EDTA修复后金胺O染色提高石蜡组织切片结核分枝杆菌的检出率

结核病组织切片采用Ziehl-Neelsen抗酸染色,结核分枝杆菌阳性率为31%～50．1%[1-3],金胺 O 荧光染色为40．5%～65．7%[4,5],荧光定量 PCR 检测法为50%～75．8%[6-8]。虽然荧光定量 PCR检测法阳性率较高,但抗酸染色和金胺O染色法更简便易行,结果直观可靠,因此仍常用于日常诊断工作中[9]。有学者指出,10%中性福尔马林固定会降低组织切片中结核分枝杆菌的检出率,可能与福尔马林固定导致组织中蛋白交联有关[10,11]。已知抗原修复法能打开福尔马林固定的组织蛋白交联,显著提高免疫组化染色的阳性率[12]。作者设想,采用抗原修复法也许能提高组织切片中抗酸染色或金胺O染色的结核分枝杆菌检出率。为检验这一设想的可行性,本实验采用EDTA预修复后再行金胺O染色（简称EDTA-金胺O染色）,对福尔马林固定、石蜡包埋的结核病组织切片进行染色,并将其阳性率与传统金胺O染色法和抗酸染色进行对比。

冷冻切片结合油红O染色在动脉粥样硬化小鼠模型中的应用

主动脉瓣膜硬化是动脉粥样硬化的标志[1],因此在动脉粥样硬化模型研究中需要通过适当的方法和技术展示小鼠动脉粥样硬化模型的心脏主动脉瓣的含脂量,包括含脂泡沫细胞及其组成的粥样斑块,来判断其粥样化程度。石蜡切片和常规HE染色由于使用乙醇脱水,二甲苯透明,脂质脱失,使得含脂泡沫细胞变成空泡,不利于表现粥样斑块。

油红O染色在斑马鱼体内脂质染色中的应用

目的探索油红O在斑马鱼体内脂质染色中的技术方法。方法取受精后4d的斑马鱼幼鱼,4%多聚甲醛固定12h后,用油红0工作液对整鱼进行染色,比较不同的染色时间及不同的染料浓度对油红O染色效果的影响。结果斑马鱼脑组织、卵黄囊、鱼鳔及血管内的脂质被油红O染色。油红0液浓度0.3%、染色时间3h时斑马鱼整鱼油红O染色效果较好。结论油红O可对斑马鱼体内的脂质进行染色,可用于斑马鱼脂代谢研究。

介绍一种新型高效的油红O染色法

油红染料对脂肪变性、脂质沉积的组织器官有良好的溶脂及吸附作用，它具有操作简便、色彩鲜亮等特点，优于苏丹III染液，被广泛运用于临床和科研病理工作中。针式滤膜过滤器原用于过滤色谱分析样品及流动相，对色谱柱的保护、防止进样阀和输液泵管系统被污染等具有较好的作用，广泛应用于无菌实验、胶体分离及质量与微量分析。

油红O染色法在2D和3D细胞培养原代胰腺星形细胞鉴定中的应用

目的通过油红O染色分别在2D和3D细胞培养中观察及鉴定活化和去活化的原代胰腺星形细胞(PSCs)。方法使用爬出法从新鲜胰腺癌组织中培养原代PSCs,2D培养于普通细胞培养板中进行,3D培养在Matrigel基质胶中进行。使用全反式维甲酸(ATRA)连续处理PSCs 7天,获得去活化PSCs。使用油红O法分别对2D培养和3D培养的活化和去活化PSCs进行染色。结果在2D培养中,未处理的PSCs呈活化状态,星芒状,胞质几乎无油红O着色;ATRA处理的PSCs处于去活化状态,呈椭圆形或多角形,胞质中可见较多橘红色颗粒着色。在3D培养中,Matrigel胶滴呈半球形,胶滴中的PSCs为椭圆形,PSCs未经ATRA处理胞质中即有较多橘红色颗粒,维持去活化状态。结论油红O染色可以在2D和3D细胞培养中鉴定原代PSCs的活化和去活化状态,且PSCs在3D环境中生长可维持去活化状态。

吖啶橙一金胺O染色法临床应用研究

对结核杆菌采用吖啶橙——金胺O染色法．可把活菌染成绿色，死菌染成红色。对50例痰阳肺结核病入抗痨治疗对应用吖啶橙——金胺O染色观察痰菌的染色情况，并与常规痰培养、病人症状悻征改变、X线影像学变化同步观察对比，结果显示痰涂片结核菌染色与临床疗效基本一致。表明该染色法对于快速判断肺结核病的临床治疗效果具有较高应用价值。

脂蛋白肾病肾脏组织油红O染色方法改良

脂蛋白肾病是一种罕见的由ApoE基因突变引起的常染色体隐性遗传疾病。ApoE为低密度脂蛋白受体,其突变不仅可引起血清中β脂蛋白前体、β脂蛋白和ApoE升高,还可导致Ⅲ型高脂血症,而Ⅲ型高脂血症患者的肾小球损伤病理改变与脂蛋白肾病相同[1-2]。该病突出表现为肾小球毛细血管腔内脂质沉积,肾小球毛细血管腔内的脂蛋白栓在经10%中性福尔马林固定、石蜡切片,仅在PAS染色下有淡染色,确诊脂蛋白肾病需冷冻组织油红O或苏丹红染色阳性,该阳性物质为脂蛋白[3-4]。

油红O染色鉴定新生儿乳汁吸入性窒息死亡1例

1案例1.1简要案情某年8月4日,某男婴出生于某妇幼保健医院,孕期38+4周,出生体质量2 425 g,顺产,Apgar评分9~10分,7日出院,出院时各项指标正常。当月8日下午,母乳喂奶1次,当日22:00许,母亲发现孩子呼之不应,后抢救无效死亡。1.2尸体检验尸表检查:体质量2 179 g,尸长51 cm,坐高30 cm,皮肤颜色暗红,毛发浓密。口唇及双手指甲床发绀,口、鼻腔见淡黄色稠状液体,体表皮肤未见明显损伤。

油红O染色在甲醛固定的乳腺富于脂质癌中的实践应用

在临床病理诊断中,常规HE切片中常可见到胞质透亮或胞质内有许多大小不等的圆形空泡,此现象是水泡样变、黏液样物质、脂肪或脂质组织,还是溶解了的糖原,往往不易区分,这就要依赖于脂肪染色、黏液染色、糖原染色等来鉴别。黏液染色和糖原染色可用石蜡包埋后切片染色即可,而脂肪染色不能用常规石蜡包埋组织切片。日常病理诊断工作中,很多标本可能未行冷冻或者在冷冻时未考虑脂肪染色的问题,但在常规HE染色切片观察时却要考虑或验证其脂质或脂肪成分。为弥补新鲜冷冻时未行脂肪染色,本文收集1例已明确诊断为乳腺富于脂质癌的剩余标本,用甲醛固定后的标本来制作冷冻切片进行油红O脂肪染色,并记录甲醛固定30天内的标本中脂肪染色情况。

染色法构建对超临界CO 2 提取沙棘籽油的过程分析

在沙棘籽油提取过程中,经粉碎干燥后的籽料颗粒是一种开放体系,脂滴以游离形式存在,采用油红O(Oil Red O,ORO)对其进行染色时,常规方法一次性滴加染液的方式以及后续的洗脱步骤均会导致脂滴迁移、过染等问题出现。研究构建了逐级染色法,采用少量多次滴加染液的方式,并优化了染色间隔时间为1.5 min,染色级数和染液浓度可根据样品的实际油含量进行调整,因而能够客观地显影脂滴在籽料颗粒内的分布状态。以此构建的面积占比法可用于精确测定籽料中的油脂含量,其准确度与萃取质量法相当,两者的相关系数为0.998,并具有较高重现性,相对标准偏差约为2.49%。

金胺O荧光染色检测石蜡切片中偶发分枝杆菌的体会

非结核分枝杆菌（non-tuberculous mycobacteria,NTM）是指结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌,多存在于环境中,为条件致病菌,可引起结核样病变。目前已知100余种致病性非结核分枝杆菌,常见的有20种左右,如胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、戈登分枝杆菌等。

金胺“O”荧光染色法与萋—尼染色法在肺结核细菌学检验中的准确性

目的:分析金胺“O”荧光染色法与萋—尼染色法在肺结核细菌学检验中的准确性。方法:选取在2018年1月—2022年10月期间预进行肺结核病筛查的痰标本360份,将采集的痰液标本进行镜检涂片,分别采用金胺“O”荧光染色法与萋—尼染色法,以L-J法检测结果为金标准,比较两种染色法检出率,分析两者检验的诊断效能,测定两种染色法检验耗费时间。结果:金胺“O”荧光染色法检测肺结核的敏感度、特异度、准确性、阳性预测值及阴性预测值均高于萋—尼染色法(P<0.05)。金胺“O”荧光染色法对抗酸杆菌阳性检出率高于萋—尼染色法(P<0.05)。金胺“O”荧光染色法检验耗费时间明显短于萋—尼染色法(P<0.05)。结论:与萋—尼染色法相比,金胺“O”荧光染色法可提高肺结核分枝杆菌阳性检出率,操作简单、方便,值得应用。

两种髓鞘染色方法在Cuprizone诱导脱髓鞘小鼠模型中的比较

目的比较2种神经髓鞘染色方法在Cuprizone小鼠模型脑组织中脱髓鞘的形态学变化,为实验诊断提供病理依据。方法将Cuprizone掺入饲料中喂食小鼠4周,造成神经脱髓鞘模型。取脑后切片,分别用牢固蓝(Luxol Fast Blue)和油红O两种染色方法观察脑纹状体和海马两个切面胼胝体髓鞘脱失变化。结果牢固蓝和油红O两种染色方法均可显示Cuprizone模型小鼠脑内胼胝体部位有脱髓鞘发生,但在纹状体切面油红O染色法能清晰显示髓鞘脱失和炎性细胞浸润,而牢固蓝染色法显示髓鞘脱失与周围组织结构界限不明显。结论与牢固蓝染色法相比,油红O染色法能更清晰显示脱髓鞘,颜色对比明显,是一种简单易行的神经髓鞘染色方法。

金胺O荧光染色在结核病病理诊断中的应用价值

近年来结核病的发病率呈上升趋势，临床上结核病的诊断主要依靠病理组织学结果及抗酸染色法（Ziehl—Neelsen染色法）加以确诊。抗酸染色法是一种特异性高且长期用于结核病病原学诊断的经典方法，但其镜检时间较长，敏感性低，无法满足目前临床诊断的需求。为了提供结核抗酸杆菌感染的证据，福建医科大学附属漳州市医院病理科采用金胺O荧光染色法应用于病理组织切片，并以抗酸染色以及血清学结核抗体金标法为对照。

金胺O荧光染色在石蜡组织切片麻风病诊断中的应用

目的为了验证金胺O荧光染色法应用于石蜡组织切片麻风杆菌检测的可行性。方法用金胺O荧光法对6例确诊为麻风病的病理组织切片进行染色,并与抗酸染色结果进行对比。结果荧光染色法6例结果均为阳性,在暗背景下麻风杆菌显示明亮淡绿色荧光;在菌量较少荧光染色片中寻找单根麻风杆菌,较抗酸染色片更为容易。结论金胺O荧光染色法可用于石蜡组织切片麻风病的诊断,麻风杆菌单根散在时比抗酸染色法有一定优势。

金胺O荧光染色与抗酸染色用于石蜡包埋组织结核杆菌检测的对比分析

目的比较金胺O荧光染色法与抗酸染色法在石蜡包埋组织中结核杆菌检测的差异。方法收集病理诊断为结核病或符合结核的石蜡包埋组织121例,每1例样本连续切片,同时采用金胺O荧光染色法和抗酸染色法进行检测。结果荧光染色组83例阳性,阳性率为68.60%,抗酸染色组45例阳性,阳性率为37.19%,对每1例标本两种染色的结果进行配对t检验,结果有非常显著性差异(P<0.01)。结论金胺O荧光染色法阳性检出率高于抗酸染色,尤其是在那些含菌量少的标本。

斑马鱼肝脏组织油红O染色方法比较优化

目的通过设置不同染色步骤、条件,探索适合处理斑马鱼肝脏的冷冻切片油红O染色方法。方法取3月龄斑马鱼肝脏OCT样品,设置6、8、10、12μm四种不同厚度切片各两片,其他各组切片厚度均为8μm,采用不同的处理方法处理两张切片。染色后置于显微镜下观察视野内组织完整度、背景情况、橘红色脂滴的染色面积、位置以及深染的细胞和位置形态。结果以4%多聚甲醛固定、10%~30%蔗糖梯度脱水,切片厚度设置8~10μm,室温晾干1 h,甲醛(4%)固定10 min,油红O染色10 min,60%异丙醇分化2 s,ddH_(2)O浸洗浸泡5 s后,苏木素染色3 min,ddH_(2)O浸泡30 s去浮色,1%盐酸酒精分化2 s,流水冲洗2 min返蓝,甘油明胶封片为条件进行油红O染色的效果较好,斑马鱼肝组织组织完整、背景清晰,脂滴染色效果较好。结论优化的斑马鱼油红O染色方法可以较为清晰地显示肝脏脂滴,可辨别细胞核轮廓位置,进而对斑马鱼肝病模型中的脂肪变性情况进行定位与半定量的分析。

高温高压O型染色机应力腐蚀的预防对策

高温高压O型染色机广泛应用于纺织印染行业,具有大容量、低浴比、高均染的优点。但在正常生产中,由于染液温度不断变化会导致染色机应力腐蚀。文章针对高温高压O型染色机存在应力腐蚀的问题,从选材,结构设计,制造,使用等方面提出了防止应力腐蚀的对策。