系以及p53、MGMT阳性表达率与老年脑胶质瘤患者预后的相关性。采用受试者工作特征曲线分析p53、MGMT阳性表达率对老年脑胶质瘤患者预后不良的预测价值。结果试验组患者的p53、MGMT阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ级老年脑胶质瘤组患者的p53、MGMT阳性表达率均显著高于Ⅰ/Ⅱ级老年脑胶质瘤组(P<0.05)。预后不良组患者的p53、MGMT阳性表达率均显著高于预后良好组(P<0.05)。p53、MGMT阳性表达率与老年脑胶质瘤患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置等临床病理特征无关(P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,p53、MGMT阳性表达率均与老年脑胶质瘤患者的预后呈显著负相关(r=-0.575,P=0.001;r=-0.528,P=0.001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清p53、MGMT阳性表达率联合指标预测老年脑胶质瘤患者预后不良的曲线下面积为0.912,显著高于p53阳性表达率(曲线下面积为0.734)和MGMT阳性表达率(曲线下面积为0.788)单一指标(P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中的p53、MGMT阳性表达率明显升高,与肿瘤分级、预后显著相关,且对老年脑胶质瘤患者的预后不良具有一定预测价值。

潮汕地区食管癌患者O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性的分析

背景与目的初步研究中国食管癌高发区之一潮汕地区食管癌患者和正常人群O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因编码84、143及160位密码子的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)。材料与方法应用双色荧光杂交微阵列技术分别检测潮汕地区100例食管鳞状细胞癌患者及65例健康对照外周血MGMT基因84位密码子(C2740214T)单核苷酸多态性;用同样的方法检测76例食管鳞状细胞癌患者和50例健康对照MGMT基因143位密码子(A2798995G)、160位密码子(G2799046A)单核苷酸多态性。结果基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。统计分析显示食管鳞状细胞癌组与对照组84位密码子2740214C和2740214T等位基因频率差异无统计学意义(P=0.402),2740214CT基因型在病例组和对照组中所占的比例分别为16%和12.3%,2740214TT基因型在病例组中所占的比例是2%。食管鳞状细胞癌组变异基因型拥有者(CT+TT)高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.327),2740214TT基因型仅见于个别肿瘤患者,而在正常对照中未发现。143位密码子A2798995G位点仅在对照组中发现一例杂合子,其余均为野生型纯合子,病例组与对照组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义。160位密码子G2799046A位点检测在所有的病人和对照中均为野生型纯合子。结论潮汕地区食管鳞状细胞癌患者和正常人群中存在MGMT基因多态性,84位密码子C2740214T位点的突变型纯合子仅见于肿瘤患者,可能与食管鳞状细胞癌有关。

喉癌组织中DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶启动子区过甲基化研究

目的 O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (O6 methylguanineDNAmethyltransferase ,MGMT)在烷化剂所致DNA损伤的修复中起重要作用 ,启动子区过甲基化而导致MGMT基因的转录失活。本文探索了喉癌中MGMT基因启动子区过甲基化状态及其mRNA表达情况。方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应及半定量逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)法分析喉癌、癌旁和正常喉部组织中MGMT基因启动子区过甲基化状态及其mRNA表达情况。结果 4 6例喉癌组织中有 16例 (34 8% )MGMT基因启动子过甲基化 ,相应的癌旁及正常组织中均无甲基化。MGMT基因甲基化在不同的病理分级 (χ2 =3 130 ,P =0 0 77)和临床TNM分期 (χ2 =3 95 7,P =0 138)中差异无显著性。所有甲基化的癌组织中均无MGMTmRNA表达 ,而所有非甲基化的癌组织、相应癌旁组织和 5例正常组织中均有MGMTmRNA表达。且非甲基化的癌组织中MGMTmRNA表达较癌旁组织 (t=30 5 4 0 ,P <0 0 1)和正常组织 (t=31 882 ,P <0 0 1)强 ,而癌旁和正常组织之间差异无显著性(t=0 4 19,P =0 6 77)。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)位居恶性肿瘤的第4位,严重威胁着人类的健康.随着人们生活方式及饮食结构的改变,CRC的发生率呈逐年上升的趋势.CRC的发生机制包括:抑癌基因的失活、癌基因的激活及DNA修复机制的异常过度表达.O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)是一种DNA修复酶,他能通过去除鸟嘌呤O6位烷基基团来防止细胞DNA发生突变,并可以修复损伤的DNA.研究发现,该基因的甲基化与CRC的发生密切相关,近年来已成为研究的新热点.

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在大肠癌中的表达及意义

目的:检测大肠癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)的表达情况及其在肿瘤发生发展中的作用和临床意义。方法:采用SABC免疫组化法检测79例大肠癌标本中MGMT的表达情况。结果:大肠癌中MGMT阳性率为53.16%(42/79),其阳性表达与性别、癌细胞浸润深度无关(P>0.05),与患者年龄、淋巴结转移情况有关(P<0.05)。结论:检测MGMT的表达情况对于大肠癌恶性程度的判断及临床化疗方案的制定具有指导作用。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在脑胶质瘤的表达及其临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑胶质瘤细胞中的表达及其与患者生存时间的关系,以判断患者的预后,并指导胶质瘤术后化学治疗药物的合理选择。方法选取手术切除的59例脑胶质瘤标本,经10%甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋;每例标本以5μm厚度连续切片,作HE染色确定病理组织类型;对患者的生存期进行调查;用免疫组化EnVision法检测脑胶质瘤细胞中MGMT的表达情况;免疫反应染色结果按照Krajewska法进行半定量分析;所有统计分析用SPSS17.0统计软件进行,采用卡方检验以及将MGMT表达与患者生存期绘制成Kaplan-Meier生存曲线,并进行log-rank检验和分析。结果 MGMT在脑胶质瘤的表达存在异质性;MGMT在不同病理级别的脑胶质瘤细胞中表达阳性率不同,差异无统计学意义(P>0.05);MGMT表达阳性患者生存时间低于表达阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MGMT在脑胶质瘤的表达与肿瘤病理级别无关,MGMT的表达可作为判断预后的指标。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在食管癌患者的表达及临床意义

目的探讨DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在老年食管癌患者的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测57例食管癌标本和20例正常食管组织中MGMT的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果MGMT在食管癌表达的阳性率(49.1%)明显低于正常组织(85.0%,P<0.01)。侵及外膜层、有淋巴结转移、Ⅲ+Ⅳ期的食管癌患者MGMT阳性率明显低于未侵及外膜层、无淋巴结转移、Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05)。MGMT在食管癌表达的阳性率在年龄、性别、分化程度、肿瘤部位组间无明显差异(P>0.05)。结论MGMT在食管癌的表达与浸润深度、淋巴结转移和临床分期有关,可作为判断食管癌预后的指标。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶与肿瘤

DNA修复酶O6 -甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT)是机体修复烷基加合物的关键酶。该酶结构与功能异常与肿瘤发生、发现、有效治疗及肿瘤耐药性等方面都有着密切的联系 ,本文综述了近年来的研究进展。

不同级别胶质瘤中P53蛋白与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达的区别与联系

目的探讨不同级别胶质瘤中P53蛋白与O6.甲基鸟嘌呤.DNA甲基转移酶(MGMT)表达的关系。方法2013年1月至2013年12月在我院进行神经外科手术切除的98例脑胶质瘤组织作为研究对象,采用免疫组织化学的方法分析不同级别胶质瘤组织中P53蛋白与MGMT表达的关系。结果在不同级别胶质瘤组织间,MGMT阳性表达无统计学差异(P=0.462),但表达强度差异明显(P=0.019)。MGMT表达强度与肿瘤分级呈负相关(r=-0.629,P<0.05)。MGMT与P53在阳性表达强度上呈负相关(r=-0.750,P<0.05)。结论P53蛋白与MGMT在不同级别的胶质瘤中的表达有一定的关系,而且P53表达增强和MGMT表达减弱均会对胶质瘤的发生及其恶性程度产生影响。

顺铂联合替莫唑胺治疗O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶启动子甲基化胶质瘤的近期疗效观察

目的采用顺铂联合替莫唑胺方案与单用替莫唑胺方案对O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化胶质瘤术后辅助化疗,比较两种化疗方案的近期疗效及不良反应的差异。方法选择2016年6月至2016年12月在安徽医科大学第一附属医院神经外科就诊,术后组织病理证实为胶质瘤(WHOⅡⅣ级)且分子病理示MGMT启动子甲基化阳性的患者18例为处理组;选择同期手术且符合纳入标准的患者16例为对照组,所有处理组和对照组患者都采取同步放化疗加6个周期序贯化疗。结果处理组与对照组患者的客观应答率分别为66.66%和31.25%,差异有统计学意义(P=0.042);癫痫发生率分别为22.22%和12.50%,差异无统计学意义(P=0.660);且未发生严重不良反应。结论 MGMT启动子甲基化胶质瘤术后采用同步放化疗+顺铂联合替莫唑胺化疗疗效优于同步放化疗+替莫唑胺单药化疗,两组患者癫痫发生率差异无统计学意义,且未发生严重不良反应。

乳腺癌组织中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的表达

采用原位杂交方法检测30例乳腺癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达水平。结果显示,MGMT阳性率为93.4%(28/30),其中高表达28.6%(8/28),中、低表达71.4%(20/28)。乳腺癌组织MGMT的表达与临床分期无关。

非小细胞肺癌患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的表达及意义

目的:探讨非小细胞肺癌MGMT表达的临床病理意义。方法:应用免疫组化方法检测90例非小细胞肺癌癌组织中MGMT的表达,并以60例肺癌周围正常组织作为对照。结果:在90例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中MGMT的表达率为53.33%(48/90),明显低于肺癌周围正常组织的76.67%(46/60)(P=0.0065);非小细胞肺癌患者肿瘤组织中,MGMT的阳性表达率在吸烟组为72.73%(40/55),明显高于不吸烟组的22.86%(8/35)(P=0.0000);在低分化组为35.0%(14/40),明显低于高、中分化组的68.0%(34/50)(P=0.0037);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关性(P>0.05)。结论:非小细胞肺癌中,MGMT的阳性表达与肺癌的发生、发展相关,其监控有助于肺癌的预防及早期诊断。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在子宫颈癌组织中表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测子宫颈癌组织中MGMT的表达。结果 60例子宫颈癌组织中MGMT的阳性表达率为93.33%,显著高于14例对照正常宫颈组织中阳性率42.8%,(P<0.05);子宫颈癌患者中,Ⅰ期与Ⅱ期的MGMT阳性率分别为100%、95.83%,显著高于Ⅲ-Ⅳ期的阳性率62.5%(P<0.01)。结论 MGMT的表达水平与宫颈组织癌变发展的进程相关,其在宫颈癌组织的高表达可为宫颈癌的诊断提供重要依据。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性关系的研究

目的为探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性的关系。方法运用病例-对照研究的方法,PCR-RFLP技术检测新疆哈萨克族食管癌51例及非癌对照109例的MGMT84C>T和MGMT135G>T单核苷酸多态(SNPs)的基因型。结果MGMT84C>T位点的三种基因型CC,CT,TT,在哈萨克族食管癌中所占比例分别为76.5%(39/51)、17.6%(9/51)、5.9%(3/51),对照组分别为77.0%(84/109)、18.3%(20/109)、4.6%(5/109),两组间分布差异不显著(P=0.938,P>0.05);MGMT135G>T位点的三种基因型GG,GT,TT,在哈萨克族食管癌中所占比例分别为90.2%(46/51)、7.8%(4/51)、2.0%(1/51),对照组分别为82.6%(90/109)、16.5%(18/109)、0.9%(1/109),两组间分布差异不显著(P=0.295,P>0.05);MGMT84C>T位点和MGMT135G>T位点联合分析,在食管癌组0突变等位基因与1-4突变等位基因所占比例分别为68.6%(35/51)、31.4%(16/51);对照组分别为:63.3%(69/109)、36.7%(40/109),两组间分布差异也不显著(P=0.511,P>0.05)。结论MGMT84C>T和MG-MT135G>TSNPs与哈萨克族食管癌易感性可能无关联。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性与胃癌遗传易感性的关系

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因第3外显子上第84和第53密码子上的多态性改变与胃癌易感性的关系以及与环境因素在胃癌发生中的交互作用。方法应用以人群为基础的病例对照研究,采用PCR-RFLP技术检测191例胃癌病例组与251例健康对照组MGMT-Leu53Leu和MGMT-Leu84Phe多态改变的频率。结果MGMT-Leu84Phe各基因型在胃癌病例组(CC 74.3%,CT 23.6%,TT 2.1%)和对照组(CC 74.1%,CT 23.5%,TT 2.4%)的分布情况与MGMT-Leu53Leu基因型相似,差异无显著性;MGMT-Leu53Leu各基因型在胃癌病例组中的分布分别为CC型(75.4%)、CT型(21.5%)、TT型(3.1%),对照组分布为CC型(72.1%)、CT型(24.7%)、TT型(3.2%),两组比较差异无显著性;分别按年龄、性别、吸烟、饮酒、H.pylori感染以及胃癌家族史等因素分层分析也没有发现两个位点的突变基因型与胃癌遗传易感性的相关性。结论结果显示MGMT-Leu53Leu、Leu84Phe与胃癌的发生没有显著关联。

膀胱癌O^6-甲基鸟嘌呤-DNA转移酶基因启动子甲基化及其临床意义

目的研究膀胱癌O^6-甲基鸟嘌呤-DNA转移酶(MGMT)基因启动子甲基化情况,探讨其与临床病理特征间的关系及临床意义。方法选取2010年1月～2012年1月于河北工程大学附属医院就诊并行手术切除治疗的膀胱癌患者93例,选取同期就诊且经膀胱镜检查证实无膀胱肿瘤的47例患者作为对照。应用甲基化特异聚合酶链式反应(PCR)检测膀胱癌组织和正常膀胱黏膜组织中MGMT基因甲基化状况。统计分析MGMT甲基化与临床病理特点关系,Kaplan-Meier分析MGMT甲基化与患者预后间的关系。结果膀胱癌组织中MGMT相对甲基化程度明显高于正常膀胱组织,差异有统计学意义(P <0.01)。MGMT甲基化与分期、分级相关(均P <0.01),与年龄、性别、肿瘤大小、数目、形态及复发频率无关(均P> 0.05)。Kaplan-Meier生存分析发现甲基化组患者5年总体生存率明显低于非甲基化组(均P> 0.05)。结论膀胱癌组织中MGMT基因甲基化水平明显增高,MGMT甲基化与肿瘤分期、分级及不良预后有关,可作为判断膀胱癌病情判断及预后的分子生物学标志,值得临床关注。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶siRNA联合替莫唑胺对黑素瘤细胞增殖的影响

目的:研究O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O^6-methylguananine-DNA methyltransferase,MGMT)对人黑素瘤细胞耐替莫唑胺(temozolomide,TMZ)的影响及机制。方法:体外培养人黑素瘤A375细胞、M14细胞、MV3细胞,采用RT-qPCR及蛋白质印迹法检测细胞MGMT的表达量;CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;蛋白质印迹法检测不同干扰序列对黑素瘤细胞MGMT的干扰效果;蛋白质印迹法检测细胞内PARP,DNA-PKcs和NF-κB蛋白表达。结果:RT-PCR及蛋白质印迹法结果显示不同黑素瘤细胞MGMT表达量不同,其中A375细胞MGMT表达量最高,MV3细胞的表达量最少;蛋白质印迹法结果显示转染MGMT siRNA后黑素瘤细胞MGMT表达量明显下降(P<0.05);CCK-8结果显示TMZ对A375细胞及M14细胞的生长增殖有抑制作用,并且这种作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05);蛋白质印迹法结果可见MGMT siRNA联合TMZ处理组PARP,DNA-PKcs,NF-κB蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:MGMT siRNA联合TMZ显著抑制黑素瘤A375和M14细胞增殖。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性与肿瘤易感性的关系

目的 :探讨中国南方汉族人群O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (MGMT)基因 5个外显子的多态性与肿瘤易感性的关系。方法 :采用聚合酶链式反应 (PCR) 单链构象多态性 (SSCP) DNA直接测序法对 10 0例正常人和 88例肿瘤患者外周血白细胞进行MGMT基因多态性研究。结果 :正常人群和肿瘤患者第 3外显子第 84位密码子的第 1个碱基C被T所取代 ,导致错义突变 (CTT→TTT) ,氨基酸由亮氨酸 (Leu)变成了苯丙氨酸 (Phe) ;第 4外显子第 94位密码子的第 3个碱基C被T所取代 ,导致同义突变 (TTC→TTT ,均编码Phe)。这 2个位点的多态性在 2组人群中的检出率差异不存在统计学意义 (P >0 .0 5 )。同时在肿瘤患者中还检测到MGMT基因第 5外显子第 2 0 0位密码子的第 2个碱基G被C取代 ,即GGC→GCC ,所编码的氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸 ,这一多态不存在于正常对照中。结论 :MGMT基因第 3、4、5外显子上存在着多态性 ,其中第 3、4外显子的多态改变与肿瘤形成的关系较弱 ,而第 5外显子的多态仅见于肿瘤患者 ,可能与肿瘤的形成有关。

SPR生化分析仪对6-氧甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的检测

6-氧甲基鸟嘌吟-DNA甲基转移酶(简称MGMT)是一种重要的DNA损伤修复酶,组织中MGMT活性水平的检测可以为肿瘤的早期预防和治疗中化疗方案的确定提供依据。我们利用基于表面等离子体谐振(SPR)生物传感器原理研制成的SPR-2000型生化分析仪对MGMT的基因片段进行了检测,然后采用配套的软件系统对实验数据进行处理,获得检测曲线;再对检测曲线进行温度补偿修正后便获得了杂交反应曲线,SPP-2000型生化分析仪可以检测1.18×10^(-10)mol/L浓度的MGMT核酸样品,为进一步进行临床检测的研究奠定了基础。