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卡介苗培养滤出液中O-甘露糖基化蛋白的确定和解析
1
作者
杨淑凤
邓国英
孙文长
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期35-37,共3页
卡介苗作为预防结核病的唯一疫苗,不能提供全面的保护力,因此全面认识卡介苗的抗原非常关键。甘露糖复合物抗原是存在于分枝杆菌细胞壁上的一大类重要抗原,在细菌毒力以及宿主细胞相互作用等方面发挥作用,其中O-甘露糖基化蛋白在结核分...
卡介苗作为预防结核病的唯一疫苗,不能提供全面的保护力,因此全面认识卡介苗的抗原非常关键。甘露糖复合物抗原是存在于分枝杆菌细胞壁上的一大类重要抗原,在细菌毒力以及宿主细胞相互作用等方面发挥作用,其中O-甘露糖基化蛋白在结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌中陆续有报道,但在卡介苗中研究很少。利用Con-A亲和层析技术提纯了卡介苗培养滤出液中的O-甘露糖基化蛋白,并经过ConA-免疫印迹再次确证,最后利用质谱技术进行了解析,共确定出7个O-甘露糖基化蛋白,并对功能和糖基化位点进行了初步预测。O-甘露糖基化蛋白的确定和解析将有助于对卡介苗免疫机制的认识。
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关键词
卡介苗
o-甘露糖基化蛋白
Con-A亲和层析
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职称材料
钙粘蛋白糖基化修饰的研究进展
被引量:
1
2
作者
杨淑凤
邓国英
+1 位作者
刘欣
孙文长
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2016年第2期100-102,99,共4页
钙粘蛋白超家族是一大类依赖Ca^(2+)糖蛋白超家族分子,介导细胞连接、细胞与组织间质连接作用。在组织和器官的形态形成过程中发挥了重要作用。钙粘蛋白除了具有N-糖基化修饰外,还具有O-甘露糖基化修饰。就钙粘蛋白的糖基化修饰研究包...
钙粘蛋白超家族是一大类依赖Ca^(2+)糖蛋白超家族分子,介导细胞连接、细胞与组织间质连接作用。在组织和器官的形态形成过程中发挥了重要作用。钙粘蛋白除了具有N-糖基化修饰外,还具有O-甘露糖基化修饰。就钙粘蛋白的糖基化修饰研究包括最新的O-甘露糖基化修饰的进展加以综述。
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关键词
钙粘
蛋白
蛋白
糖基化
过程
糖基转移酶
o-甘露糖基化蛋白
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职称材料
肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响
被引量:
1
3
作者
贾丽秋
王静
+5 位作者
刘洋
杨淑凤
黄玉昆
张飞
万延民
马郁芳
《微生物学免疫学进展》
2020年第2期8-15,共8页
目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验...
目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验,确定Rv1096蛋白的亚细胞定位;通过氨基酸定点突变联合伴刀豆凝集素A(Concanavalin A, ConA)免疫印迹确定Rv1096的O-甘露糖基化位点;运用刃天青显色法检测MSRv1096对溶菌酶的抵抗力;通过巨噬细胞感染试验,分析了Rv1096对耻垢分枝杆菌细胞内存活能力和宿主细胞炎症应答的影响。结果确定了Rv1096在重组耻垢分枝杆菌MSRv1096中的亚细胞定位在细胞壁;发现Rv1096蛋白含有三个O-甘露糖基修饰位点(265Thr,266Ser,267Ser);细胞外测试结果表明,Rv1096能增强耻垢分枝杆菌对溶菌酶的抵抗能力,最低抑菌质量浓度从1.5 mg/mL升至2.5 mg/mL,而细胞感染显示其并不能显著增强耻垢分枝杆菌在人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)内的存活能力;定量PCR检测结果显示,过表达Rv1096的耻垢分枝杆菌刺激THP-1细胞分泌炎症因子(TNF-α,IL-6和IL-1β)的能力显著下降。通过平行对比证明若删除O-甘露糖基化位点(265Thr,266Ser,267Ser),对Rv1096基因功能无显著影响。结论 Rv1096是一个细胞壁相关蛋白,具有三个O-甘露糖基化位点。过表达Rv1096对耻垢杆菌在宿主细胞内的存活能力无显著影响,但能够降低宿主细胞对耻垢分枝杆菌的炎症因子应答,且上述功能不受O-甘露糖基化修饰影响。
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关键词
结核分枝杆菌
肽聚糖脱乙酰酶
o-甘露糖基化蛋白
溶菌酶抵抗
巨噬细胞
原文传递
题名
卡介苗培养滤出液中O-甘露糖基化蛋白的确定和解析
1
作者
杨淑凤
邓国英
孙文长
机构
大连医科大学微生物学教研室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期35-37,共3页
基金
大连医科大学基础医学院助飞基金(2016年第一批)
文摘
卡介苗作为预防结核病的唯一疫苗,不能提供全面的保护力,因此全面认识卡介苗的抗原非常关键。甘露糖复合物抗原是存在于分枝杆菌细胞壁上的一大类重要抗原,在细菌毒力以及宿主细胞相互作用等方面发挥作用,其中O-甘露糖基化蛋白在结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌中陆续有报道,但在卡介苗中研究很少。利用Con-A亲和层析技术提纯了卡介苗培养滤出液中的O-甘露糖基化蛋白,并经过ConA-免疫印迹再次确证,最后利用质谱技术进行了解析,共确定出7个O-甘露糖基化蛋白,并对功能和糖基化位点进行了初步预测。O-甘露糖基化蛋白的确定和解析将有助于对卡介苗免疫机制的认识。
关键词
卡介苗
o-甘露糖基化蛋白
Con-A亲和层析
Keywords
Bacillus Calmette-Guerin(BCG)
o-
mannosylated protein
ConA affinity
分类号
Q513.2 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
钙粘蛋白糖基化修饰的研究进展
被引量:
1
2
作者
杨淑凤
邓国英
刘欣
孙文长
机构
大连医科大学微生物学教研室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2016年第2期100-102,99,共4页
文摘
钙粘蛋白超家族是一大类依赖Ca^(2+)糖蛋白超家族分子,介导细胞连接、细胞与组织间质连接作用。在组织和器官的形态形成过程中发挥了重要作用。钙粘蛋白除了具有N-糖基化修饰外,还具有O-甘露糖基化修饰。就钙粘蛋白的糖基化修饰研究包括最新的O-甘露糖基化修饰的进展加以综述。
关键词
钙粘
蛋白
蛋白
糖基化
过程
糖基转移酶
o-甘露糖基化蛋白
Keywords
cadherin
protein-glycosylation
glycosyltransferases
o-
mannosylation
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响
被引量:
1
3
作者
贾丽秋
王静
刘洋
杨淑凤
黄玉昆
张飞
万延民
马郁芳
机构
大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
复旦大学附属华山医院感染科
大连医科大学基础医学院微生物学教研室
佳木斯大学基础医学院免疫学教研室
出处
《微生物学免疫学进展》
2020年第2期8-15,共8页
基金
国家自然科学基金(81671636)
文摘
目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验,确定Rv1096蛋白的亚细胞定位;通过氨基酸定点突变联合伴刀豆凝集素A(Concanavalin A, ConA)免疫印迹确定Rv1096的O-甘露糖基化位点;运用刃天青显色法检测MSRv1096对溶菌酶的抵抗力;通过巨噬细胞感染试验,分析了Rv1096对耻垢分枝杆菌细胞内存活能力和宿主细胞炎症应答的影响。结果确定了Rv1096在重组耻垢分枝杆菌MSRv1096中的亚细胞定位在细胞壁;发现Rv1096蛋白含有三个O-甘露糖基修饰位点(265Thr,266Ser,267Ser);细胞外测试结果表明,Rv1096能增强耻垢分枝杆菌对溶菌酶的抵抗能力,最低抑菌质量浓度从1.5 mg/mL升至2.5 mg/mL,而细胞感染显示其并不能显著增强耻垢分枝杆菌在人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)内的存活能力;定量PCR检测结果显示,过表达Rv1096的耻垢分枝杆菌刺激THP-1细胞分泌炎症因子(TNF-α,IL-6和IL-1β)的能力显著下降。通过平行对比证明若删除O-甘露糖基化位点(265Thr,266Ser,267Ser),对Rv1096基因功能无显著影响。结论 Rv1096是一个细胞壁相关蛋白,具有三个O-甘露糖基化位点。过表达Rv1096对耻垢杆菌在宿主细胞内的存活能力无显著影响,但能够降低宿主细胞对耻垢分枝杆菌的炎症因子应答,且上述功能不受O-甘露糖基化修饰影响。
关键词
结核分枝杆菌
肽聚糖脱乙酰酶
o-甘露糖基化蛋白
溶菌酶抵抗
巨噬细胞
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Peptidoglycan deacetylase
o-
mannosylated protein
Lysozyme resistance
Macrophage
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
卡介苗培养滤出液中O-甘露糖基化蛋白的确定和解析
杨淑凤
邓国英
孙文长
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
下载PDF
职称材料
2
钙粘蛋白糖基化修饰的研究进展
杨淑凤
邓国英
刘欣
孙文长
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2016
1
下载PDF
职称材料
3
肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响
贾丽秋
王静
刘洋
杨淑凤
黄玉昆
张飞
万延民
马郁芳
《微生物学免疫学进展》
2020
1
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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