pH区带逆流色谱法分离制备荷梗中O-去甲荷叶碱

目的:建立pH区带逆流色谱法(pH-zone refining counter-current chromatography)分离制备荷梗中O-去甲荷叶碱的方法。方法:溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶7∶1∶9),上相添加三乙胺(10 mmol/L)作为固定相,下相添加盐酸(5 mmol/L)为流动相进行洗脱,在主机转速850 r/min、体积流量2 mL/min、检测波长272 nm条件下进行分离制备。结果:从2.10 g荷梗生物碱粗提物中一次分离得到53 mg O-去甲荷叶碱,纯度大于98%,通过MS、1H-NMR和13C-NMR进行了化学结构鉴定。结论:pH区带逆流色谱法是分离纯化荷梗中O-去甲荷叶碱的一种快速高效的分离方法。

pH区带逆流色谱法分离制备荷叶中生物碱

目的建立对荷叶生物碱进行分离的pH区带逆流色谱方法。方法溶剂系统为叔丁基甲醚-甲醇-水(4∶1∶5),上相添加三乙胺(10 mmol/L)作为固定相,下相添加盐酸(5 mmol/L)为流动相进行洗脱,在主机转速800 r/min、体积流量1.5 mL/min、检测波长254 nm条件下进行分离制备。结果从2.18 g荷叶提取物中一次分离得到N-去甲荷叶碱110 mg、O-去甲荷叶碱420 mg、荷叶碱310 mg和莲碱190 mg 4种生物碱,质量分数均大于98%;各化合物通过HPLC、MS和1H-NMR进行了化学结构鉴定。结论 pH区带逆流色谱法是一种快速高效的分离纯化荷叶生物碱的方法。

基于HPLC-QAMS同时测定荷叶水提物中6个成分的含量

目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定荷叶水提取物中O-去甲荷叶碱、槲皮素-3-O-桑布双糖苷、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、荷叶碱的含量。方法:色谱柱为Lamdo Stamsil C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^(-1),检测波长为270 nm,柱温为25℃,进样量为5μL。以O-去甲荷叶碱为内参物,计算其他5个成分的相对校正因子,并测定含量。结果:O-去甲荷叶碱、槲皮素-3-O-桑布双糖苷、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、荷叶碱分别在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均<3.0%,平均加样回收率为94.6%~108.0%,RSD为0.95%~2.1%。QAMS法测得荷叶水提物中上述6个成分的含量分别为0.23、3.43、1.69、10.59、41.23、0.69 mg·g^(-1)。结论:建立的荷叶水提物中6个成分的含量测定方法可靠,可用于其质量控制及药效基础研究。