O^6-甲基鸟嘌呤DNA转移酶在神经胶质瘤中的表达及其与亚硝脲耐药的关系

目的 :探讨O6 甲基鸟嘌呤DNA转移酶 (MGMT)在人脑神经胶质瘤中的表达情况及其与亚硝脲耐药之间的关系。方法 :采用免疫组化法对人脑神经胶质瘤石蜡标本中MGMT进行了检测 ,并与临床应用亚硝脲的疗效评价结果进行了比较。结果 :116例神经胶质瘤中MGMT阳性表达率为 6 7.2 %。MGMT阳性表达率最高者为髓母细胞瘤 (10 0 % ) ,表达率最低者为少枝胶质细胞瘤 (35 .7% )。在使用亚硝脲治疗的患者中 ,MGMT阳性表达与亚硝脲化疗效果呈显著负相关 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞的耐药程度与MGMT表达强度无关 ,只与其是否阳性有关。结论 :不同病理类型的神经胶质瘤对亚硝脲的耐药和敏感性明显不同。化疗前检测神经胶质瘤MGMT的表达情况 ,对预测化疗敏感性、指导临床使用亚硝脲化疗具有重要意义。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶与肿瘤

DNA修复酶O6 -甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT)是机体修复烷基加合物的关键酶。该酶结构与功能异常与肿瘤发生、发现、有效治疗及肿瘤耐药性等方面都有着密切的联系 ,本文综述了近年来的研究进展。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究DNA修复酶(O-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:乳腺癌和腺瘤标本共计143例,10%福尔马林固定,石蜡包埋,采用SABC免疫组织化学方法检测MGMT表达。结果:MGMT在乳腺癌和乳腺腺瘤中的阳性率分别为57.85%和13.64%,组间比较具有显著性差异。MGMT在乳腺癌中的表达与患者的年龄、淋巴结转移有关。结论:MGMT的异常表达与乳腺癌的淋巴结转移有关;MGMT可以作为判断乳癌发生和预后的重要指标;检测其表达可以指导临床上化疗方案的制定。

扶正增效方放射增敏与肿瘤细胞内O^6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶的关系

目的探讨扶正增效方放射增敏与肿瘤细胞内 O^6-甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶(O^6-MT)关系。方法建立裸鼠人肺腺癌 PAa 模型,分为6组,从接种日始,Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ组裸鼠每天灌服0.6g 扶正增效方水煎剂,Ⅰ、Ⅲ组灌服等量无菌生理盐水,35天Ⅴ、Ⅵ组腹腔注射2mg STZ,36天予Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组瘤体10Gy X 线照射,测瘤体直径、O^6-MT 含量、MGMT 染色及细胞病理学镜检。结果 6组中O^6-MT 含量工组最高,Ⅵ组最少,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组与Ⅰ组相比差异显著,Ⅳ、Ⅵ组相比差异也显著;MGMT 染色强度变化与 O^6-MT 含量一致。瘤体生长Ⅰ、Ⅱ组瘤体放疗第4天起明显增大,Ⅲ组第6天明显增大,与Ⅰ、Ⅱ组相比增长减慢;Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组瘤体在第4天明显减少,以第Ⅵ组最明显;病理学镜检Ⅲ组见小的散在坏死灶,Ⅳ、Ⅴ组坏死区域较Ⅲ组增加,Ⅳ组与Ⅴ组相似;Ⅵ组坏死区域明显增多增大。通过对 O^6-MT 活性、MGMT 染色强度与病理学镜检、瘤体大小对比,细胞内 O^6-MT 含量与放射敏感性密切相关,O^6-MT 含量低组别放疗效果好。结论 O^6-MT含量决定其放射敏感性,据 O^6-MT 活性高低预测其放射敏感性;扶正增效方放射增敏一个重要途径是抑制 DNA 甲基转移酶活性而实现的。

食管鳞状细胞癌O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达与CT影像及病理特征的相关性

目的探讨食管鳞状细胞癌O^(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)表达与CT影像及临床病理特征之间的关系。方法回顾性分析142例手术切除的食管鳞状细胞癌术前胸部平扫及增强CT图像,测量病灶CT值、轴位最大厚度及垂直径,记录临床病理特征。分类资料采用χ^(2)检验或Fisher精确检验。采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验用于比较MGMT不同表达状态间CT参数的差异。采用ROC曲线分析CT参数在预测MGMT不同表达状态时的效能,Spearman分析MGMT表达与CT参数间的相关性。结果病理总分期、增强CT及ΔCT、最大厚度在MGMT不同表达状态组间差异有统计学意义(P均<0.05)。增强CT及ΔCT鉴别MGMT不同表达状态时的诊断效能较优,曲线下面积分别为0.810、0.817,且增强CT及ΔCT与MGMT表达的相关性较高(r=-0.444、-0.473,P均<0.05)。结论MGMT异常表达可能参与食管鳞状细胞癌的发生与发展过程,术前肿瘤增强CT及ΔCT值可较好的预测MGMT表达状态,对评估肿瘤发展及选择合适的治疗方案具有一定临床辅助价值。

β-胡萝卜素对大鼠DNA氧化及烷化损伤影响的研究

目的 研究β-胡萝卜素(β- C)对大鼠DNA氧化及烷化损伤的影响,初步探讨其抗氧化作用机制。方法 将大鼠随机分为5组,分别为β- C缺乏组(β-C1组)、补充0 . 0 71mg (kg·d) (βC2组)、0 . 35 5mg (kg·d) (βC3组)、4 . 2 8mg (kg·d) (βC4组)、15 . 0mg (kg·d) (βC5组)。微量荧光法测大鼠血浆中VA含量;单细胞凝胶电泳(SCGE)观察淋巴细胞DNA氧化损伤状况;高效毛细管电泳法测尿中O6 甲基鸟嘌呤(O6 MeG)的排出量。结果 经8周干预后,四个βC补充组血浆中VA的水平为2 76～30 6 μg L ,缺乏组血浆中VA的含量为135 μg L ,明显低于补充组(P <0 . 0 1)。DNA损伤结果显示:缺乏组大鼠淋巴细胞DNA自发性损伤明显高于补充组(P <0 . 0 1)。H2 O2 诱导的淋巴细胞氧化损伤,4 .2 8mg (kg·d)组淋巴细胞氧化损伤明显低于其他4个组(P <0 . 0 1)。β- C各补充剂量组的O6 MeG的排出量在第6周和第8周时均明显低于缺乏组(P <0 . 0 5 )。O6 MeG排出量并未随着补充剂量的增加而减少,4 .2 8mg (kg·d)组尿中O6 MeG排出量在第8周时最低。结论 β- C较长时间缺乏可导致DNA自发损伤、H2 O2 诱导的氧化损伤以及烷化损伤均明显增加;大剂量β-C15 . 0mg (kg·d)补充对DNA损伤无明显防护作用,适量摄入β- C 4 . 2 8mg (kg·

MGMT和Ki-67在胶质母细胞瘤中的表达对ACNU化疗预后的影响

背景与目的:胶质母细胞瘤是预后极差的常见颅内恶性肿瘤,手术切除、放疗和化疗联合应用是常规治疗方法;Ki-67是肿瘤细胞生长活跃程度的标志,与胶质瘤的分级显著相关;O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)是一种DNA修复蛋白,其表达影响肿瘤对化疗药的敏感性。本研究通过免疫组织化学方法对胶质母细胞瘤的Ki-67和MGMT进行检测,探讨其对胶质母细胞瘤化疗预后的影响。方法:总结39例脑胶质母细胞瘤患者的性别、年龄、术前Karnofsky评分、生存时间等;将患者手术切除标本石蜡切片进行Ki-67和MGMT的免疫组织化学染色,计算细胞核染色阳性率;多元逐步回归分析法判断Ki-67和MGMT的表达与患者生存时间的关系。结果:本组病例男22例,女17例;年龄21～75岁,平均54.0岁;生存时间6～38个月,平均19.3个月,中位生存期17.0个月。Ki-67在所有标本有不同程度的表达,表现为胞核明显染色,Ki-67阳性率4.0%～26.6%,平均10.5%。MGMT除2例外均有不同程度表达,胞浆染色较淡,胞核可见浓染,MGMT胞核阳性率0%～51.4%,平均21.2%。Ki-67阳性率与生存时间无相关性。MGMT胞核阳性率与生存时间呈负相关(P=0.002)。结论:Ki-67在胶质母细胞瘤表达与肿瘤的预后无关。MGMT在胶质母细胞瘤表达与肿瘤化疗后的预后有关,MGMT的检测对胶质母细胞瘤术后化疗可能有指导意义。

DNA甲基转移酶活性对NNK α-亚甲基羟基化代谢的影响

为准确评价DNA甲基转移酶(DNMT)的活性对4-(甲基亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)通过α-亚甲基羟基化代谢途径产生O^6-甲基鸟嘌呤(O^6-mG)的影响,采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,分别对100 mg/kg NNK染毒后的生理盐水处理组、地西他滨处理组小鼠肝脏和肺中DNMT的活性、DNA甲基化程度,以及4-(3-吡啶基)-4-氧代丁酸(OPBA)、4-(3-吡啶基)-4-羟基丁酸(HPBA)和O^6-mG的质量分数进行了测定。结果表明:(1)地西他滨能够抑制DNA甲基转移酶活性,降低DNA甲基化水平。(2)地西他滨对NNK通过α-亚甲基羟基化代谢产生OPBA和HPBA的途径无显著影响。(3)抑制DNA甲基转移酶的活性,能减少NNK通过α-亚甲基羟基化代谢产生O^6-mG的量。

DNA修复基因O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在人群肺癌发生中的作用

目的 探讨DNA修复基因O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (O6 methylguanine DNAmethyltransferase ,hMGMT)在人群肺癌发生中的作用。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 15 0例肺癌组织、40例正常肺组织、5 0对肺癌病例和对照外周血单个核细胞中hMGMT基因mRNA的表达 ;用免疫组化检测p5 3、C MYC、K RAS基因表达 ;并分析有关暴露因素对修复基因hMGMT表达的影响 ,以及hMGMT基因与 p5 3、C MYC、K RAS等癌变相关基因的关系。 结果3 2 .7% ( 49 15 0 )的肺癌组织和 5 .0 % ( 2 40 )的正常肺组织存在hMGMT基因表达低下 ,hMGMT基因表达低下与肺癌发生的危险度OR值为 9.2 2 ( 2 .0 5～ 5 7.65 )。 2 0 .0 % ( 10 5 0 )的肺癌病人外周血和4% ( 2 5 0 )的正常人外周单个核细胞血细胞也可检出hMGMT基因表达低下。探讨影响hMGMT基因表达的各种暴露因素 ,发现吸烟可抑制hMGMT基因表达。另外发现 ,K RAS癌基因的过度表达与hMGMT表达低下有关 (P <0 .0 5 ) ;而 p5 3、C MYC基因的表达与hMGMT无关。结论 DNA修复基因hMGMT可能在肺癌发生中起着重要的作用 ,其表达低下是人群发生肺癌的危险因素之一 。

H3K36me3调控O^6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因与砷致人皮肤角质形成细胞DNA损伤的关系

目的了解亚砷酸钠（NaAsO2）对人皮肤角质形成细胞（HacaT细胞）组蛋白H3第36位赖氨酸三甲基化（H3K36me3）修饰水平、O^6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）基因mRNA转录水平的影响。探讨H3K36me3调控MGMT基因转录与砷致DNA损伤的关系，为砷中毒预防和治疗提供新思路和科学依据。方法1．25、2．50、5．00、10．00μmol／L NaAsO2处理HaCaT细胞24h，10．00μmol／L NaAsO2处理HaCaT细胞6、12、24h，剂量以0．00μmoL／L、时间以0h为对照组。采用单细胞凝胶电泳法检测HaCaT细胞DNA损伤情况；免疫印迹法检测H3K36me3总体修饰水平；实时荧光定量PCR检测MGMT基因mRNA表达水平：定量染色质免疫沉淀技术检测MGMT基因编码区（CHIP1、CHIP2区域）H3K36me3修饰水平。结果①DNA损伤检测结果：2．50、5．00、10．00μmol／L染砷组HaCaT细胞彗星尾部DNA百分含量（Tail DNA％。11．83±1．15、16．85±2．52、24．23±2．75）、彗星尾矩（Olive tail moment，OTM，10．90±1．13、16．19±2．26、23．83±2．79）明显高于对照组（0．00μmoL／L，2．40±0．51、2．26±0．40，P均〈0．05）；10．00μmoL／L NaAsO2处理HaCaT细胞12、24h，Tail DNA％（15．51±1．92、24．18±2．42）、OTM（13．58±2．04、23．14±2．11）明显高于对照组（0h，3．66±1．02、3．38±1．00，P均〈0．05）。②H3K36me3总体修饰水平检测结果：与对照组（0．00μmol/L，100．00±0．00）比较，2．50、5．00、10．00μmol／L染砷组H3K36me3总体修饰水平（60．59±9．75、57．82±11．28、39．45±7．09）降低（P均〈0．05）；与对照组（0h，100．00±0．00）比较，12、24h染砷组H3K36me3总体修饰水平（48．47±9．67、47．75±6．98）亦降低（P均〈0．05）。③不同剂量染砷组HacaT细胞H3K36me3总体修饰水平与Tail DNA％、OTM均呈负相关关系（r=-0．897、-0．903，P均〈0．05）。④MGMT基因mRNA表达水平检测结果：与对照组（0．00μmol／L，100．00±0．00）比较，2．50、5．00、10．00μmol／L染砷组MGMT基因mRNA表达水平（78．20±3．50、61．40±2．60、49．15±4．70）降低（P均〈0．05）。⑤MGMT基因编码区H3K36me3修饰水平检测结果：各剂量染砷组MGMT基因编码区CHIP1、CHIP2区域未观察到组蛋白H3K36me3的富集规律（P均〉0．05）。结论砷诱导的HaCaT细胞DNA损伤可能受H3K36me3的调控：砷可导致HaCaT细胞MGMT基因mRNA转录抑制，但H3K36me3调控MGMT基因mRNA转录抑制与砷致DNA损伤关系不密切。

不同剂量维生素A摄入对大鼠DNA损伤的影响

目的 探讨补充不同剂量维生素A(VA)对DNA氧化及烷化损伤的影响。方法 将Wistar大鼠随机分为 4组 ,分别为VA缺乏组 ,及补充VA11 4 3,4 2 86 ,14 2 86 μgRE(视黄醇当量 ) / (kg·d) 3个剂量组。干预时间为 8周。采用单细胞凝胶电泳法 (SCGE)分析比较不同组之间淋巴细胞DNA氧化损伤 ;用高效毛细管电泳法测定尿中O6-甲基鸟嘌呤 (O6-Methyl-guanine ,O6-MeG)的排出量。结果 DNA损伤分析显示VA缺乏组淋巴细胞DNA自发性损伤明显高于VA补充组 (P <0 0 1)。用H2 O2 诱导淋巴细胞氧化损伤时 ,4 2 86 μgRE/ (kg·d)组的淋巴细胞损伤最轻 (P <0 0 1)。缺乏组大鼠尿中的O6-MeG的排出量随缺乏时间的延长明显升高 (P <0 0 1)。 4 2 86 μgRE/ (kg·d)组O6-MeG的排出量无明显改变。 14 2 86 μgRE/ (kg·d)组至第 8周时 ,O6-MeG的排出量分别为VA缺乏组、11 4 3和 4 2 86 μgRE/ (kg·d)组的 1 38倍 (P <0 0 5 )、3 5 7倍 (P <0 0 1)和 11 75倍 (P <0 0 1)。 结论 较长时间VA缺乏可导致机体DNA自发性损伤、H2 O2 诱导的氧化损伤及DNA烷化损伤均明显增加 ;高剂量 14 2 86 μgRE/ (kg·d)VA补充对DNA损伤不但无防护作用 ,反而增加DNA损伤 ;适量摄入 4 2 86 μgRE/ (kg·d)的VA能有效地增强DNA抗氧化和?

大剂量维生素C对DNA氧化烷化损伤影响

目的观察大剂量摄入维生素C(VC)对DNA氧化损伤及烷化损伤的影响。方法以补充大剂量VC饲料给幼年Wistar大鼠,剂量分别为0,2 000,5 000,10 000mg/kg饲料,不添加VC作为对照组,干预时间为60 d。干预结束后,采用单细胞凝胶电泳法检测和评价淋巴细胞DNA自发损伤和H2O2诱导的氧化损伤;留取尿液用毛细管电泳法检测大鼠尿中O6-甲基鸟嘌呤(O6-methyl guanine,O6-MeG)含量。结果各组大鼠的DNA自发损伤差异无统计学意义(P>0.05)。10μmol/L的H2O2诱发DNA损伤时,随剂量增加,DNA损伤逐渐加重,对照组为59.060AU,2 000 mg/kg饲料剂量组为69.900AU,5000 mg/kg饲料剂量组为75.768AU,比对照组升高28%(P<0.05),10000 mg/kg饲料剂量组为79.655AU,比对照组升高49%(P<0.01)。各组O6-MeG的含量差异有统计学意义(P=0.01),10 000m g/kg饲料剂量组含量最高为2.434 mg/g肌酐,比对照组升高36%(P<0.05)。结论高剂量VC对DNA自发损伤没有影响,而对10μmol/L H2O2的诱导损伤,补充5 000 mg/kg饲料和10 000 mg/kg饲料的VC可加重DNA损伤。给大鼠补充10 000 mg/kg饲料的VC可导致DNA烷化损伤产物O6-MeG生成增多。

绞股蓝提取物对衰老大鼠DNA损伤的影响

背景与目的探讨绞股蓝提取物对衰老大鼠DNA氧化及烷化损伤的影响。材料与方法成年大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg构建衰老动物模型,同时设注射等量生理盐水的正常对照组。已建模的大鼠分为人工合成饲料中添加不同剂量的绞股蓝提取物(200、800、4000mg/kg饲料)及维生素E、C(VE+C)各组,8周后采血获取淋巴细胞,用单细胞凝胶电泳法检测淋巴细胞DNA自发损伤及H2O2诱导的氧化损伤;实验结束前1周留取大鼠24h尿液,通过毛细管电泳法检测大鼠尿中O6-甲基鸟嘌呤(O6-MeG)的含量。结果各组大鼠淋巴细胞DNA自发损伤无明显差异(P>0.05)。分别采用5、10和25μmol/LH2O2氧化时,绞股蓝各组及维生素E、C(VE+C)组DNA氧化损伤均明显低于衰老对照组(P<0.05),且绞股蓝800、4000mg/kg组DNA氧化损伤与正常对照组及VE+C组无显著性差别。衰老对照组尿中DNA烷化损伤代谢产物O-6MeG含量较其他各组偏高,但差别无统计学意义。结论D-半乳糖诱导衰老的大鼠模型DNA抗氧化损伤的能力降低,而DNA烷化损伤无明显改变;在本实验条件下,绞股蓝提取物可有效降低H2O2诱导的DNA氧化损伤,对DNA烷化损伤没有明显作用。

DNA修复酶MGMT的研究进展

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)是一种高效的DNA直接修复酶,能修复烷化剂所致的DNA损伤。该酶的结构、功能的异常与肿瘤的发生及特征都有密切关系。本文就近几年对DNA修复酶MGMT的研究和它在肿瘤诊断与治疗中的应用作一综述。

脑胶质瘤和正常脑组织中MGMT、LRP和TopoⅡα的表达及其意义

【目的】探讨脑胶质瘤和正常脑组织中三种耐药酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、肺癌耐药相关蛋白(LRP)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)的表达及其意义。【方法】利用两步法免疫组织化学技术检测MGMT、LRP、TopoⅡα三种耐药酶在脑胶质瘤和正常脑组织的表达。【结果】三种耐药酶在正常脑组织中几乎不表达;在脑胶质瘤中表达强度与患者的性别、年龄和肿瘤的大小无关(P>0.01),但与肿瘤的WHO分级明显相关(P<0.01)。WHO分级越高,表达越强。【结论】胶质瘤的发生与三种耐药酶的表达改变有关;联合测定多种耐药酶的表达对判定肿瘤的恶性程度与制定化疗方案有参考价值;纠正耐药蛋白的表达有可能成为胶质瘤基因治疗的新策略。

肺癌组织中MGMT蛋白的表达及其与吸烟的关系

目的检测肺癌组织中MGMT蛋白的表达,探讨其与患者吸烟及临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测62例肺癌组织、32例肺部良性病变和8例癌旁正常组织中MGMT蛋白的表达。结果MGMT蛋白在肺癌组织、肺部良性病变和癌旁正常肺组织中阳性表达率和表达评分分别为45·2%(28/62)、87·5%(28/32)、75%(6/8)和1·85±1·906、3·31±1·554、2·75±2·550,两项指标在3组间差异均有显著性(P值分别为0·000、0.002)。MGMT蛋白表达与患者病理类型、临床分期、年龄、性别、淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。正常肺组织、肺部良性病变和肺癌患者中吸烟组与非吸烟组的MGMT蛋白表达评分之间差异均有显著性(P<0·05),正常肺组织和肺癌中吸烟组与非吸烟组的MGMT蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0·05),而肺良性病变中差异无显著性(P>0·05)。结论肺组织中MGMT蛋白的表达与吸烟相关,但与患者病理类型、临床分期、年龄、性别和淋巴结转移无相关性。

替莫唑胺在恶性胶质瘤治疗方面的研究进展

恶性胶质瘤是常见的颅内原发性肿瘤,替莫唑胺(TMZ)是一种临床上用于治疗恶性神经胶质瘤的DNA-烷化剂药物。DNA修复蛋白O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O^(6)-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)的表观遗传沉默是TMZ治疗恶性胶质瘤的重要靶点,因此,对于缺乏MGMT启动子甲基化的肿瘤患者TMZ不能发挥有效的治疗效果。同时,研究表明通过基因治疗降低MGMT水平可显著增加TMZ的治疗作用,降低治疗抗性。因此,本研究对TMZ在恶性胶质瘤治疗的作用机制和化学抗性进行综述,以期为今后TMZ的临床应用提供理论依据。

MGMT基因沉默增强黑色素瘤细胞对替莫唑胺敏感性的研究

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因沉默对人黑色素瘤细胞替莫唑胺(TMZ)敏感性的影响。方法将前期构建的靶向MGMT基因特异性短发夹型RNA(shRNA)干扰载体转染人黑色素瘤A375细胞。根据转染质粒的不同及是否加药分组如下:对照组、TMZ组、阴性对照(NC)组、NC-TMZ组、MGMT干扰(MGMTi)组和MGMTi-TMZ(MGMT干扰联合TMZ)组。通过实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blotting和免疫荧光验证质粒载体的干扰效率,MTT法和流式细胞术检测TMZ处理24、48和72 h后A375细胞的增殖和凋亡情况。Western blotting和免疫荧光检测ATR、ATM和γ-H2AX水平以评价细胞DNA的损伤程度。结果转染MGMT shRNA干扰载体后,MGMTi组MGMT在mRNA和蛋白水平与对照组相比降低(P<0.05)。MTT、流式细胞仪、Western blotting和免疫荧光检测结果显示,MGMTi-TMZ组的细胞抑制率、凋亡率及ATR、ATM和γ-H2AX水平较其他组明显升高(P<0.05)。结论沉默MGMT基因的表达能够增强TMZ对A375细胞增殖的抑制作用并促进细胞凋亡,同时增强DNA损伤作用。通过沉默MGMT基因可以提高人黑色素瘤A375细胞对TMZ的敏感性。