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E.coli O86 O-Antigen全保护五糖重复单元的化学简易合成 被引量:2
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作者 程水红 魏国华 杜宇国 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期919-922,共4页
以5个单糖组分为原料,经过7步,以21%的总产率得到E.coliO86抗原全保护的五糖重复单元.在合成路线中,充分利用糖基化反应的立体选择性原则,结合HClO4-SiO2固体催化剂和"IP"策略,大大提高了合成的效率.整个合成路线设计操作简单... 以5个单糖组分为原料,经过7步,以21%的总产率得到E.coliO86抗原全保护的五糖重复单元.在合成路线中,充分利用糖基化反应的立体选择性原则,结合HClO4-SiO2固体催化剂和"IP"策略,大大提高了合成的效率.整个合成路线设计操作简单,选择性高,消耗低,产率高,可以用于快速高效地合成其它一些具有生物活性的寡糖分子. 展开更多
关键词 大肠杆菌O86型O-抗原 B血型抗原 寡糖合成
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Immunological Exploration of Helicobacter pylori Serotype O_(2) O-Antigen by Using a Synthetic Glycan Library
2
作者 Ming Zhao Guangzong Tian +4 位作者 Chunjun Qin Xiaopeng Zou Peter H. Seeberger Jing Hu Jian Yin 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期243-251,共9页
Helicobacter pylori(H.pylori)infection is a threat to human health.The lipopolysaccharide(LPS)O-antigen holds promise for developing vaccines.It is meaningful to explore the immunological activity of oligosaccharides ... Helicobacter pylori(H.pylori)infection is a threat to human health.The lipopolysaccharide(LPS)O-antigen holds promise for developing vaccines.It is meaningful to explore the immunological activity of oligosaccharides with different lengths and frameshifts for antigen development.Herein,a glycan library of H.pylori O2 O-antigen containing eight fragments is constructed.After screening with anti-H.pylori O2 LPS sera and patients’sera by glycan microarray,the disaccharide HPO2G-2b and trisaccharide HPO2G-3a show strong antigenicity and then are separately conjugated with carrier protein CRM197.Both glycoconjugates elicit a robust immunoglobulin G(IgG)immune response in rabbits.The anti-HPO2G-3a IgG antibodies possess a much stronger binding affinity with the LPS and bacteria of H.pylori O2 than the anti-HPO2G-2b IgG antibodies.There is no cross-reaction between both sera IgG antibodies with LPS and bacteria of H.pylori O1,O6,and E.coli.The results demonstrate the trisaccharide HPO2G-3a is a promising candidate for H.pylori vaccine development. 展开更多
关键词 GLYCOCONJUGATES Helicobacter pylori Immunology Microarrays o-antigen OLIGOSACCHARIDES
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Stereoselective Synthesis and Immunological Evaluation of Common O-antigen of P. mirabilis OE and P. vulgaris TG103
3
作者 Xiaopei Wu Jinsheng Lai +7 位作者 Kexin Yang Yunxia Xue Jinxi Liao Liming Wang Jian-song Sun Jing Hu Jian Yin Qingju Zhang 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期535-543,共9页
Proteus species especially Proteus mirabilis and Proteus vulgaris are zoonotic pathogens which can cause public health disease.Owing to their antibiotic-resistance,developing vaccines against these pathogens is urgent... Proteus species especially Proteus mirabilis and Proteus vulgaris are zoonotic pathogens which can cause public health disease.Owing to their antibiotic-resistance,developing vaccines against these pathogens is urgently required.Herein,we describe the first synthesis of the common O-antigen of Proteus mirabilis OE and Proteus vulgaris TG 103. 展开更多
关键词 Stereoselective glycosylation Proteus mirabilis OE proteus vulgaris TG 103 Common o-antigen Immunological evaluation Syntheticcarbohydrate-based vaccine Total synthesis
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鸭源致病性大肠杆菌O抗原与毒力基因检测及药敏试验 被引量:4
4
作者 罗干 邹宏 +6 位作者 任绍科 吴春霞 邹瑶 娄银莹 周洋 程方俊 郭建华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期713-721,共9页
【目的】探究荣昌、大足和隆昌三地鸭大肠杆菌分离株的O抗原、毒力基因及耐药性。【方法】将2014年—2021年鸭病料中分离得到的107株细菌在无菌条件下接种于麦康凯培养基中划线进行培养纯化,通过16S rDNA基因扩增测序和生化试验进行细... 【目的】探究荣昌、大足和隆昌三地鸭大肠杆菌分离株的O抗原、毒力基因及耐药性。【方法】将2014年—2021年鸭病料中分离得到的107株细菌在无菌条件下接种于麦康凯培养基中划线进行培养纯化,通过16S rDNA基因扩增测序和生化试验进行细菌鉴定,采用PCR技术对O抗原和16种毒力基因进行检测,采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验。【结果】107株分离株鉴定为大肠杆菌;O抗原鉴定试验鉴定出9种O抗原,其中优势抗原为O78(37.00%)、O7(25.00%),O121和O145(均为15.00%),并检测到5株O78+O145和O7+O145融合株;共检测出11种毒力因子,其中强致病性毒力基因有Tsh基因(检出率为25.23%)、fyuA基因(检出率为31.78%)、estB基因(检出率为31.78%)、Vat基因(检出率为2.80%)、iucA基因(检出率为44.56%)。3种毒力基因ompA、yijP和ibeB的携带率最高,分别为100.00%、96.26%和85.98%;药敏试验结果表明分离株对氨基糖苷类药物、米诺环素和多黏菌素最为敏感,对大环内酯类药物和克林霉素耐药,分离株均为多重耐药菌,30.00%的分离株表现为7重耐药。【结论】本研究鉴定到107株鸭源致病性大肠杆菌,其致病性和耐药性较强,毒力基因携带情况和耐药性检测发现大肠杆菌的致病力与其耐药性存在一定关系;O抗原检测发现了5株新型O抗原融合株,优势O抗原不断变化,说明西南地区大肠杆菌遗传结构正发生变化,可能存在新的菌体抗原。本研究结果为中国西南地区鸭大肠杆菌病防控及疫苗制备提供依据。 展开更多
关键词 鸭源大肠杆菌 O抗原 毒力基因 药敏试验
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禽致病性大肠杆菌fdtACB基因缺失株的生物学特性研究 被引量:1
5
作者 罗平 高宇杰 +5 位作者 张晓荟 张宁 韩先干 宋厚辉 韩月 程昌勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期568-574,共7页
为研究O抗原侧链岩藻糖合成酶基因fdtACB对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究以O_(2)血清型APEC DE17为亲本株,通过Red同源重组构建fdtACB基因缺失株与回补株,经PCR及测序鉴定确认缺失株ΔfdtACB和回补株CΔfdtACB均正确... 为研究O抗原侧链岩藻糖合成酶基因fdtACB对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究以O_(2)血清型APEC DE17为亲本株,通过Red同源重组构建fdtACB基因缺失株与回补株,经PCR及测序鉴定确认缺失株ΔfdtACB和回补株CΔfdtACB均正确构建。采用硝酸银染色法鉴定细菌脂多糖(LPS)图谱,采用western blot鉴定缺失株与O_(2)血清型O因子血清的反应性。硝酸银染色法结果显示,ΔfdtACB缺失株未产生与野生株一样完整的LPS图谱,表现为部分O抗原梯状条带缺失和移位;western blot结果显示,ΔfdtACB与大肠杆菌O_(2)血清型O因子血清无反应条带。各菌株培养16 h后每隔1 h测定OD600nm值,绘制生长曲线;于半固体培养基培养各菌株,通过测量细菌运动圈直径分析各菌株的运动能力,通过结晶紫染色法检测各菌株生物被膜(BF)形成能力,结果显示,ΔfdtACB缺失株、野生株和回补株间生长速率无明显差异(P>0.05);与野生株相比,ΔfdtACB缺失株的运动能力显著降低(P<0.01),BF形成能力显著升高(P<0.01)。以上结果表明fdtACB影响细菌O抗原完整性、运动及BF的形成。将各菌株分别感染DF-1细胞后通过细菌计数分析APEC对细胞的黏附及侵袭力,结果显示,ΔfdtACB对DF-1细胞的黏附及侵袭力均较野生株极显著降低(P<0.01)。以不同浓度各菌株腹腔注射感染大蜡螟后,根据5 d内各组大蜡螟死亡数量计算各菌株LD50,结果显示,除高剂量各菌株外,其它剂量各菌株注射后,ΔfdtACB组大蜡螟死亡数较其它组少,经计算野生株LD50为1.85×10^(2) cfu/mL,缺失株LD50为9.16×10^(2) cfu/mL,回补株LD50为8.0×10^(1) cfu/mL,缺失株致病力比野生株降低约5倍,表明fdtACB影响细菌感染性和致病力。综上所述,本研究首次证实大肠杆菌岩藻糖合成酶FdtACB参与O_(2)型APEC O的抗原合成,在细菌运动、BF形成和感染过程中发挥作用,该结果对掌握APEC O抗原侧链的生物学功能具有重要意义。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 脂多糖(LPS) O抗原侧链 岩藻糖 糖基合成酶
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一株鱼源致病性嗜水气单胞菌XDMG的全基因组测序及比较基因组分析
6
作者 郭少华 毛会丽 +5 位作者 刘征权 付美媛 赵平原 马文博 李旭东 关建义 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期291-306,共16页
探索致病性嗜水气单胞菌XDMG侵染鱼类的作用机制,对其基因组结构、功能和进化关系等基本特征与参考菌株进行比较分析。对嗜水气单胞菌XDMG进行全基因组测序,利用Newbler、SeqMan、Glimmer等软件对测序得到的原始数据进行组装、拼接、注... 探索致病性嗜水气单胞菌XDMG侵染鱼类的作用机制,对其基因组结构、功能和进化关系等基本特征与参考菌株进行比较分析。对嗜水气单胞菌XDMG进行全基因组测序,利用Newbler、SeqMan、Glimmer等软件对测序得到的原始数据进行组装、拼接、注释,再基于看家基因构建系统发育树分析,确定进化关系的基础上,与4株不同地区的嗜水气单胞菌进行基因组的比较分析。嗜水气单胞菌XDMG全基因组序列长4.99 Mb,GC含量为60.84%,共预测到4935个编码基因,有明确功能的基因有4137个,发现99个tRNA和3个rRNA;4061个基因具有直系同源族分类,3228个基因与基因本体论相关,与代谢通路有关的基因有2663个;在嗜水气单胞菌XDMG基因组中预测了101个串联重复序列和14个基因岛,具有AI-1、AI-2和AI-3三种QS系统的相关基因。通过基因组对比分析,嗜水气单胞菌XDMG与国内嗜水气单胞菌J-1菌株和美国来源的嗜水气单胞菌AL09_71菌株具有较近的亲缘关系;在毒力基因、外膜蛋白和O-抗原基因簇的比较中与美国来源的嗜水气单胞菌AL09_71保守性更高。通过对嗜水气单胞菌XDMG基因组进行较为全面的基因组注释及基因组的比较分析,为嗜水气单胞菌功能基因组学、基因工程疫苗方面的研究提供基础数据。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 全基因组测序 毒力基因 外膜蛋白 O-抗原
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黏蛋白型O⁃糖基化与结直肠癌基础和临床研究进展
7
作者 汪泽慧 张军 《胃肠病学》 北大核心 2023年第3期181-185,共5页
O⁃糖基化为黏蛋白常见的翻译后修饰,普遍存在于正常细胞和肿瘤细胞中。结直肠癌(CRC)细胞内O⁃糖基化相关的糖基转移酶、分子伴侣和表面的Tn抗原、sTn抗原、T抗原出现不同程度的失调,且以其特有方式参与CRC的发生、发展,包括侵袭和转移... O⁃糖基化为黏蛋白常见的翻译后修饰,普遍存在于正常细胞和肿瘤细胞中。结直肠癌(CRC)细胞内O⁃糖基化相关的糖基转移酶、分子伴侣和表面的Tn抗原、sTn抗原、T抗原出现不同程度的失调,且以其特有方式参与CRC的发生、发展,包括侵袭和转移、异常凋亡和增殖、免疫逃逸等,并作为新型肿瘤生物学标志物和潜在治疗靶点被广泛研究。本文就黏蛋白型O⁃糖基化与CRC的发生、发展及其临床应用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 黏蛋白型O⁃糖基化 结直肠肿瘤 糖基转移酶类 STN抗原
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假单胞菌ZS1鼠李糖基转移酶migA和wapR的缺失对细胞壁结构及鼠李糖脂合成的影响
8
作者 张增平 金扬帆 +2 位作者 马昀灏 杨支力 刘建华 《浙江海洋大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第4期352-359,共8页
假单胞菌ZS1是本实验室在前期工作中从油污中分离出的1株高产鼠李糖脂菌株。本实验拟探究阻断脂多糖O-抗原添加鼠李糖基对假单胞菌ZS1鼠李糖脂合成的影响。通过两步法敲除技术,构建了假单胞菌ZS1的wapR和migA缺失突变菌株。发酵结果表明... 假单胞菌ZS1是本实验室在前期工作中从油污中分离出的1株高产鼠李糖脂菌株。本实验拟探究阻断脂多糖O-抗原添加鼠李糖基对假单胞菌ZS1鼠李糖脂合成的影响。通过两步法敲除技术,构建了假单胞菌ZS1的wapR和migA缺失突变菌株。发酵结果表明wapR缺失突变株在培养过程中鼠李糖脂合成量显著增加,而migA缺失突变株则只有少量的提升。SDS-PAGE银染结果表明,wapR缺失突变菌株的脂多糖的组分出现显著变化,O-抗原部分几乎完全消失。而migA缺失突变菌株脂多糖组成无显著变化。通过对突变株和野生株在不同抗生素的梯度浓度培养,发现wapR缺失突变菌株对四环素浓度敏感性从125μg·mL^(-1)降低至31.2μg·mL^(-1),而migA缺失突变菌株对四环素的敏感性与野生株相仿,说明假单胞菌脂多糖的缺失能够提高细菌对抗生素的敏感性,从而降低病原菌的危害性。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 鼠李糖脂 脂多糖 O-抗原 基因敲除
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丝胶蛋白源Tn和T抗原的释放制备及质谱分析
9
作者 满丽娟 叶佳佳 +4 位作者 张德锋 邹籽华 黄琳娟 王仲孚 王承健 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期45-52,共8页
以蚕茧丝胶蛋白源Tn抗原和T抗原为研究对象,采用“一釜法”、氨水催化法和链霉蛋白酶E(PronaseE)水解法对丝胶蛋白O-糖链进行释放,并通过固相萃取柱进行分级纯化,以高效液相色谱仪(HPLC)进行分离制备;利用电喷雾质谱(ESI-MS)、串联质谱(... 以蚕茧丝胶蛋白源Tn抗原和T抗原为研究对象,采用“一釜法”、氨水催化法和链霉蛋白酶E(PronaseE)水解法对丝胶蛋白O-糖链进行释放,并通过固相萃取柱进行分级纯化,以高效液相色谱仪(HPLC)进行分离制备;利用电喷雾质谱(ESI-MS)、串联质谱(MS/MS)及在线液相色谱-质谱联用仪(Online LC-MS)进行了结构鉴定和定量分析.结果表明,丝胶蛋白中O-GalNAc含量为1.58μg/g,O-GalNAcGal含量为0.54μg/g,二者丰度比约为5.3∶1;并且氨水可高效释放出其还原性O-连接单糖GalNAc,通过液相色谱法可实现其精细分离纯化,而以等量PronaseE对丝胶蛋白水解可有效释放出Tn抗原和T抗原. 展开更多
关键词 Tn和T抗原 丝胶蛋白 O-糖链释放 高效液相色谱 质谱
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强直性脊柱炎患者HLA-B27核酸、炎症指标、免疫指标的临床意义分析 被引量:2
10
作者 张冬青 赵娇 龙丽娟 《检验医学与临床》 CAS 2023年第13期1846-1849,共4页
目的探讨人类白细胞抗原B27(HLA-B27)核酸、炎症指标、免疫指标在强直性脊柱炎(AS)患者中的临床意义。方法纳入73例AS患者(AS组)及73例健康体检者(健康对照组),检测外周血HLA-B27核酸、炎症指标[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、前清蛋白(Prea)... 目的探讨人类白细胞抗原B27(HLA-B27)核酸、炎症指标、免疫指标在强直性脊柱炎(AS)患者中的临床意义。方法纳入73例AS患者(AS组)及73例健康体检者(健康对照组),检测外周血HLA-B27核酸、炎症指标[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、前清蛋白(Prea)]、免疫指标[免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM、IgE、补体C3(C3)、补体C4(C4)、血清总补体(CH50)]及抗链球菌溶血素O(ASO)、类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)。采用受试者工作特征曲线分析HLA-B27核酸、hs-CRP和ESR对AS的诊断效能。结果AS组HLA-B27核酸阳性率及ESR、hs-CRP、ASO、IgA水平显著高于健康对照组(P<0.05),hs-CRP在不同分级AS患者中比较,差异均有统计学意义(P<0.05);AS组Prea、RF、IgG、IgM、IgE、C3、C4、CH50与健康对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HLA-B27核酸、hs-CRP和ESR联合检测诊断AS的曲线下面积为0.996(95%CI:0.991~0.999),大于各项指标单独诊断(P<0.05)。结论HLA-B27核酸、hs-CRP及ESR联合检测能够有效提高AS的检出率,在AS的辅助诊断中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 人类白细胞抗原B27 超敏C反应蛋白 抗链球菌溶血素O 红细胞沉降率 免疫球蛋白
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江苏某奶牛场健康奶牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究 被引量:12
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作者 薛涛 顾丛丛 +4 位作者 高崧 焦新安 周琼 张文俊 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期830-837,共8页
通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eae... 通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eaeA、ehxA共4个基因进行检测,对检测出的阳性样品,非O157STEC采用多重PCR结合CT-SMAC平板的分离方法,而O157STEC通过免疫磁珠结合O157显色平板的分离方法。结果表明,该奶牛场STEC的初筛率为16.1%(112/696),分离率为11.1%(77/696)。分离株属于35种O血清型和60种O∶H血清型。该场的优势血清型为O4、O26和O93,O157在该场存在,但并非优势血清型。77个分离株中,stx2基因的检出率为68.8%,远远高于其它毒力基因,如stx1(19.5%)、eaeA(11.7%)和ehxA(20.8%)。该场分离到一些O157和O26血清型的菌株,对小鼠具有较强的致病性。奶牛是STEC的天然宿主,可健康带菌。除了O157STEC外,非O157STEC中一些高致病力菌株对人类的健康也存在威胁。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠杆菌 奶牛 多重PCR O抗原 H抗原 毒力基因
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CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应 被引量:8
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作者 景志忠 蒙学莲 +7 位作者 窦永喜 陈国华 房永祥 黄银君 王超英 刘西兰 张军 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期862-866,共5页
作者应用含CpG基序序列的重组质粒(即CpG DNA)作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明:CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促... 作者应用含CpG基序序列的重组质粒(即CpG DNA)作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明:CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体,其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍。CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪,其增强抗原诱导的特异性抗体滴度最高可达标准疫苗的4倍以上,也显著高于空载体疫苗对照 与病毒纯化抗原配伍免疫动物,攻毒后其免疫保护效力的PD50高达13.00,远高于标准疫苗对照(PD504.69)。在CpG DNA重组质粒剂量选择试验中,含低剂量的CpG DNA疫苗(50、200μg.头份-1)都比高剂量组(500μg.头份-1)诱导的抗体滴度高,其中50和200μg.头份-1的CpG DNA剂量,在接种后14~32 d诱导的抗体滴度高达1∶1500,是标准疫苗的4~5倍,而500μg.头份-1剂量诱导的抗体仅是标准疫苗的2倍,说明CpG DNA重组质粒在低剂量时即可发挥强烈的佐剂效应。研究表明CpG DNA对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗有较强的免疫佐剂效应,且使用剂量低,应用前景广阔。 展开更多
关键词 CPGDNA O型口蹄疫病毒 抗原 佐剂效应
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人工繁育蝇蛆对鸡免疫应答功能的影响 被引量:11
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作者 郎书源 国果 +2 位作者 洪牧 王惠群 吴建伟 《贵阳医学院学报》 CAS 2004年第4期287-289,共3页
目的 :观察在饲料中添加鲜蛆、进口鱼粉、国产鱼粉对鸡免疫应答功能的影响。方法 :选成年罗曼褐壳蛋鸡 ,在基本饲料相同的前提下 ,添加鲜蝇蛆、进口鱼粉、国产鱼粉养鸡 ,每种饲料均设全量和减量两组 ,共 6组 ,每隔一定时间以伤寒沙门菌... 目的 :观察在饲料中添加鲜蛆、进口鱼粉、国产鱼粉对鸡免疫应答功能的影响。方法 :选成年罗曼褐壳蛋鸡 ,在基本饲料相同的前提下 ,添加鲜蝇蛆、进口鱼粉、国产鱼粉养鸡 ,每种饲料均设全量和减量两组 ,共 6组 ,每隔一定时间以伤寒沙门菌O抗原免疫 ,测定血清凝集效价和脾脏指数 ,观察鸡的免疫应答情况 ,每组随机设立未免疫对照。结果 :血清凝集效价各全量组之间差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,减量鲜蝇蛆和减量国产鱼粉差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,但均高于减量进口鱼粉组 (P <0 0 5 ) ;各饲料减量组凝集效价均明显高于全量组 (P <0 0 5 ) ;脾脏增大以全量和减量鲜蛆组、全量进口鱼粉组、减量国产鱼粉组最为明显 ,增大率达 77 2 8%(P <0 0 0 1 )。结论 展开更多
关键词 蝇科 幼虫 沙门菌 伤寒 O抗原
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大肠杆菌O11 O-抗原基因簇序列的破译及特异分子标识的鉴定 被引量:3
14
作者 王威 彭霞 +2 位作者 王荃 程剑松 王磊 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期341-346,共6页
大肠杆菌O11是一种可在人畜间交叉传染的强致病菌,具有潜在流行性爆发的危险。现完成了O11 O-抗原基因簇的破译,筛选和鉴定了多种特异分子标识,并实现了对大肠杆菌O11的快速、灵敏和准确的分子分型检测。利用鸟枪法测定大肠杆菌O11 O-... 大肠杆菌O11是一种可在人畜间交叉传染的强致病菌,具有潜在流行性爆发的危险。现完成了O11 O-抗原基因簇的破译,筛选和鉴定了多种特异分子标识,并实现了对大肠杆菌O11的快速、灵敏和准确的分子分型检测。利用鸟枪法测定大肠杆菌O11 O-抗原基因簇的序列全长为14180bp,生物信息学方法分析序列结构,共发现12个基因:GDP-L型岩藻糖合成途径基因(gmd,fcl,gmm,manC,manB)、UDP-N乙酰葡萄糖C4异构酶基因(gne)、O-抗原转运酶基因(wzx)、O-抗原聚合酶基因(wzy)和4个糖基转移酶基因;用PCR方法筛选出2个针对大肠杆菌O11的特异基因和4对特异引物,并进行环境样品检测实验鉴定了该PCR检测方法的灵敏度;设计并筛选出8条针对大肠杆菌O11的特异探针。 展开更多
关键词 大肠杆菌O11 O-抗原基因簇 分子分型 特异基因 探针
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O_(139,142,26)混合血清型大肠杆菌的O-抗原基因簇的破译 被引量:4
15
作者 许亚卓 杨春柳 +3 位作者 刘文鑫 杨旭东 李海滨 师东方 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期101-105,共5页
应用鸟枪法扩增了一株从水肿病病死猪肠系膜淋巴结分离到的O混合血清型(O139,142,26)大肠杆菌的O-抗原基因,测序结果显示扩增的O-抗原基因长度为11 771 bp。通过生物信息学的方法对其结构进行分析,发现其具有10个开放阅读框架及功能基... 应用鸟枪法扩增了一株从水肿病病死猪肠系膜淋巴结分离到的O混合血清型(O139,142,26)大肠杆菌的O-抗原基因,测序结果显示扩增的O-抗原基因长度为11 771 bp。通过生物信息学的方法对其结构进行分析,发现其具有10个开放阅读框架及功能基因种类。经与发表的大肠杆菌O139、O26和O142的O-抗原基因序列及O-抗原糖基链的结构进行比对,进化树分析,跨膜蛋白的结构分析以及对乳糖前体(Glc)添加乙酰基的机制分析,结果表明,该O混合血清型大肠杆菌的O-抗原基因与大肠杆菌O139的O-抗原基因进化关系最近。 展开更多
关键词 大肠杆菌 O混合血清型 O-抗原基因
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大肠杆菌O150 O-抗原基因簇的破译和dTDP-鼠李糖合成酶基因的鉴定 被引量:2
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作者 郭宏杰 冯露 +3 位作者 张淳 徐建国 王磊 李燚 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期34-40,共7页
利用鸟枪法对大肠杆菌O1 5 0O_抗原基因簇进行测序 ,序列全长 1 35 5 1bp ,用生物信息学的方法进行序列分析 ,共发现 1 1个基因 ,分别为鼠李糖合成酶基因 (rmlB、rmlD、rmlA、rmlC)糖基转移酶基因 (3个 )、O_抗原转运酶基因 (wzx)和O_... 利用鸟枪法对大肠杆菌O1 5 0O_抗原基因簇进行测序 ,序列全长 1 35 5 1bp ,用生物信息学的方法进行序列分析 ,共发现 1 1个基因 ,分别为鼠李糖合成酶基因 (rmlB、rmlD、rmlA、rmlC)糖基转移酶基因 (3个 )、O_抗原转运酶基因 (wzx)和O_抗原聚合酶基因 (wzy) ,另外还有两个基因功能未知。用PCR的方法筛选出了针对大肠杆菌O1 5 0的特异基因 ,可以用于基因芯片或PCR方法对大肠杆菌O1 5 0的快速检测。另外 ,通过进化分析发现大肠杆菌O1 5 0的O_抗原基因簇中携带有典型的大肠杆菌鼠李糖合成酶基因 。 展开更多
关键词 大肠杆菌 0-抗原 特异基因 鼠李糖
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表达霍乱CT-B和LPS-O抗原的鼠伤寒菌苗株的构建 被引量:7
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作者 陈东立 马清钧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期47-52,共6页
将编码霍乱CTB和LPSO抗原的基因与载体质粒pYA248重组后,转入ΔcyaΔcrpΔasd减毒鼠伤寒疫苗株x4072,构建成无药物抗性、带双价抗原的工程菌株x4072(pMG306)。该菌株能分泌表达特异的霍... 将编码霍乱CTB和LPSO抗原的基因与载体质粒pYA248重组后,转入ΔcyaΔcrpΔasd减毒鼠伤寒疫苗株x4072,构建成无药物抗性、带双价抗原的工程菌株x4072(pMG306)。该菌株能分泌表达特异的霍乱CTB抗原,并且在菌体表面同时表达霍乱和鼠伤寒的O抗原。小鼠腹腔免疫和攻击试验表明该菌苗株对霍乱毒株的攻击具有良好的保护作用。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 CT-B抗原 LPS-O抗原 鼠伤寒杆菌 疫苗
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5种大肠杆菌O抗原定型血清的制备 被引量:2
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作者 辛凌翔 魏财文 +6 位作者 张媛 李建 王秀丽 彭国瑞 张一帜 彭小兵 蒋玉文 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期21-25,30,共6页
本研究以大肠杆菌参考菌株CVCC1369(O26)、CVCC3800(O153)、CVCC1489(O157)、CVCC3739(O159)、CVCC3807(O163)为菌种制备免疫抗原并免疫家兔,获得5种大肠杆菌O抗原定型原血清,而后制备多种吸收抗原以消除5种原血清的非特异性凝集素。通... 本研究以大肠杆菌参考菌株CVCC1369(O26)、CVCC3800(O153)、CVCC1489(O157)、CVCC3739(O159)、CVCC3807(O163)为菌种制备免疫抗原并免疫家兔,获得5种大肠杆菌O抗原定型原血清,而后制备多种吸收抗原以消除5种原血清的非特异性凝集素。通过微量凝集试验的方法,确定各血清的凝集价。最终确定了5种大肠杆菌O抗原定型血清的制备方法,为进一步改进大肠杆菌O抗原定型血清的制备工艺提供了思路和依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 O抗原 定型血清
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腰果过敏原Ana o 2结构及抗原表位预测 被引量:4
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作者 朱倩倩 吴序栎 +4 位作者 肖杰 成小娟 lujun 刘志刚 徐宏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期141-145,共5页
腰果是引起人们过敏的主要食物之一。作者采用生物信息学方法,通过Pubmed网络服务器、生物信息分析软件SOPMA、swiss-model网络服务器、DNAStar生物分析软件等对腰果主要过敏原Ana o 2的结构和抗原表位进行预测,分析Ana o 2蛋白的抗原... 腰果是引起人们过敏的主要食物之一。作者采用生物信息学方法,通过Pubmed网络服务器、生物信息分析软件SOPMA、swiss-model网络服务器、DNAStar生物分析软件等对腰果主要过敏原Ana o 2的结构和抗原表位进行预测,分析Ana o 2蛋白的抗原表位可能是108-111,181-186,217-218,234-238,244-255,283-287。这为腰果过敏原的进一步研究提供理论参考,并对开发低过敏腰果制品提供帮助。 展开更多
关键词 腰果 Anao2 结构 抗原表位
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福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法的建立及应用 被引量:2
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作者 罗霞 王建平 孙强正 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期501-505,共5页
目的建立福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法。方法根据福氏志贺菌4av和Yv血清型O抗结构,针对O抗合成基因wzx、IV型抗原决定基因gtrIV和MASF IV-1抗原决定基因opt,建立血清型4av和Yv的PCR鉴定方法。并应用该方法对126株福氏志贺菌临床... 目的建立福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法。方法根据福氏志贺菌4av和Yv血清型O抗结构,针对O抗合成基因wzx、IV型抗原决定基因gtrIV和MASF IV-1抗原决定基因opt,建立血清型4av和Yv的PCR鉴定方法。并应用该方法对126株福氏志贺菌临床分离株进行血清型检测。结果建立了一种福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法,在一个反应中包括4对引物,Yv血清型PCR扩增为wzx及opt阳性;4av血清型PCR扩增为wzx、opt及gtrIV阳性。该方法可将4av和Yv血清型与目前已知的其他福氏志贺菌血清型完全区分。对126株不同血清型福氏志贺菌临床分离株的鉴定结果显示,该方法具有很好的特异性。结论本研究建立的福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法,可以用于志贺菌检测和监测。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 Yv血清型 4av血清型 O抗修饰基因 PCR方法
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