O^6-苄基鸟嘌呤增强BCNU体外和体内抗肿瘤作用的研究

探讨Ｏ６－苄基鸟嘌呤（Ｏ６－ＢＧ）对Ｏ６－烷基鸟嘌呤－ＤＮＡ烷基转移酶（Ｏ６－ＡＧＴ）阳性（或ｍｅｒ＋）的人胃癌细胞ＢＧＣ－８２３和人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１对ＢＣＮＵ细胞毒作用敏感性的影响及其与ＢＣＮＵ合用治疗移植瘤的协同效果。方法：应用ＭＴＴ试验检测Ｏ６－ＢＧ与ＢＣＮＵ合用的细胞毒作用，转移酶活性用从３Ｈ－甲基ＤＮＡ底物转移的Ｏ６－［３Ｈ］甲基鸟嘌呤数表示。结果：１．５～６．０ｍｇ·Ｌ－１的Ｏ６－ＢＧ预先作用２ｈ后，ＢＧＣ－８２３和ＳＭＭＣ－７７２１细胞对ＢＣＮＵ的敏感性明显增加；０．７５～６．０ｍｇ·Ｌ－１的Ｏ６－ＢＧ可完全快速地抑制两种肿瘤细胞的转移酶活性并持续１２ｈ；腹腔注射９０ｍｇ·ｋｇ－１的Ｏ６－ＢＧ预处理２ｈ后给予２５ｍｇ·ｋｇ－１的ＢＣＮＵ治疗，可使动物皮下接种的人胃癌移植瘤生长延迟３８．６ｄ以及人肝癌移植瘤生长延迟３８．７ｄ，并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性。结论为Ｏ６－ＢＧ与ＢＣＮＵ合用于ｍｅｒ＋的肿瘤具有明显的治疗效果。

以DNA修复蛋白AGT为靶向的PET显像剂前体O^6-苄基鸟嘌呤类似物的体外初步生物评价(英文)

合成一系列O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)类似物,并且采用MTT法评价其体外对DNA修复蛋白AGT的抑制作用,探讨其作为潜在的正电子发射断层成像技术(PET)显像剂前体的可能性。以鸟嘌呤作为起始原料分别合成了O6-BG及其类似物HMBG,MOBG,MOMOBG,BABP和PEG。采用MTT方法,通过测定合成产物增强HeLa细胞对1,3-双(2-氯乙基)亚硝基脲(BCNU)药物敏感性的强弱来评价其对AGT的抑制作用。合成产物对AGT抑制活性强弱排序为HMBG≥O6-BG≥MOBG≥MOMBG,而BABP和PEG基本未表现出任何的AGT抑制活性。HMBG,MOBG和MOMBG具有良好的体外活性,其正电子核素标记物可能成为有前景的用于肿瘤AGT显像的PET显像剂。

O^6-苄基鸟嘌呤逆转人脑胶质瘤对BCNU耐药性的研究

目的 探讨提高BCNU为代表的CENUs对Mer +脑胶质瘤化疗疗效的途径。方法 采用MTT法及测定肿瘤生长观察O6 苄基鸟嘌呤 (O6 BG)预处理Mer+人脑胶质瘤细胞及荷Mer+脑胶质瘤裸小鼠对BCNU疗效的影响。结果 O6 BG能提高BCNU对Mer +胶质瘤细胞T98G的敏感性 2 2倍 ,对Mer 细胞SHG 4 4无增敏作用 ,10 μmol/LO6 BG预处理 2小时即能明显抑制MGMT活性 ,≥5 0 μmol/L时能完全抑制MGMT活性 ;O6 BG毒性极低 ,10 0 μmol/L时细胞生存率 >95 %。O6 BG +BCNU组较空白对照组延缓肿瘤生长 34 16天 ,而单纯BCNU组延缓生长 18天 (P <0 0 1) ,且O6 BG +BCNU组中还见到肿瘤暂时性退缩。结论 O6 BG通过抑制MGMT活性 ,能逆转Mer+人脑胶质瘤细胞对BCNU的耐药性 ,提高BCNU疗效 。

N-(2-氯乙基)-N'-2-(O^6-苄基-9-鸟嘌呤基)乙基-N-亚硝基脲的合成

以O^6-苄基鸟嘌呤为原料,经取代反应和盖布瑞尔反应制得N9-(2-胺基)乙基-O6-苄基鸟嘌呤(4);4与异氰酸酯经取代反应和经亚硝化反应合成了N-(2-氯乙基)-N'-2-(O6-苄基-9-鸟嘌呤基)乙基-N-亚硝基脲(6)。4和6为新化合物,其结构经UV-Vis,1H NMR,13C NMR,IR和HR-ESI-MS表征。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶与肿瘤预见性化疗新策略

克服肿瘤细胞的耐药性是化疗需要解决的重大课题.本项目通过分析20株中国人肿瘤细胞中O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(简写MGMT)的活性与对烷化剂亚硝脲耐药性的关系的实验;通过使用亚硝脲药物治疗移植高和低MGMT肿瘤细胞的荷瘤裸鼠实验;通过向对烷化剂亚硝脲敏感、耐药的细胞分别转导MGMT cDNA以及MGMT反义RNA的实验;证明肿瘤细胞中的MGMT水平决定了细胞对烷化剂、亚硝脲类药物的耐药性,MGMT高的肿瘤细胞耐药,MGMT低的细胞敏感.通过细胞和裸鼠实验证明链脲菌素(Streptozotocin,简写STZ)或O6-苄基鸟嘌呤(简写O6-BG)可以降低细胞内的MGMT活性,克服细胞对烷化剂亚硝脲的耐药性.在研究工作的基础上,我们提出了肿瘤预见性个体化化疗的新策略,即对MGMT低的肿瘤直接使用烷化剂亚硝脲化疗,对MGMT高的肿瘤首先使用链脲菌素降低MGMT酶活性,然后使用烷化剂亚硝脲化疗.

O^(6)-苄基鸟嘌呤增强1,3-二(2-氯乙基)-亚硝基脲对人肝癌细胞及其移植瘤的抗肿瘤作用(英文)

应用噻唑蓝 (MTT)法检测 O6-苄基鸟嘌呤(O6- BG)与 1 ,3-二 (2 -氯乙基 ) -亚硝基脲 (BCNU)合用的细胞毒作用及透射电镜检测凋亡细胞的方法研究了 O6- BG对 O6-烷基鸟嘌呤 - DNA烷基转移酶(O6- AGT )阳性的人肝癌细胞 SMMC- 772 1对BCNU细胞毒作用敏感性的影响及其与 BCNU合用治疗移植瘤的协同效果 .结果显示 :1 .5- 6.0 mg· L-1的 O6- BG预先作用 2 h后 ,SMMC- 772 1细胞对 BCNU的敏感性明显增加 ;0 .75- 6.0 mg· L-1的 O6- BG可完全快速地抑制肿瘤细胞的 AGT活性并持续 1 2 h;ip 90 mg· kg-1的 O6- BG预处理 2 h后给予 2 5mg·kg-1的 BCNU治疗 ,可使动物 sc接种的人肝癌移植瘤生长延迟 38.6d,诱导肿瘤细胞凋亡 ,并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性 .说明 O6- BG与 BCNU合用于