O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因表达与胃癌发生的关系

目的研究人胃癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因的表达特点及其与胃癌发生的关系。方法应用加强型原位杂交方法及寡核苷酸探针高效标记技术对76例胃癌组织、73例癌旁组织、20例正常胃组织进行MGMT基因标记检测,同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果胃癌组织MGMT基因阳性表达率为40.8%(31/76),低于正常胃组织的60.0%(12/20),MGMT表达强阳性率为32.3%(10/31),也明显低于正常组织的83.3%(10/12),差异均有显著性意义(P<0.01或P<0.05);癌旁组织MGMT基因阳性表达率为46.6%(34/73),MG-MT表达强阳性率为41.1%(14/34),与胃癌组织差异无显著性意义。定量分析示,胃癌组织MGMT阳性表达的积分吸光度、阳性单位值明显低于正常组织(P<0.05)。胃癌组织与癌旁组织、早期胃癌与进展期胃癌组织、癌旁不同程度不典型增生之间MGMT表达无明显差异。结论人体胃组织存在高度表达的MGMT基因,胃癌发生与MGMT基因表达水平降低有关,MGMT基因异常表达是胃癌形态学改变出现之前的早期行为。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究DNA修复酶(O-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:乳腺癌和腺瘤标本共计143例,10%福尔马林固定,石蜡包埋,采用SABC免疫组织化学方法检测MGMT表达。结果:MGMT在乳腺癌和乳腺腺瘤中的阳性率分别为57.85%和13.64%,组间比较具有显著性差异。MGMT在乳腺癌中的表达与患者的年龄、淋巴结转移有关。结论:MGMT的异常表达与乳腺癌的淋巴结转移有关;MGMT可以作为判断乳癌发生和预后的重要指标;检测其表达可以指导临床上化疗方案的制定。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)位居恶性肿瘤的第4位,严重威胁着人类的健康.随着人们生活方式及饮食结构的改变,CRC的发生率呈逐年上升的趋势.CRC的发生机制包括:抑癌基因的失活、癌基因的激活及DNA修复机制的异常过度表达.O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)是一种DNA修复酶,他能通过去除鸟嘌呤O6位烷基基团来防止细胞DNA发生突变,并可以修复损伤的DNA.研究发现,该基因的甲基化与CRC的发生密切相关,近年来已成为研究的新热点.

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在子宫颈癌组织中表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测子宫颈癌组织中MGMT的表达。结果 60例子宫颈癌组织中MGMT的阳性表达率为93.33%,显著高于14例对照正常宫颈组织中阳性率42.8%,(P<0.05);子宫颈癌患者中,Ⅰ期与Ⅱ期的MGMT阳性率分别为100%、95.83%,显著高于Ⅲ-Ⅳ期的阳性率62.5%(P<0.01)。结论 MGMT的表达水平与宫颈组织癌变发展的进程相关,其在宫颈癌组织的高表达可为宫颈癌的诊断提供重要依据。

人类O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶蛋白的亚细胞荧光定位

目的:机体对烷化剂诱导基因突变的修复能力取决于细胞内O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶的含量及合成速度。构建人类O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因与增强型绿色荧光蛋白基因融合表达的载体,根据荧光分布确定其亚细胞定位。方法:实验于2006-12/2007-06在南阳医学高等专科学校生理学实验研究中心完成。参考人类O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶的基因序列和p-EGFP-N1载体的多克隆位点设计PCR扩增引物。从Hela细胞中提取总RNA,反转录合成O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶的cDNA,进而合成双链DNA。扩增后的DNA目的片段与p-EGFP-N1载体均行NheI和BamHI双酶切,回收,定量后用T4连接酶连接,产物转化大肠杆菌感受态细胞TOP10,挑选阳性克隆并提取质粒测序,构建成功的质粒绿色荧光蛋白位于O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶蛋白的C末端。将pEGFP-N1-MGMT载体分别转染HEK293和Hela细胞,荧光显微镜下与转染空载体pEGFP-N1的细胞进行对比观察,荧光信号表达最高点时进行固定并对细胞核进行复染,观察亚细胞定位情况,同时免疫印迹分析蛋白的表达。结果:①RT-PCR检测:扩增的O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因cDNA片段约为650bp,与预期相符。②克隆及序列鉴定:扩增的DNA片段与载体pEGFP-N1经过NheI和BamHI双酶切后,可连接得到重组的表达载体,命名为pEGFP-N1-MGMT。重组质粒的酶切产物有650bp,4700bp两条带,克隆结果正确。该质粒经测序确认正确。③免疫印迹分析:转染pEGFP-N1质粒的细胞表达增强型绿色荧光蛋白,相对分子质量约为27000;转染pEGFP-N1-MGMT融合蛋白质粒的细胞相对分子质量约为49000,证明目的蛋白在转染细胞内表达成融合蛋白。④亚细胞定位:转染pEGFP-N1质粒的细胞绿色荧光信号均匀分布于整个细胞。转染pEGFP-N1-MGMT质粒的细胞绿色荧光主要集中在胞质,特别在一定条件下核周围有颗粒样聚集。结论:①实验成功构建pEGFP-N1-MGMT融合蛋白质粒。②人类O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因定位在胞浆,且在一定条件下可以在核周聚集。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶与肿瘤预见性化疗新策略

克服肿瘤细胞的耐药性是化疗需要解决的重大课题.本项目通过分析20株中国人肿瘤细胞中O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(简写MGMT)的活性与对烷化剂亚硝脲耐药性的关系的实验;通过使用亚硝脲药物治疗移植高和低MGMT肿瘤细胞的荷瘤裸鼠实验;通过向对烷化剂亚硝脲敏感、耐药的细胞分别转导MGMT cDNA以及MGMT反义RNA的实验;证明肿瘤细胞中的MGMT水平决定了细胞对烷化剂、亚硝脲类药物的耐药性,MGMT高的肿瘤细胞耐药,MGMT低的细胞敏感.通过细胞和裸鼠实验证明链脲菌素(Streptozotocin,简写STZ)或O6-苄基鸟嘌呤(简写O6-BG)可以降低细胞内的MGMT活性,克服细胞对烷化剂亚硝脲的耐药性.在研究工作的基础上,我们提出了肿瘤预见性个体化化疗的新策略,即对MGMT低的肿瘤直接使用烷化剂亚硝脲化疗,对MGMT高的肿瘤首先使用链脲菌素降低MGMT酶活性,然后使用烷化剂亚硝脲化疗.

非小细胞肺癌患者组织MutS同种组织蛋白2、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织MutS同种组织蛋白2(MSH2)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达情况及与临床病理参数、预后的关系。方法2021年7月至2022年7月我院收治的96例NSCLC患者,取其手术切除的NSCLC组织标本(NSCLC组)及距癌边缘3 cm处的癌旁正常组织(对照组)。检测两组MSH2和MGMT的表达水平,分析MSH2和MGMT表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。结果与对照组比较,NSCLC组MSH2和MGMT阳性率更低(P<0.05);MSH2阳性与患者分化程度有关(P<0.05);MGMT阳性与患者吸烟史和分化程度有关(P<0.05);与MSH2和MGMT阴性患者比较,阳性患者1年生存率均更高(P<0.05)。结论MSH2和MGMT均在NSCLC组织中存在较低表达,其表达水平与临床病理参数、预后密切相关。

基于MRI的神经网络模型预测胶质母细胞瘤O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶启动子状态

目的基于神经网络模型使用术前常规模态磁共振图像预测胶质母细胞瘤O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化状态。方法回顾性分析兰州大学第二医院经手术病理证实的129例胶质母细胞瘤患者的T2WI序列和T1WI对比增强序列的磁共振图像,其中MGMT甲基化患者66例,MGMT非甲基化患者63例。基于EfficientNet卷积神经网络分别构建T2-net、T1C-net及两种序列联合的TS-net,通过受试者工作特征(ROC)曲线、曲线下面积(AUC)敏感度、准确度及特异度评价模型预测效能。结果TS-net在训练和验证数据集的AUC分别为0.944和0.838,T1C-net模型的AUC分别为0.951和0.830,T2-net的AUC分别为0.929和0.781。结论基于磁共振常规序列图像训练深度学习模型可有效预测胶质母细胞瘤患者的MGMT甲基化状态,帮助制定进一步治疗计划。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、SFN基因启动子区甲基化异常与皮肤鳞癌关系的研究

目的探讨O^6_甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（MGMT）、SFN基因启动子区甲基化异常与皮肤鳞癌发生的关系及临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测40例皮肤鳞癌和20例正常皮肤组织中MGMT、SFN两组基因甲基化状态及mRNA的表达。结果鳞癌组织中的MGMT、SFN基因启动子附近甲基化频率分别为42．5％、35．0％，明显高于正常皮肤组织的10．0％和5．0％，差异有统计学意义（P〈0．05），而鳞癌组织中MGMT和SFN的mRNA表达则低于正常皮肤组织（P〈0．05）。结论皮肤鳞癌组织中MGMT、SFN基因启动子区附近高甲基化与该肿瘤的发生密切相关。

p53、O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在老年脑胶质瘤患者中的表达及其与预后的相关性分析

目的探究p53、O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在老年脑胶质瘤患者中的表达及其与预后的相关性。方法选取2019年8月至2022年6月新疆喀什地区第二人民医院收治的49例老年脑胶质瘤患者的组织标本为试验组,另选取新疆喀什地区第二人民医院同期收治的35例高血压性脑出血患者的正常脑组织标本为对照组。根据WHO分级将老年脑胶质瘤患者分为Ⅰ/Ⅱ级老年脑胶质瘤组(21例)和Ⅲ/Ⅳ级老年脑胶质瘤组(28例)。根据预后不同将老年脑胶质瘤患者分为预后不良组(27例)和预后良好组(22例)。比较分析对照组与试验组患者的p53、MGMT阳性表达率,不同级别老年脑胶质瘤患者的p53、MGMT阳性表达率,不同预后老年脑胶质瘤患者的p53、MGMT阳性表达率。分析p53、MGMT阳性表达率与老年脑胶质瘤患者临床病理特征的关系以及p53、MGMT阳性表达率与老年脑胶质瘤患者预后的相关性。采用受试者工作特征曲线分析p53、MGMT阳性表达率对老年脑胶质瘤患者预后不良的预测价值。结果试验组患者的p53、MGMT阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ级老年脑胶质瘤组患者的p53、MGMT阳性表达率均显著高于Ⅰ/Ⅱ级老年脑胶质瘤组(P<0.05)。预后不良组患者的p53、MGMT阳性表达率均显著高于预后良好组(P<0.05)。p53、MGMT阳性表达率与老年脑胶质瘤患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置等临床病理特征无关(P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,p53、MGMT阳性表达率均与老年脑胶质瘤患者的预后呈显著负相关(r=-0.575,P=0.001;r=-0.528,P=0.001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清p53、MGMT阳性表达率联合指标预测老年脑胶质瘤患者预后不良的曲线下面积为0.912,显著高于p53阳性表达率(曲线下面积为0.734)和MGMT阳性表达率(曲线下面积为0.788)单一指标(P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中的p53、MGMT阳性表达率明显升高,与肿瘤分级、预后显著相关,且对老年脑胶质瘤患者的预后不良具有一定预测价值。

异柠檬酸脱氢酶-1突变与O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶启动子甲基化在高级别胶质瘤中表达相关性及对预后影响研究

目的探讨异柠檬酸脱氢酶-1(IDH1)突变与O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲级转移酶(MGMT)启动子甲基化在高级别胶质瘤中表达相关性及对预后的影响。方法收集2008-2014年沈阳军区总医院神经外科收治的107例高级别(Ⅲ~Ⅳ级)胶质瘤患者的肿瘤与血液标本,所有患者均接受放疗和/或化疗。PCR检测IDH1突变与MGMT启动子甲基化,Spearman分析其表达相关性及对患者预后的影响。结果 107例患者中,16例发生IDH1突变,突变率为15.0%(16/107),均为R132H型突变;MGMT启动子甲基化阳性率为50.5%(54/107);IDH1突变与MGMT启动子甲基化在高级别胶质瘤中表达具有相关性(r=0.258,P<0.05);随访18个月,发生IDH1突变与MGMT启动子甲基化的患者存活率高、预后较好(P<0.05)。结论 IDH1可判断胶质瘤的恶性程度,MGMT可作为化疗的重要参考指标。IDH1突变与MGMT启动子甲基化具有相关性且可改善胶质瘤患者预后。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶启动子甲基化与表皮生长因子受体基因表达对胶质母细胞瘤预后影响研究

目的探讨O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化与表皮生长因子受体(EGFR)基因表达对胶质母细胞瘤患者预后的影响。方法收集葫芦岛中心医院和医联体医院神经外科研究所2010-2015年收治的57例胶质母细胞瘤患者的胶质母细胞瘤标本,对肿瘤标本进行基因检测;随访12个月,观察患者预后情况。结果57例患者中,MGMT启动子甲基化阳性者24例(42.1%),阴性者33例(57.9%);EGFR基因表达阳性者49例(86.0%),阴性者8例(14.0%)。12个月后,24例MGMT启动子甲基化阳性者中,15例存活,存活率为62.5%(15/24),33例阴性者中,11例存活,存活率为33.3%(11/33),差异有统计学意义(P<0.05);49例EGFR基因表达阳性者中,20例存活,存活率为40.8%(20/49),8例阴性者中,6例存活,存活率为75.0%(6/8),差异有统计学意义(P<0.05)。结论MGMT启动子甲基化与EGFR基因表达影响胶质母细胞瘤患者预后,可作为预后判断的参考指标。

潮汕地区食管癌患者O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性的分析

背景与目的初步研究中国食管癌高发区之一潮汕地区食管癌患者和正常人群O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因编码84、143及160位密码子的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)。材料与方法应用双色荧光杂交微阵列技术分别检测潮汕地区100例食管鳞状细胞癌患者及65例健康对照外周血MGMT基因84位密码子(C2740214T)单核苷酸多态性;用同样的方法检测76例食管鳞状细胞癌患者和50例健康对照MGMT基因143位密码子(A2798995G)、160位密码子(G2799046A)单核苷酸多态性。结果基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。统计分析显示食管鳞状细胞癌组与对照组84位密码子2740214C和2740214T等位基因频率差异无统计学意义(P=0.402),2740214CT基因型在病例组和对照组中所占的比例分别为16%和12.3%,2740214TT基因型在病例组中所占的比例是2%。食管鳞状细胞癌组变异基因型拥有者(CT+TT)高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.327),2740214TT基因型仅见于个别肿瘤患者,而在正常对照中未发现。143位密码子A2798995G位点仅在对照组中发现一例杂合子,其余均为野生型纯合子,病例组与对照组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义。160位密码子G2799046A位点检测在所有的病人和对照中均为野生型纯合子。结论潮汕地区食管鳞状细胞癌患者和正常人群中存在MGMT基因多态性,84位密码子C2740214T位点的突变型纯合子仅见于肿瘤患者,可能与食管鳞状细胞癌有关。

O^6-甲基鸟嘌呤DNA转移酶在神经胶质瘤中的表达及其与亚硝脲耐药的关系

目的 :探讨O6 甲基鸟嘌呤DNA转移酶 (MGMT)在人脑神经胶质瘤中的表达情况及其与亚硝脲耐药之间的关系。方法 :采用免疫组化法对人脑神经胶质瘤石蜡标本中MGMT进行了检测 ,并与临床应用亚硝脲的疗效评价结果进行了比较。结果 :116例神经胶质瘤中MGMT阳性表达率为 6 7.2 %。MGMT阳性表达率最高者为髓母细胞瘤 (10 0 % ) ,表达率最低者为少枝胶质细胞瘤 (35 .7% )。在使用亚硝脲治疗的患者中 ,MGMT阳性表达与亚硝脲化疗效果呈显著负相关 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞的耐药程度与MGMT表达强度无关 ,只与其是否阳性有关。结论 :不同病理类型的神经胶质瘤对亚硝脲的耐药和敏感性明显不同。化疗前检测神经胶质瘤MGMT的表达情况 ,对预测化疗敏感性、指导临床使用亚硝脲化疗具有重要意义。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在大肠癌中的表达及意义

目的:检测大肠癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)的表达情况及其在肿瘤发生发展中的作用和临床意义。方法:采用SABC免疫组化法检测79例大肠癌标本中MGMT的表达情况。结果:大肠癌中MGMT阳性率为53.16%(42/79),其阳性表达与性别、癌细胞浸润深度无关(P>0.05),与患者年龄、淋巴结转移情况有关(P<0.05)。结论:检测MGMT的表达情况对于大肠癌恶性程度的判断及临床化疗方案的制定具有指导作用。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶与肿瘤

DNA修复酶O6 -甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT)是机体修复烷基加合物的关键酶。该酶结构与功能异常与肿瘤发生、发现、有效治疗及肿瘤耐药性等方面都有着密切的联系 ,本文综述了近年来的研究进展。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在脑胶质瘤的表达及其临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑胶质瘤细胞中的表达及其与患者生存时间的关系,以判断患者的预后,并指导胶质瘤术后化学治疗药物的合理选择。方法选取手术切除的59例脑胶质瘤标本,经10%甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋;每例标本以5μm厚度连续切片,作HE染色确定病理组织类型;对患者的生存期进行调查;用免疫组化EnVision法检测脑胶质瘤细胞中MGMT的表达情况;免疫反应染色结果按照Krajewska法进行半定量分析;所有统计分析用SPSS17.0统计软件进行,采用卡方检验以及将MGMT表达与患者生存期绘制成Kaplan-Meier生存曲线,并进行log-rank检验和分析。结果 MGMT在脑胶质瘤的表达存在异质性;MGMT在不同病理级别的脑胶质瘤细胞中表达阳性率不同,差异无统计学意义(P>0.05);MGMT表达阳性患者生存时间低于表达阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MGMT在脑胶质瘤的表达与肿瘤病理级别无关,MGMT的表达可作为判断预后的指标。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在食管癌患者的表达及临床意义

目的探讨DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在老年食管癌患者的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测57例食管癌标本和20例正常食管组织中MGMT的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果MGMT在食管癌表达的阳性率(49.1%)明显低于正常组织(85.0%,P<0.01)。侵及外膜层、有淋巴结转移、Ⅲ+Ⅳ期的食管癌患者MGMT阳性率明显低于未侵及外膜层、无淋巴结转移、Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05)。MGMT在食管癌表达的阳性率在年龄、性别、分化程度、肿瘤部位组间无明显差异(P>0.05)。结论MGMT在食管癌的表达与浸润深度、淋巴结转移和临床分期有关,可作为判断食管癌预后的指标。

乳腺癌组织中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的表达

采用原位杂交方法检测30例乳腺癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达水平。结果显示,MGMT阳性率为93.4%(28/30),其中高表达28.6%(8/28),中、低表达71.4%(20/28)。乳腺癌组织MGMT的表达与临床分期无关。